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三色堇花色素合成结构基因的克隆与表达差异分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 文献综述第11-23页
   ·花色素苷代谢调控机理第11-19页
     ·花色素苷的结构及其生物合成途径第11-13页
       ·花色素苷的结构第11页
       ·花色素苷的生物合成途径第11-13页
     ·花色素苷生物合成结构基因的研究第13-16页
       ·查尔酮合成酶第13页
       ·查尔酮异构酶第13-14页
       ·黄烷酮-3-羟基化酶第14页
       ·类黄酮-3'-羟化酶和类黄酮-3',5'-羟化酶第14-15页
       ·二氢黄酮醇-4-还原酶第15-16页
       ·花色素合成酶第16页
     ·关键结构基因的表达调控第16-17页
       ·结构基因的时间表达调控第16-17页
       ·结构基因的空间表达调控第17页
     ·影响花色素苷呈色的其它因素第17-19页
       ·细胞液泡pH值第17-18页
       ·辅助色素第18页
       ·金属离子螯合第18页
       ·细胞形状第18-19页
   ·植物花瓣彩斑的研究第19-20页
     ·植物花瓣彩斑的概念与分类第19页
     ·植物花瓣彩斑的产生原因第19-20页
   ·三色堇花色及色斑研究进展第20-21页
   ·研究目的及意义第21-22页
   ·研究的技术路线第22-23页
2. 材料与方法第23-34页
   ·实验材料第23-25页
     ·植物材料第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·主要试剂第24页
     ·培养基第24-25页
     ·供试菌种及载体第25页
     ·实验方法第25-34页
     ·三色堇花瓣解剖结构观察第25页
     ·高效液相—质谱法测定三色堇花色素组成第25页
       ·三色堇花色素的提取与纯化第25页
       ·三色堇花色素的定性第25页
     ·紫外可见分光光度法测定三色堇花色素的含量第25-26页
     ·三色堇花瓣总RNA的提取第26页
     ·三色堇花色素合成途径关键结构基因的分离第26-34页
       ·引物设计第26-28页
       ·cDNA第一链的合成第28页
       ·cDNA3'端片段的合成第28-29页
       ·cDNA5'端片段的合成第29-30页
       ·三色堇花色素合成结构基因片段的RT-PCR扩增第30页
       ·三色堇花色素合成结构基因cDNA全长的克隆第30-32页
       ·PCR产物目的片段回收第32页
       ·PCR产物目的片段克隆第32-33页
       ·PCR产物目的片段的序列测序第33页
       ·三色堇花色素合成结构基因的生物信息学分析第33-34页
       ·三色堇花色素合成结构基因的表达分析第34页
3. 结果与分析第34-61页
   ·三色堇花瓣组织结构与花色素分布第34-35页
   ·三色堇花瓣花色素成分分析第35-37页
   ·三色堇不同花发育阶段花色素的含量第37-38页
   ·三色堇花瓣总RNA的提取第38页
   ·三色堇花色素结构基因片段或cDNA全长的扩增第38-41页
   ·三色堇花色素合成结构基因的生物信息学分析第41-59页
     ·三色堇CHS基因的序列分析第41-45页
       ·CHS基因核苷酸序列的分析第41-42页
       ·CHS基因氨基酸序列的分析第42-44页
       ·CHS蛋白质基本特征分析第44页
       ·CHS蛋白的二级结构预测第44-45页
     ·三色堇CHI基因的序列分析第45-47页
       ·CHI基因核苷酸序列分析第45-46页
       ·CHI基因氨基酸序列分析第46-47页
       ·CHI蛋白质基本特征分析第47页
       ·CHI蛋白的二级结构预测第47页
     ·三色堇F3H基因的序列分析第47-50页
       ·F3H基因核苷酸序列的分析第47-48页
       ·F3H基因氨基酸序列的同源性分析第48-50页
       ·F3H蛋白质基本特征分析第50页
       ·F3H蛋白的二级结构预测第50页
     ·三色堇F3'H基因的序列分析第50-53页
       ·F3'H基因核苷酸序列分析第50-51页
       ·F3'H基因氨基酸序列分析第51-53页
     ·三色堇DFR基因的序列分析第53-56页
       ·DFR基因的核苷酸序列分析第53-54页
       ·DFR基因的氨基酸序列分析第54-55页
       ·DFR蛋白质基本特征分析第55-56页
       ·DFR蛋白的二级结构预测第56页
     ·三色堇ANS基因的序列分析第56-58页
       ·ANS基因核苷酸序列的分析第56-57页
       ·ANS基因氨基酸序列分析第57-58页
     ·三色堇花色素合成结构基因氨基酸序列的系统进化分析第58-59页
   ·三色堇不同花发育阶段花色素合成结构基因的表达分析第59-61页
4. 讨论第61-66页
   ·花瓣组织结构和花色素分布与花色形成的关系第61页
   ·花色素组分与三色堇花色形成的关系第61-62页
   ·三色堇花瓣RNA提取过程应注意的问题第62-63页
   ·三色堇花色素合成结构基因的克隆第63页
   ·花发育过程中花色素合成结构基因表达特性分析第63-65页
   ·三色堇花斑形成的分子机理推测第65-66页
5. 结论第66-67页
6. 展望第67-69页
参考文献第69-76页
附录第76-78页
致谢第78页

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