| 缩略语表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Summary | 第8-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-19页 |
| ·乙烯与马铃薯的休眠 | 第10-11页 |
| ·乙烯的生理功能 | 第10页 |
| ·乙烯的生物合成途径 | 第10页 |
| ·马铃薯的休眠 | 第10-11页 |
| ·乙烯与马铃薯的休眠 | 第11页 |
| ·RNAi 技术的研究 | 第11-14页 |
| ·RNAi 的发现 | 第11-12页 |
| ·RNAi 作用机制 | 第12-13页 |
| ·RNAi 的应用 | 第13-14页 |
| ·农杆菌介导的马铃薯遗传转化 | 第14-17页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化机理及过程 | 第14-15页 |
| ·农杆菌介导的马铃薯遗传转化影响因素 | 第15-17页 |
| ·研究的目的意义与技术路线 | 第17-19页 |
| ·研究目的意义 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 马铃薯 ACO 和 ACS 基因克隆及生物信息学分析 | 第19-38页 |
| ·前言 | 第19-20页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·酶与试剂 | 第20页 |
| ·溶液配方及常用抗生素与激素的配制 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·仪器与设备 | 第22页 |
| ·生物信息学分析数据及软件 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-29页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 基因的克隆 | 第22-29页 |
| ·马铃薯叶片总 RNA 的提取 | 第22-24页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第24页 |
| ·引物设计及基因克隆 | 第24-29页 |
| ·生物信息学分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-37页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 基因的克隆 | 第29-31页 |
| ·马铃薯叶片总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第29页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 全长基因及相应 RNAi 目标区段的克隆 | 第29-31页 |
| ·生物信息学分析 | 第31-37页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 基因序列分析 | 第31页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 蛋白序列分析 | 第31-32页 |
| ·不同植物 ACO 和 ACS 蛋白质序列比对 | 第32-33页 |
| ·同其他物种的进化关系聚类分析 | 第33-35页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 其他二级结构亲水性和疏水性预测分析 | 第35-36页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 蛋白质三级结构预测 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 过表达载体与 RNAi 载体构建 | 第38-49页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·试验材料 | 第38-40页 |
| ·菌株和质粒 | 第38-39页 |
| ·酶与试剂 | 第39页 |
| ·溶液配方及常用抗生素与激素的配制 | 第39页 |
| ·农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
| ·仪器与设备 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 正义表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·pMD18-T-ACO 质粒提取 | 第40页 |
| ·pMD18-T-ACO 双酶切及酶切产物回收 | 第40-41页 |
| ·pBI121 载体双酶切及酶切产物回收 | 第41页 |
| ·目的基因和表达载体的连接 | 第41-42页 |
| ·转化感受态大肠杆菌 | 第42页 |
| ·蓝白斑筛选及 PCR 检测 | 第42页 |
| ·提取质粒并酶切检测 | 第42页 |
| ·RNAi 载体构建 | 第42-44页 |
| ·入门载体的构建 | 第42-43页 |
| ·RNAi 表达载体的构建 | 第43页 |
| ·转化感受态大肠杆菌 | 第43页 |
| ·蓝白斑筛选及 PCR 检测 | 第43-44页 |
| ·提取质粒并酶切检测 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·马铃薯 ACO 和 ACS 正义表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·pMD18-T-ACO 及 pBI121 载体双酶切 | 第44-45页 |
| ·pBI121-ACO 和 pBI121-ACS 载体双酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·pHellsgate8-ACO 及 pHellsgate8-ACS 酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 马铃薯遗传转化 | 第49-57页 |
| ·试验材料 | 第49-51页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·酶与试剂 | 第49页 |
| ·溶液配方及常用抗生素与激素的配制 | 第49-51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| ·马铃薯材料的获得 | 第51页 |
| ·马铃薯试管苗的繁殖 | 第51页 |
| ·马铃薯试管薯的诱导 | 第51页 |
| ·农杆菌介导的马铃薯试管薯遗传转化 | 第51-52页 |
| ·农杆菌的转化 | 第51-52页 |
| ·农杆菌工程菌的制备 | 第52页 |
| ·外植体浸染与植株再生 | 第52页 |
| ·转基因植株抗性筛选及 PCR 检测 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-55页 |
| ·转基因植株的诱导 | 第53-54页 |
| ·生根筛选 | 第54页 |
| ·转基因植株的检测 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 导师简介 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
