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耳部术腔上皮缺损组织工程学修复的基础研究

中英文缩略词表第1-12页
中文摘要第12-15页
Abstract第15-19页
前言第19-23页
第一部分 种子细胞分离培养和鉴定第23-30页
 1 引言第23页
 2 实验材料第23-24页
   ·实验动物第23页
   ·主要试剂第23-24页
   ·主要仪器第24页
 3 实验方法第24-26页
   ·腹部脂肪的取材第24页
   ·ADSCs的原代培养第24页
   ·ADSCs的传代培养第24-25页
   ·ADSCs的多向分化能力鉴定第25页
     ·成脂诱导第25页
     ·成骨诱导第25页
   ·ADSCs表面抗原检测第25-26页
   ·ADSCs增殖第26页
 4 实验结果第26-27页
   ·ADSCs形态学观察第26-27页
   ·ADSCs分化潜能鉴定第27页
   ·ADSCs表面抗原检测第27页
   ·ADSCs生长曲线测定第27页
 5 讨论第27-30页
第二部分 ADSC aggregates-ECM复合物培养第30-40页
 1 引言第30页
 2 实验材料第30-31页
   ·支架材料第30页
   ·主要试剂第30页
   ·主要仪器第30-31页
 3 实验方法第31-35页
   ·ECM的HE染色第31-32页
   ·ADSC aggregates-ECM复合物构建第32页
   ·ADSC aggregates-ECM复合物检测第32-35页
     ·SEM观察ADSCs粘附性及成聚合物状态第32页
     ·激光共聚焦显微镜观察ADSCs在ECM上活性和凋亡情况第32-33页
     ·流式细胞分析ADSCs在ECM上生长周期情况第33页
     ·细胞因子表达的检测第33-35页
       ·ADSCs和复合物总RNA的提取第33-34页
       ·ADSCs和复合物c DNA的反转录第34页
       ·RT-PCR检测第34-35页
       ·统计第35页
 4 结果第35-36页
   ·ECM形态学观察第35页
   ·ADSCs在ECM中培养和形态学观察第35-36页
   ·ADSCs在ECM中凋亡情况第36页
   ·ADSCs在ECM中生长周期情况第36页
   ·ADSCs在ECM中细胞因子和蛋白表达量的比较第36页
 5 讨论第36-40页
   ·支架的选择第36-38页
   ·ECM支架对ADSCs的影响第38页
   ·细胞与支架表层界面的相互作用第38-40页
第三部分 ADSC aggregates -ECM修复兔急性皮肤创面效果的体内检测第40-56页
 1 引言第40页
 2 实验材料第40-41页
   ·实验动物和支架材料第40-41页
   ·主要试剂第41页
   ·主要仪器第41页
 3 实验方法第41-45页
   ·实验动物的饲养第41页
   ·动物创面模型的建立和移植物移植第41-42页
     ·新西兰大白兔耳廓全层皮肤缺损模型的建立第41-42页
     ·新西兰大白兔外耳道内壁全层皮肤缺损模型的建立第42页
   ·实验动物取材和组织形态学的比较实验方法第42-43页
     ·三组动物创面大小比较第42页
     ·三组动物创面组织炎症和愈合后瘢痕情况的比较第42-43页
   ·创面相关细胞因子表达情况检测第43-44页
     ·蛋白样品的提取第43页
     ·蛋白含量的测定第43页
     ·SDS-PAGE电泳第43-44页
     ·转膜第44页
     ·封闭第44页
     ·免疫反应第44页
     ·化学发光第44页
   ·统计第44-45页
 4 结果第45-46页
   ·大体观察第45页
   ·组织学HE染色第45-46页
   ·外耳道内壁创面相关细胞因子表达情况第46页
 5 讨论第46-49页
   ·移植物促进创面愈合及作用机制第46-48页
   ·动物模型的选择第48-49页
 附图第49-56页
结论第56-57页
参考文献第57-66页
附录第66-68页
致谢第68-69页
综述一第69-77页
 参考文献第73-77页
综述二第77-87页
 参考文献第84-87页

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