内容摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-23页 |
第一节 无脊椎动物先天免疫概述 | 第10-17页 |
·引言 | 第10-11页 |
·细胞免疫 | 第11-14页 |
·体液免疫 | 第14-17页 |
第二节 无脊椎动物酚氧化酶级联反应概述 | 第17-22页 |
·引言 | 第17页 |
·酚氧化酶级联反应的组成 | 第17-20页 |
·酚氧化酶原级联反应的激活 | 第20页 |
·酚氧化酶原级联反应的调控 | 第20-22页 |
第三节 本研究的意义及技术路线 | 第22-23页 |
第二章 LGBP基因表达模式分析 | 第23-36页 |
第一节 前言 | 第23-24页 |
第二节 材料与方法 | 第24-30页 |
·中华绒螯蟹体内PAMP免疫注射、样品收集 | 第24-26页 |
·EsLGBP的组织表达检测 | 第26-28页 |
·三种PAMP免疫刺激后EsLGBP的诱导表达检测 | 第28-30页 |
第三节 结果 | 第30-34页 |
·EsLGBP的组织表达分析 | 第30-31页 |
·三种PAMP免疫刺激后EsLGBP的诱导表达模式分析 | 第31-34页 |
第四节 讨论 | 第34-36页 |
第三章 rEsLGBP参与酚氧化酶原激活系统等免疫反应研究 | 第36-59页 |
第一节 前言 | 第36-37页 |
第二节 材料与方法 | 第37-48页 |
·重组rEsLGBP表达载体的构建 | 第37-39页 |
·EsLGBP重组蛋白的表达、纯化并复性 | 第39-42页 |
·r EsLGBP与不同病原菌及PAMP结合实验 | 第42-43页 |
·蛋白印迹检测 | 第43-45页 |
·r EsLGBP的血细胞调理活性检测(包裹作用) | 第45页 |
·r EsLGBP诱导黑化作用的检测 | 第45-46页 |
·E-GBP影响酚氧化酶酶活性的检测 | 第46-48页 |
第三节 结果 | 第48-56页 |
·重组r EsLGBP的分析 | 第48-50页 |
·重组r EsLGBP与微生物和病原模式分子结合活性分析 | 第50-51页 |
·重组r EsLGBP的血细胞调理活性分析 | 第51-52页 |
·重组r EsLGBP诱导黑化作用的分析 | 第52-54页 |
·重组r EsLGBP对酚氧化酶酶活性的影响 | 第54-56页 |
第四节 讨论 | 第56-59页 |
第四章 EsLGBP体外干扰后,酚氧化酶原激活系统相关基因表达量的检测 | 第59-66页 |
第一节 前言 | 第59-60页 |
第二节 材料与方法 | 第60-62页 |
·中华绒螯蟹原代血细胞的培养 | 第60页 |
·EsLGBP的体外干扰 | 第60-61页 |
·EsLGBP干扰后对PO-AS相关基因的检测 | 第61-62页 |
第三节 结果 | 第62-65页 |
·干扰效果检测 | 第62-63页 |
·干扰LGBP后,酚氧化酶原激活系统相关基因表达量的检测 | 第63-65页 |
第四节 讨论 | 第65-66页 |
第五章 总结与展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
附录 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |