| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 犬瘟热和甲病毒及其载体的研究进展 | 第13-29页 |
| ·犬瘟热研究进展 | 第13-20页 |
| ·病毒特征 | 第13-14页 |
| ·犬瘟热病毒F蛋白 | 第14-15页 |
| ·犬瘟热发病机理 | 第15-16页 |
| ·宿主细胞对CDV的耐受性 | 第16-17页 |
| ·犬瘟热病毒的嗜淋巴细胞特性 | 第17-18页 |
| ·犬瘟热的免疫抑制机制 | 第18-19页 |
| ·CDV感染的保护性免疫应答 | 第19-20页 |
| ·甲病毒及其载体研究进展 | 第20-29页 |
| ·甲病毒的生命周期 | 第21-23页 |
| ·甲病毒表达载体 | 第23-25页 |
| ·甲病毒载体的包装 | 第25-27页 |
| ·DNA/RNA分层甲病毒系统 | 第27-29页 |
| 第二章 基于甲病毒复制子的犬瘟热核酸疫苗的构建及表达特性研究 | 第29-51页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·实验材料 | 第29-32页 |
| ·病毒、细胞和载体 | 第29页 |
| ·试剂及耗材 | 第29-30页 |
| ·实验试剂及配置方法 | 第30-32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-41页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·Trizol法提取病毒总RNA | 第33页 |
| ·逆转录PCR扩增GDV F基因 | 第33-34页 |
| ·克隆质粒pEASY-Blunt-F的构建及鉴定 | 第34页 |
| ·融合PCR扩增VP22-F基因 | 第34-35页 |
| ·克降质粒DEASY-Blunt-VP22-F的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·克降质粒与dSCAI载体的单酶切 | 第36页 |
| ·连接 | 第36-37页 |
| ·转化 | 第37页 |
| ·菌落PCR验定 | 第37页 |
| ·重组质粒的单酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒转染BHK-21细朐 | 第38-39页 |
| ·目的基因mRNA水平的检测 | 第39-40页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第40页 |
| ·蛋白免疫印迹（Westenrblotting) | 第40-41页 |
| ·细朐凋亡试验 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-46页 |
| ·RT-PCR获得CDVF基因片段 | 第41页 |
| ·重组质粒DEASY-Blunt-F的鉴定 | 第41页 |
| ·融合PCR获得VP22-F片段 | 第41-42页 |
| ·重组质粒DEASY-Blunt-VP22-F的鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组质粒dSCAI-F的鉴定 | 第43页 |
| ·重组质粒DSCA1-VP22-F的鉴定 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR检测 | 第44页 |
| ·间接免疫荧光试验OFA | 第44页 |
| ·免疫印迹试验 | 第44-45页 |
| ·细朐凋亡试验 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-51页 |
| ·犬瘟热病毒F蛋白在疫苗上的应用 | 第46页 |
| ·甲病毒载体核酸疫苗 | 第46-47页 |
| ·VP22蛋白的蛋白转导功能 | 第47-48页 |
| ·细胞凋亡机制在核酸疫苗中的应用 | 第48-49页 |
| ·提高核酸疫苗免疫效率的策略 | 第49-51页 |
| 第三章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第62页 |
