| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 文献综述 | 第14-21页 |
| 第一章 动物病毒感染诱导细胞周期阻滞研究进展 | 第14-21页 |
| ·细胞周期概述 | 第14-15页 |
| ·细胞间期 | 第14页 |
| ·细胞分裂期 | 第14-15页 |
| ·细胞周期调控 | 第15-16页 |
| ·细胞周期蛋白(Cyclin) | 第15页 |
| ·细胞周期依赖性蛋白激酶(CDKs) | 第15-16页 |
| ·细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子(CKI) | 第16页 |
| ·细胞周期监测点 | 第16页 |
| ·病毒感染与细胞周期 | 第16-17页 |
| ·病毒感染对细胞周期的影响及相应的调控机制 | 第16-17页 |
| ·细胞周期的变化对病毒复制的影响 | 第17页 |
| ·p53在细胞周期和病毒感染中的调控作用 | 第17-19页 |
| ·p53分子简介 | 第17-18页 |
| ·p53在细胞周期中的调控作用 | 第18页 |
| ·p53在病毒感染中的调控作用 | 第18-19页 |
| ·PCV2感染对细胞周期的影响 | 第19页 |
| ·PCV2病毒简介 | 第19页 |
| ·PCV2感染对细胞周期的影响 | 第19页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 试验研究 | 第21-44页 |
| 第二章 p53基因敲除细胞的构建及鉴定 | 第21-32页 |
| ·试剂材料 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·主要试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| ·重组目的质粒的构建 | 第22-24页 |
| ·慢病毒包装 | 第24页 |
| ·慢病毒滴度测定 | 第24-26页 |
| ·确定嘌呤霉素筛选的最适浓度 | 第26页 |
| ·筛选稳定感染的阳性细胞 | 第26页 |
| ·Western Blotting检测 | 第26-27页 |
| ·细胞基因组测序法鉴定 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-30页 |
| ·p53基因敲除位点的确定 | 第28页 |
| ·双酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·Western blotting检测构建细胞的p53基因敲除情况 | 第29页 |
| ·细胞基因组测序 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 PCV2感染对细胞周期的影响 | 第32-39页 |
| ·试剂材料 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·试验溶液的配制 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·细胞同步化处理 | 第32-33页 |
| ·流式细胞术测定细胞周期 | 第33页 |
| ·病毒的绝对定量 | 第33页 |
| ·Western blotting检测细胞周期相关蛋白的表达 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·PCV2感染对非同步化PK-15细胞周期的影响 | 第33-34页 |
| ·PCV2感染对同步化PK-15细胞周期的影响 | 第34-35页 |
| ·病毒的绝对定量 | 第35-36页 |
| ·PCV2感染对细胞周期相关蛋白的影响 | 第36-37页 |
| ·细胞各时期PCV2-Cap蛋白的表达情况 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第四章 p53在PCV2诱导细胞周期阻滞和其自身复制中的作用 | 第39-44页 |
| ·试剂材料 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·主要试剂的配制 | 第39页 |
| ·方法 | 第39页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第39页 |
| ·病毒的绝对定量 | 第39页 |
| ·Western blotting检测细胞周期相关蛋白 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·p53基因敲除抑制PCV2诱导的S期细胞阻滞 | 第39-41页 |
| ·p53基因敲除抑制PCV2在PK-15细胞内的复制 | 第41页 |
| ·p53敲除对PCV2感染细胞周期蛋白的影响 | 第41-42页 |
| ·p53基因敲除抑制PCV2-Cap蛋白的表达 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 结论与创新点 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 主要缩略词和中英文对照表（Abbreviation Index） | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
