| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 一、前言 | 第13-23页 |
| ·马铃薯概述 | 第13页 |
| ·马铃薯淀粉和颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS Ⅰ) | 第13-16页 |
| ·淀粉的合成与分解 | 第13-14页 |
| ·淀粉的糊化与老化 | 第14-16页 |
| ·颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS Ⅰ ) | 第16页 |
| ·马铃薯低温糖化 | 第16-19页 |
| ·马铃薯低温糖化与酸性液泡转化酶(VINV) | 第17页 |
| ·低温糖化与支链淀粉含量 | 第17-19页 |
| ·RNA干扰技术和Gateway反应 | 第19-22页 |
| ·RNA干扰机制 | 第19-20页 |
| ·Gateway反应 | 第20-21页 |
| ·影响植物RNAi效率的因素 | 第21-22页 |
| ·研究意义 | 第22-23页 |
| 二、材料和方法 | 第23-37页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·供试植物 | 第23页 |
| ·试验用质粒 | 第23页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·工具酶和试剂 | 第23页 |
| ·试验用仪器 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-37页 |
| ·克隆目的片段 | 第24-26页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第26页 |
| ·三亲融合法 | 第26-27页 |
| ·获得转基因马铃薯薯块 | 第27-31页 |
| ·转基因马铃薯基因表达量测定 | 第31-32页 |
| ·薯块中直链淀粉检测 | 第32-33页 |
| ·薯块中还原糖检测 | 第33-34页 |
| ·薯块中总淀粉含量测定 | 第34-36页 |
| ·统计分析方法 | 第36-37页 |
| 三、结果与讨论 | 第37-51页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第37-39页 |
| ·载体示意图 | 第37-38页 |
| ·克隆载体的酶切分析 | 第38-39页 |
| ·转基因马铃薯的筛选和田间栽培 | 第39-40页 |
| ·转化株的获得 | 第39页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第39-40页 |
| ·转基因马铃薯薯块淀粉与还原糖测定结果 | 第40-48页 |
| ·转基因株系表达量测定 | 第40-43页 |
| ·淀粉颗粒碘染色 | 第43页 |
| ·直链淀粉含量分析 | 第43-44页 |
| ·薯片颜色分析 | 第44-45页 |
| ·还原糖含量分析 | 第45-47页 |
| ·总淀粉含量变化 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·卡那霉素对阳性株筛选的影响 | 第48页 |
| ·转基因植株的表型 | 第48页 |
| ·选取不同组织对表达量测定的影响 | 第48-49页 |
| ·载体结构对沉默效率的影响 | 第49页 |
| ·薯片口感的评价 | 第49-50页 |
| ·转基因株系的转录水平与直链淀粉含量的联系 | 第50页 |
| ·转基因株系的转录水平与薯片颜色的联系 | 第50页 |
| ·改良代谢途径的思考 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-72页 |
| 附录1 引物序列 | 第57-58页 |
| 附录2 培养基配置方法 | 第58-60页 |
| 附录3 反应体系 | 第60-64页 |
| 附录4 酶切电泳图 | 第64-65页 |
| 附录5 淀粉颗粒碘染色 | 第65-68页 |
| 附录6 薯块炸片颜色 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72页 |