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核基质蛋白SATB1调控乳腺癌Hedgehog信号通路及对乳腺癌干细胞自我更新的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
中英文对照与缩略词一览表第14-16页
第1章 引言第16-21页
   ·乳腺癌概况第16页
   ·肿瘤干细胞理论与乳腺癌第16-17页
   ·SATB1 与乳腺癌及其干细胞第17页
   ·Hedgehog 信号通路与乳腺癌及其干细胞第17-18页
   ·本课题方法概述第18-20页
   ·统计学分析第20页
   ·本研究的意义第20-21页
第2章 材料与方法第21-39页
   ·实验材料第21-25页
     ·实验细胞株第21页
     ·主要试剂第21-25页
   ·主要仪器第25-26页
   ·实验方法和步骤第26-39页
     ·实验流程图第26-27页
     ·细胞培养第27-28页
     ·慢病毒转染实验第28-29页
     ·慢病毒转染 MCF-7 细胞后 SATB1 表达抑制效果筛选第29-34页
     ·CCK-8 检测 MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1 细胞增殖活力第34-35页
     ·MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1 细胞“微球体”成球率及直径平均值的比较第35页
     ·MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1 干细胞流式鉴定、分选第35-36页
     ·荧光定量 PCR 检测 MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1细胞中 Gli-1、Gli-2 和 Ptch1 的 mRNA 表达水平第36-39页
第3章 结果第39-59页
   ·MCF-7 细胞培养及 MCF-7 癌干细胞无血清悬浮培养第39-40页
   ·乳腺癌 MCF-7 细胞慢病毒转染条件和参数预实验第40-44页
   ·慢病毒转染 MCF-7 细胞后 SATB1 表达抑制效果筛选第44-46页
     ·荧光定量 PCR 检测各转染组 MCF-7 细胞 SATB1 的 mRNA 表达变化第44-45页
     ·Western-blot 检测各转染组 MCF-7 细胞 SATB1 的蛋白表达量变化第45-46页
   ·CCK-8 检测 MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1 细胞增殖活力第46-48页
   ·MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1 细胞“微球体”成球率及直径均值的比较第48-51页
     ·各组间微球体成球率的比较第49页
     ·各组间微球体的直径大小分布比较第49-51页
   ·MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1 干细胞流式鉴定、分选第51-54页
   ·荧光定量 PCR 检测 MCF-7、MCF-7/siControl 和 MCF-7/siSATB1 细胞中Gli-1、Gli-2 和 Ptch1 的 mRNA 表达水平第54-59页
     ·QRT-PCR 检测 3 组细胞 Hedgehog 信号通路 Gli-1mRNA 表达水平第54-55页
     ·QRT-PCR 检测 3 组细胞 Hedgehog 信号通路 Gli-2mRNA 表达水平第55-57页
     ·QRT-PCR 检测 3 组细胞 Hedgehog 信号通路 Ptch1mRNA 表达水平第57-59页
第4章 讨论第59-65页
   ·乳腺癌干细胞与乳腺癌第59-60页
   ·乳腺癌干细胞鉴定和自我更新能力比较第60-62页
   ·SATB1 与乳腺癌及其干细胞第62-63页
   ·Hedgehog 信号通路与乳腺癌及其干细胞第63页
   ·本研究的不足第63-65页
第5章 结论第65-66页
致谢第66-68页
参考文献第68-71页
攻读学位期间的研究成果第71-72页
综述第72-82页
 参考文献第80-82页

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