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葡萄SAMS基因的克隆、原核表达及分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
引言第9-10页
1 文献综述第10-15页
   ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)的结构和催化机制第10-11页
   ·SAMS 家族基因第11页
   ·S-腺苷甲硫氨酸(SAM)与乙烯和多胺合成途径之间的关系第11-12页
   ·SAM 的生物学意义第12-14页
     ·转甲基作用第13页
     ·转氨丙基作用第13页
     ·转硫基作用第13-14页
   ·SAM 的临床应用第14页
     ·对于关节炎方面的研究第14页
     ·对于抑郁症方面的研究第14页
     ·对于肝病方面的研究第14页
   ·本实验研究内容及意义第14-15页
2 葡萄 SAMS 基因的克隆和生物信息学分析第15-29页
   ·实验材料和仪器第15-16页
     ·实验材料、试剂与耗材第15页
     ·溶液的配制第15-16页
     ·主要仪器第16页
   ·实验方法第16-22页
     ·序列的获得第16页
     ·葡萄 SAMS 基因的克隆第16-21页
     ·生物信息学分析第21-22页
   ·结果第22-27页
     ·序列的获得第22页
     ·葡萄 SAMS 基因的克隆第22-23页
     ·葡萄 SAMS 基因的生物信息学分析第23-27页
   ·讨论第27-29页
3 葡萄 SAMS 基因在不同胁迫下的实时定量表达研究第29-33页
   ·材料处理第29页
   ·RNA 的提取、纯化及 cDNA 的合成第29页
   ·引物设计第29页
   ·实时荧光定量 PCR第29-30页
   ·结果第30-31页
     ·葡萄 RNA 电泳检测第30页
     ·实时荧光定量 PCR第30-31页
   ·讨论第31-33页
4 葡萄 SAMS 基因的原核表达第33-40页
   ·实验材料、试剂及溶液的配制第33页
     ·实验材料和试剂第33页
     ·溶液的配制第33页
   ·实验方法第33-37页
     ·目的基因的获得第33-34页
     ·重组表达载体的构建第34-36页
     ·诱导表达第36页
     ·SDS-PAGE 电泳检测第36-37页
   ·结果第37-38页
     ·重组质粒的构建第37页
     ·SDS-PAGE 电泳检测第37-38页
   ·讨论第38-40页
5 结论第40-41页
参考文献第41-44页
附录 A 论文中所用 Marker第44-45页
附录 B pET28a 表达载体图谱第45-46页
附录 C VvSAMS 家族成员 ORF 及保守结构域的预测第46-50页
附录 D VvSAMS 家族成员蛋白的信号肽和跨膜结构域预测第50-54页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第54-55页
致谢第55页

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