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红树林土壤放线菌新种的发现及活性代谢产物研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
本文所用到的缩略词第8-15页
第一章 前言第15-37页
 1 放线菌和放线菌资源第15-16页
   ·放线菌概述第15页
   ·放线菌物种多样性第15页
   ·放线菌代谢产物多样性第15-16页
   ·放线菌资源的研究现状第16页
 2 极端环境中的放线菌研究进展第16-34页
   ·极端环境放线菌新种的分离鉴定第16-23页
     ·嗜酸放线菌第16-17页
     ·嗜碱放线菌第17-18页
     ·嗜盐放线菌第18-19页
     ·嗜热放线菌第19-20页
     ·嗜冷放线菌第20-21页
     ·沙漠放线菌第21-22页
     ·内生放线菌第22-23页
   ·极端环境放线菌次级代谢产物多样性第23-26页
   ·特殊环境(红树林)放线菌第26-34页
 3 活性菌株筛选第34页
 4 天然产物产量的提高第34-35页
 5 本研究的目的与意义第35页
 6 研究技术路线第35-37页
第二章 红树林土壤放线菌的分离与新种鉴定第37-84页
 1 材料与方法第37-60页
   ·实验材料第37-43页
     ·红树林土壤样品第37-38页
     ·培养基第38-40页
     ·实验试剂第40-41页
     ·实验仪器设备第41-42页
     ·PCR引物第42-43页
     ·分析软件第43页
   ·实验方法第43-47页
     ·样品预处理第43-44页
     ·放线菌的分离第44页
     ·菌株去重、初步鉴定与保藏第44页
     ·菌株的 16S rRNA基因序列分析第44-47页
       ·基因组DNA的提取第44页
       ·16S rRNA基因序列的扩增第44页
       ·PCR产物的检测与及回收纯化第44-45页
       ·连接反应第45-46页
       ·连接产物的转化第46-47页
       ·16S rRNA基因序列分析第47页
   ·新种鉴定(多相分类)第47-60页
     ·形态特征和培养特征第47-48页
       ·形态特征第47页
       ·培养特征第47-48页
     ·生理生化实验第48-50页
       ·碳源利用实验第48页
       ·氮源利用实验第48页
       ·硝酸盐还原实验第48-49页
       ·淀粉水解实验第49页
       ·明胶液化实验第49页
       ·七叶苷水解实验第49页
       ·CMC(羧甲基纤维素)降解实验第49页
       ·温度耐受实验第49-50页
       ·pH耐受实验第50页
       ·耐盐度测定第50页
       ·触酶(H2O2酶)实验第50页
       ·黑色素产生实验第50页
       ·硫化氢产生实验第50页
       ·牛奶凝固与胨化实验第50页
     ·化学实验第50-56页
       ·醌组份分析第50-51页
       ·磷酸类脂分析第51-53页
       ·全细胞糖分析第53-54页
       ·细胞壁氨基酸分析第54-55页
       ·全细胞脂肪酸组分检测第55-56页
     ·分子实验第56-60页
       ·基因组DNA的提取第56-57页
       ·(G+C)mol%的测定第57页
       ·基因组DNA-DNA杂交第57-60页
 2 结果与分析第60-83页
   ·菌株分离结果第60-62页
     ·第一批次土壤样品分离结果第60-61页
     ·第二批次土壤样品分离结果第61-62页
   ·链霉菌HV38的多相分类鉴定第62-83页
     ·模式菌株的选择第62-63页
     ·形态和培养特征第63-65页
     ·生理生化实验第65-73页
       ·氮源利用实验第65-66页
       ·碳源利用实验第66-67页
       ·硝酸盐还原实验第67页
       ·淀粉水解实验第67-68页
       ·明胶液化实验第68-69页
       ·七叶苷水解实验第69页
       ·CMC(羧甲基纤维素)降解实验第69-70页
       ·温度、pH和盐度耐受实验第70-71页
       ·黑色素产生实验第71页
       ·硫化氢产生实验第71-72页
       ·牛奶凝固与胨化实验第72-73页
       ·触酶(H2O2酶)实验第73页
     ·化学实验第73-77页
       ·醌组分分析第73-74页
       ·磷酸类脂分析第74-75页
       ·全细胞糖和氨基酸分析第75-76页
       ·全细胞脂肪酸组份检测第76-77页
     ·分子实验第77-79页
       ·(G+C)mol%的测定第77页
       ·DNA-DNA杂交实验第77-79页
     ·菌株HV38的多相分类鉴定结果第79-80页
     ·链霉菌HV38的描述第80-83页
 3 结论第83-84页
第三章 放线菌的抗菌活性研究与候选菌株的筛选第84-103页
 1 材料第84-85页
   ·放线菌样品第84页
   ·培养基第84-85页
   ·靶标菌株第85页
 2 方法第85-86页
   ·菌株发酵液抑菌活性检测第85-86页
     ·发酵培养第85页
     ·靶标菌的培养第85页
     ·抗菌活性检测第85-86页
     ·抗菌活性结果评价第86页
   ·活性菌株代谢产物检测第86页
     ·发酵液的预处理第86页
     ·HPLC检测(初筛)第86页
   ·发酵培养基优化第86页
 3 结果与分析第86-101页
   ·菌株发酵液抑菌活性筛选结果第86-87页
   ·活性菌株代谢产物检测第87-101页
     ·初筛结果第87-91页
     ·复筛结果第91-92页
     ·优化实验结果第92-101页
       ·培养基优化实验第92-100页
       ·盐度优化实验第100-101页
       ·pH优化实验第101页
 4 结论第101-103页
第四章 菌株RCY534代谢产物的分离与鉴定第103-122页
 1 材料、仪器与试剂第103-104页
   ·材料第103页
   ·仪器第103页
   ·试剂第103-104页
 2 方法第104-107页
   ·大量发酵第104页
     ·发酵条件第104页
     ·发酵液的处理第104页
     ·液相条件第104页
   ·主体化合物的分离第104-106页
     ·发酵液处理第104-105页
     ·主体化合物的制备第105-106页
     ·MS检测分析第106页
     ·数据库检索第106页
   ·其它化合物的分离(非主体)第106-107页
     ·TLC检测第106页
     ·硅胶柱粗分第106页
     ·化合物的制备第106-107页
 3 结果与分析第107-121页
   ·主体化合物的分离第108-116页
     ·HPLC检测第108-109页
     ·MS分析第109-110页
     ·数据库检索第110页
     ·主体化合物结构解析第110-116页
       ·化合物RCY-1 的结构鉴定第111-113页
       ·化合物RCY-2 的结构鉴定第113-115页
       ·化合物RCY-3 的结构鉴定第115-116页
   ·其它化合物的分离(非主体)第116-121页
     ·TLC检测第116-117页
     ·硅胶粗分第117页
     ·化合物的制备第117-120页
       ·Fra.2 的制备第117-118页
       ·Fra.3 的制备第118页
       ·Fra.4 的制备第118-119页
       ·Fra.5-6 的制备第119页
       ·Fra.7-8 的制备第119-120页
       ·剩余组份的制备第120页
     ·结构解析第120-121页
 4 结论第121-122页
第五章 讨论第122-125页
 1 分离样品的选择第122页
 2 红树林土壤放线菌的分离第122-123页
 3 新种鉴定第123页
 4 活性菌株筛选第123-124页
 5 化合物分离第124-125页
参考文献第125-134页
附录第134-152页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第152-153页
致谢第153页

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