摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
引言 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-15页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)的结构和催化机制 | 第10-11页 |
·SAMS 家族基因 | 第11页 |
·S-腺苷甲硫氨酸(SAM)与乙烯和多胺合成途径之间的关系 | 第11-12页 |
·SAM 的生物学意义 | 第12-14页 |
·转甲基作用 | 第13页 |
·转氨丙基作用 | 第13页 |
·转硫基作用 | 第13-14页 |
·SAM 的临床应用 | 第14页 |
·对于关节炎方面的研究 | 第14页 |
·对于抑郁症方面的研究 | 第14页 |
·对于肝病方面的研究 | 第14页 |
·本实验研究内容及意义 | 第14-15页 |
2 葡萄 SAMS 基因的克隆和生物信息学分析 | 第15-29页 |
·实验材料和仪器 | 第15-16页 |
·实验材料、试剂与耗材 | 第15页 |
·溶液的配制 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-22页 |
·序列的获得 | 第16页 |
·葡萄 SAMS 基因的克隆 | 第16-21页 |
·生物信息学分析 | 第21-22页 |
·结果 | 第22-27页 |
·序列的获得 | 第22页 |
·葡萄 SAMS 基因的克隆 | 第22-23页 |
·葡萄 SAMS 基因的生物信息学分析 | 第23-27页 |
·讨论 | 第27-29页 |
3 葡萄 SAMS 基因在不同胁迫下的实时定量表达研究 | 第29-33页 |
·材料处理 | 第29页 |
·RNA 的提取、纯化及 cDNA 的合成 | 第29页 |
·引物设计 | 第29页 |
·实时荧光定量 PCR | 第29-30页 |
·结果 | 第30-31页 |
·葡萄 RNA 电泳检测 | 第30页 |
·实时荧光定量 PCR | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
4 葡萄 SAMS 基因的原核表达 | 第33-40页 |
·实验材料、试剂及溶液的配制 | 第33页 |
·实验材料和试剂 | 第33页 |
·溶液的配制 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-37页 |
·目的基因的获得 | 第33-34页 |
·重组表达载体的构建 | 第34-36页 |
·诱导表达 | 第36页 |
·SDS-PAGE 电泳检测 | 第36-37页 |
·结果 | 第37-38页 |
·重组质粒的构建 | 第37页 |
·SDS-PAGE 电泳检测 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
附录 A 论文中所用 Marker | 第44-45页 |
附录 B pET28a 表达载体图谱 | 第45-46页 |
附录 C VvSAMS 家族成员 ORF 及保守结构域的预测 | 第46-50页 |
附录 D VvSAMS 家族成员蛋白的信号肽和跨膜结构域预测 | 第50-54页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |