摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-13页 |
·无机焦磷酸酶 | 第7-8页 |
·无机焦磷酸的代谢与转运 | 第8-10页 |
·无机焦磷酸酶的产生与利用 | 第8-9页 |
·无机焦磷酸的转运 | 第9页 |
·血吸虫与宿主无机焦磷酸的代谢与转运比较 | 第9-10页 |
·日本血吸虫无机焦磷酸酶生物信息学分析 | 第10-11页 |
·理化性质预测 | 第10页 |
·序列分析 | 第10-11页 |
·研究目的与意义 | 第11-12页 |
·研究技术路线 | 第12-13页 |
第二章 日本血吸虫无机焦磷酸酶基因克隆、蛋白表达与纯化 | 第13-25页 |
·基因克隆 | 第13-19页 |
·仪器、试剂和材料 | 第13-14页 |
·目的基因和载体准备 | 第14-16页 |
·In-Fusion 克隆 | 第16-17页 |
·结果与讨论 | 第17-19页 |
·蛋白表达 | 第19-21页 |
·仪器、试剂和材料 | 第19页 |
·小量表达 | 第19-20页 |
·大量表达 | 第20页 |
·结果与讨论 | 第20-21页 |
·蛋白纯化 | 第21-24页 |
·仪器、试剂和材料 | 第22页 |
·Ni 柱纯化 | 第22-23页 |
·DEAE 柱纯化 | 第23页 |
·结果与讨论 | 第23-24页 |
·本章小结 | 第24-25页 |
第三章 日本血吸虫无机焦磷酸酶性质测定 | 第25-39页 |
·酶学活性 | 第25-29页 |
·仪器、试剂和材料 | 第25页 |
·酶学活性测定 | 第25-27页 |
·结果与讨论 | 第27-29页 |
·电泳检测日本血吸虫无机焦磷酸酶的部分性质 | 第29-34页 |
·SjPPase 分子在溶液状态下的聚集状态 | 第30-32页 |
·SjPPase 分子与一些小分子的相互作用 | 第32-33页 |
·结果与讨论 | 第33-34页 |
·免疫学性质 | 第34-38页 |
·仪器、试剂和材料 | 第34页 |
·诊断抗原 ELISA 鉴定 | 第34-35页 |
·结果与讨论 | 第35-38页 |
·本章小结 | 第38-39页 |
第四章 日本血吸虫无机焦磷酸酶晶体生长与结构测定 | 第39-50页 |
·蛋白晶体生长 | 第39-42页 |
·条件筛选 | 第39-40页 |
·条件优化 | 第40-42页 |
·X-ray 衍射与结构解析 | 第42页 |
·X-ray 衍射 | 第42页 |
·结构解析 | 第42页 |
·结果与讨论 | 第42-48页 |
·活性位点分析 | 第44-47页 |
·二聚体作用面分析 | 第47-48页 |
·本章小结 | 第48-50页 |
第五章 基本结论 | 第50-51页 |
附录Ⅰ 英文缩写对照表 | 第51-52页 |
附录Ⅱ 各种溶液配制配方 | 第52-53页 |
附录Ⅲ 硕士期间发表论文情况 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
致谢 | 第57页 |