致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
·番茄果实成熟研究进展 | 第12-16页 |
·乙烯途径与果实成熟 | 第12-13页 |
·转录因子与果实成熟 | 第13-15页 |
·表观遗传调控与果实成熟 | 第15-16页 |
·植物MicroRNA研究进展 | 第16-18页 |
·microRNA简介 | 第16-17页 |
·植物MicroRNA的生物功能 | 第17-18页 |
·研究的目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 实验材料和方法 | 第20-27页 |
·材料与仪器 | 第20-21页 |
·植物材料 | 第20页 |
·菌株与病毒载体 | 第20页 |
·试剂与仪器 | 第20-21页 |
·基本实验方法 | 第21-27页 |
·植物总RNA提取(试剂盒法) | 第21-22页 |
·反转录(Tiangen试剂盒) | 第22-23页 |
·PCR | 第23-24页 |
·PCR产物纯化回收(试剂盒法) | 第24页 |
·连接 | 第24页 |
·转化 | 第24页 |
·菌落PCR鉴定重组质粒 | 第24-25页 |
·提取重组质粒(试剂盒法) | 第25-27页 |
第三章 过表达SlymiR156/7 会影响番茄果实成熟和软化 | 第27-45页 |
·实验材料 | 第27页 |
·植物材料 | 第27页 |
·载体材料 | 第27页 |
·菌株材料 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-30页 |
·制备线性化DNA | 第27-28页 |
·体外转录 | 第28页 |
·PVX病毒摩擦接种烟草及病汁叶的收集 | 第28-29页 |
·质粒电击转化农杆菌 | 第29页 |
·TRV病毒浸润接种烟草及病汁叶的收集 | 第29-30页 |
·病汁液注射接种番茄 | 第30页 |
·实验结果 | 第30-42页 |
·SlymiR156/7 在果实不同发育阶段的表达 | 第30-33页 |
·构建病毒过表达载体 | 第33-35页 |
·病汁叶注射番茄AC果实 | 第35-37页 |
·qRT-PCR检测成熟相关转录因子的表达量 | 第37-40页 |
·PVX/GFP病毒载体接种烟草和番茄表型分析 | 第40-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
第四章 沉默甲基化相关基因会诱导突变体Cnr果实成熟 | 第45-65页 |
·实验材料 | 第45页 |
·植物材料 | 第45页 |
·载体材料 | 第45页 |
·菌株材料 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-47页 |
·制备线性化DNA(方法见 3.2.1) | 第45页 |
·体外转录(方法 3.2.1) | 第45页 |
·PVX病毒摩擦接种烟草及病汁叶的收集(方法见 3.2.3) | 第45页 |
·病汁液注射接种番茄(方法见 3.2.6) | 第45页 |
·植物基因组DNA提取 | 第45-46页 |
·重亚硫酸盐处理基因组DNA | 第46页 |
·PCR检测基因组甲基化水平 | 第46-47页 |
·实验结果 | 第47-63页 |
·构建PVX病毒干涉载体 | 第47-48页 |
·病汁叶注射Cnr果实 | 第48-55页 |
·qRT-PCR检测SlCMT3在果实不同生长阶段的表达量 | 第55-56页 |
·qTR-PCR检测成熟相关基因的表达量 | 第56-59页 |
·DNA甲基化测序 | 第59-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
第五章 全文总结 | 第65-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
附录 1:常用试剂及配方 | 第72-73页 |
附录 2:缩略语表 | 第73-74页 |
个人简历 | 第74-75页 |