| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-26页 |
| ·病原学 | 第13-16页 |
| ·分类 | 第13-14页 |
| ·结构和基因组 | 第14-16页 |
| ·生物学和物理化学性质 | 第16页 |
| ·病毒分离培养 | 第16页 |
| ·流行病学 | 第16-18页 |
| ·世界流行情况 | 第16-17页 |
| ·美国流行情况 | 第17-18页 |
| ·传播 | 第18页 |
| ·发病机制 | 第18-20页 |
| ·组织嗜性 | 第18-19页 |
| ·病毒肠道复制 | 第19页 |
| ·病理生理学 | 第19页 |
| ·抵抗PED的年龄因素 | 第19页 |
| ·急性病毒血症 | 第19-20页 |
| ·免疫应答 | 第20页 |
| ·病毒衰减 | 第20页 |
| ·流行性PED与地方性PED | 第20-21页 |
| ·流行性PED | 第20-21页 |
| ·地方性PED和细菌病毒共感染 | 第21页 |
| ·病变 | 第21-22页 |
| ·眼观病变 | 第21-22页 |
| ·组织学病变 | 第22页 |
| ·免疫预防 | 第22-23页 |
| ·流行病PED | 第22页 |
| ·地方性PED | 第22-23页 |
| ·诊断 | 第23页 |
| ·疫苗 | 第23-24页 |
| ·治疗 | 第24-25页 |
| ·总结 | 第25页 |
| ·本研究的特色 | 第25-26页 |
| 第二章 PEDV部分N基因的原核表达及表达产物的反应原性分析 | 第26-50页 |
| ·试验材料 | 第26-29页 |
| ·病毒 | 第26页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·载体 | 第26页 |
| ·RNA提取及PCR主要试剂 | 第26页 |
| ·工具酶 | 第26-27页 |
| ·蛋白质分子量标准 | 第27页 |
| ·试剂盒 | 第27页 |
| ·蛋白印迹转移膜 | 第27页 |
| ·溶液 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·试验方法 | 第29-42页 |
| ·PEDV N-450基因合成 | 第29-32页 |
| ·构建克隆载体PMDTM18-T-N450DH5α | 第32-36页 |
| ·表达载体构建 | 第36-39页 |
| ·表达载体在大肠杆菌中诱导表达 | 第39-41页 |
| ·蛋白纯化工艺研究 | 第41-42页 |
| ·Western blotting分析 | 第42页 |
| ·试验结果 | 第42-48页 |
| ·N-450基因PCR | 第42页 |
| ·克隆载体的构建 | 第42-44页 |
| ·表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·重组表达载体的诱导表达 | 第45-46页 |
| ·重组表达载体的可溶性鉴定 | 第46-47页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·Western blotting检测 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·目的基因的选择 | 第48-49页 |
| ·感受态细胞的选择 | 第49页 |
| ·诱导条件优化 | 第49页 |
| ·染料选择 | 第49-50页 |
| 第三章 PEDV流行株部分N基因重组蛋白的间接ELISA方法建立 | 第50-60页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·测定蛋白浓度 | 第50-51页 |
| ·洗脱液透析浓缩 | 第51页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第51-53页 |
| ·rnPED-ELISA性能评价 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·蛋白浓度测定结果 | 第54页 |
| ·重组N蛋白的定量分析 | 第54页 |
| ·rnPED-ELISA试验条件摸索 | 第54-56页 |
| ·SN试验相关性分析 | 第56页 |
| ·与商品化试剂盒比较 | 第56-57页 |
| ·流行病学调查 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| ·ELISA工作条件的确定 | 第58页 |
| ·抗原的纯度对ELISA的影响 | 第58页 |
| ·临床检测结果 | 第58-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表论文的目录 | 第72页 |
