红树林土壤放线菌新种的发现及活性代谢产物研究
摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
本文所用到的缩略词 | 第8-15页 |
第一章 前言 | 第15-37页 |
1 放线菌和放线菌资源 | 第15-16页 |
·放线菌概述 | 第15页 |
·放线菌物种多样性 | 第15页 |
·放线菌代谢产物多样性 | 第15-16页 |
·放线菌资源的研究现状 | 第16页 |
2 极端环境中的放线菌研究进展 | 第16-34页 |
·极端环境放线菌新种的分离鉴定 | 第16-23页 |
·嗜酸放线菌 | 第16-17页 |
·嗜碱放线菌 | 第17-18页 |
·嗜盐放线菌 | 第18-19页 |
·嗜热放线菌 | 第19-20页 |
·嗜冷放线菌 | 第20-21页 |
·沙漠放线菌 | 第21-22页 |
·内生放线菌 | 第22-23页 |
·极端环境放线菌次级代谢产物多样性 | 第23-26页 |
·特殊环境(红树林)放线菌 | 第26-34页 |
3 活性菌株筛选 | 第34页 |
4 天然产物产量的提高 | 第34-35页 |
5 本研究的目的与意义 | 第35页 |
6 研究技术路线 | 第35-37页 |
第二章 红树林土壤放线菌的分离与新种鉴定 | 第37-84页 |
1 材料与方法 | 第37-60页 |
·实验材料 | 第37-43页 |
·红树林土壤样品 | 第37-38页 |
·培养基 | 第38-40页 |
·实验试剂 | 第40-41页 |
·实验仪器设备 | 第41-42页 |
·PCR引物 | 第42-43页 |
·分析软件 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-47页 |
·样品预处理 | 第43-44页 |
·放线菌的分离 | 第44页 |
·菌株去重、初步鉴定与保藏 | 第44页 |
·菌株的 16S rRNA基因序列分析 | 第44-47页 |
·基因组DNA的提取 | 第44页 |
·16S rRNA基因序列的扩增 | 第44页 |
·PCR产物的检测与及回收纯化 | 第44-45页 |
·连接反应 | 第45-46页 |
·连接产物的转化 | 第46-47页 |
·16S rRNA基因序列分析 | 第47页 |
·新种鉴定(多相分类) | 第47-60页 |
·形态特征和培养特征 | 第47-48页 |
·形态特征 | 第47页 |
·培养特征 | 第47-48页 |
·生理生化实验 | 第48-50页 |
·碳源利用实验 | 第48页 |
·氮源利用实验 | 第48页 |
·硝酸盐还原实验 | 第48-49页 |
·淀粉水解实验 | 第49页 |
·明胶液化实验 | 第49页 |
·七叶苷水解实验 | 第49页 |
·CMC(羧甲基纤维素)降解实验 | 第49页 |
·温度耐受实验 | 第49-50页 |
·pH耐受实验 | 第50页 |
·耐盐度测定 | 第50页 |
·触酶(H2O2酶)实验 | 第50页 |
·黑色素产生实验 | 第50页 |
·硫化氢产生实验 | 第50页 |
·牛奶凝固与胨化实验 | 第50页 |
·化学实验 | 第50-56页 |
·醌组份分析 | 第50-51页 |
·磷酸类脂分析 | 第51-53页 |
·全细胞糖分析 | 第53-54页 |
·细胞壁氨基酸分析 | 第54-55页 |
·全细胞脂肪酸组分检测 | 第55-56页 |
·分子实验 | 第56-60页 |
·基因组DNA的提取 | 第56-57页 |
·(G+C)mol%的测定 | 第57页 |
·基因组DNA-DNA杂交 | 第57-60页 |
2 结果与分析 | 第60-83页 |
·菌株分离结果 | 第60-62页 |
·第一批次土壤样品分离结果 | 第60-61页 |
·第二批次土壤样品分离结果 | 第61-62页 |
·链霉菌HV38的多相分类鉴定 | 第62-83页 |
·模式菌株的选择 | 第62-63页 |
·形态和培养特征 | 第63-65页 |
·生理生化实验 | 第65-73页 |
·氮源利用实验 | 第65-66页 |
·碳源利用实验 | 第66-67页 |
·硝酸盐还原实验 | 第67页 |
·淀粉水解实验 | 第67-68页 |
·明胶液化实验 | 第68-69页 |
·七叶苷水解实验 | 第69页 |
·CMC(羧甲基纤维素)降解实验 | 第69-70页 |
·温度、pH和盐度耐受实验 | 第70-71页 |
·黑色素产生实验 | 第71页 |
·硫化氢产生实验 | 第71-72页 |
·牛奶凝固与胨化实验 | 第72-73页 |
·触酶(H2O2酶)实验 | 第73页 |
·化学实验 | 第73-77页 |
·醌组分分析 | 第73-74页 |
·磷酸类脂分析 | 第74-75页 |
·全细胞糖和氨基酸分析 | 第75-76页 |
·全细胞脂肪酸组份检测 | 第76-77页 |
·分子实验 | 第77-79页 |
·(G+C)mol%的测定 | 第77页 |
·DNA-DNA杂交实验 | 第77-79页 |
·菌株HV38的多相分类鉴定结果 | 第79-80页 |
·链霉菌HV38的描述 | 第80-83页 |
3 结论 | 第83-84页 |
第三章 放线菌的抗菌活性研究与候选菌株的筛选 | 第84-103页 |
1 材料 | 第84-85页 |
·放线菌样品 | 第84页 |
·培养基 | 第84-85页 |
·靶标菌株 | 第85页 |
2 方法 | 第85-86页 |
·菌株发酵液抑菌活性检测 | 第85-86页 |
·发酵培养 | 第85页 |
·靶标菌的培养 | 第85页 |
·抗菌活性检测 | 第85-86页 |
·抗菌活性结果评价 | 第86页 |
·活性菌株代谢产物检测 | 第86页 |
·发酵液的预处理 | 第86页 |
·HPLC检测(初筛) | 第86页 |
·发酵培养基优化 | 第86页 |
3 结果与分析 | 第86-101页 |
·菌株发酵液抑菌活性筛选结果 | 第86-87页 |
·活性菌株代谢产物检测 | 第87-101页 |
·初筛结果 | 第87-91页 |
·复筛结果 | 第91-92页 |
·优化实验结果 | 第92-101页 |
·培养基优化实验 | 第92-100页 |
·盐度优化实验 | 第100-101页 |
·pH优化实验 | 第101页 |
4 结论 | 第101-103页 |
第四章 菌株RCY534代谢产物的分离与鉴定 | 第103-122页 |
1 材料、仪器与试剂 | 第103-104页 |
·材料 | 第103页 |
·仪器 | 第103页 |
·试剂 | 第103-104页 |
2 方法 | 第104-107页 |
·大量发酵 | 第104页 |
·发酵条件 | 第104页 |
·发酵液的处理 | 第104页 |
·液相条件 | 第104页 |
·主体化合物的分离 | 第104-106页 |
·发酵液处理 | 第104-105页 |
·主体化合物的制备 | 第105-106页 |
·MS检测分析 | 第106页 |
·数据库检索 | 第106页 |
·其它化合物的分离(非主体) | 第106-107页 |
·TLC检测 | 第106页 |
·硅胶柱粗分 | 第106页 |
·化合物的制备 | 第106-107页 |
3 结果与分析 | 第107-121页 |
·主体化合物的分离 | 第108-116页 |
·HPLC检测 | 第108-109页 |
·MS分析 | 第109-110页 |
·数据库检索 | 第110页 |
·主体化合物结构解析 | 第110-116页 |
·化合物RCY-1 的结构鉴定 | 第111-113页 |
·化合物RCY-2 的结构鉴定 | 第113-115页 |
·化合物RCY-3 的结构鉴定 | 第115-116页 |
·其它化合物的分离(非主体) | 第116-121页 |
·TLC检测 | 第116-117页 |
·硅胶粗分 | 第117页 |
·化合物的制备 | 第117-120页 |
·Fra.2 的制备 | 第117-118页 |
·Fra.3 的制备 | 第118页 |
·Fra.4 的制备 | 第118-119页 |
·Fra.5-6 的制备 | 第119页 |
·Fra.7-8 的制备 | 第119-120页 |
·剩余组份的制备 | 第120页 |
·结构解析 | 第120-121页 |
4 结论 | 第121-122页 |
第五章 讨论 | 第122-125页 |
1 分离样品的选择 | 第122页 |
2 红树林土壤放线菌的分离 | 第122-123页 |
3 新种鉴定 | 第123页 |
4 活性菌株筛选 | 第123-124页 |
5 化合物分离 | 第124-125页 |
参考文献 | 第125-134页 |
附录 | 第134-152页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第152-153页 |
致谢 | 第153页 |