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光照条件下SlSGR1对病原菌诱导的番茄叶片衰老的影响及抗病性研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
縮略语表第12-13页
1 前言第13-27页
   ·课题的提出及研究的主要内容第13-14页
   ·STAY-GREEN基因的研究现状第14-15页
   ·滞绿突变体的研究与应用意义第15-18页
   ·Pst DC3000细菌与植物抗病性研究第18-19页
   ·Botrytis cinerea真菌与植物抗病性研究第19-20页
   ·叶片衰老第20-25页
     ·叶片衰老的特征第20-21页
     ·植物内源激素与叶片的衰老第21-22页
     ·病原菌与叶片的衰老第22-23页
     ·ROS与叶片的衰老第23页
     ·非生物逆境与叶片的衰老第23-25页
     ·矿质营养与叶片衰老第25页
   ·植物细胞死亡的调控第25-27页
   ·过敏性反应在植物抵御病害中的作用第27页
2 材料与方法第27-39页
   ·植物材料第27-28页
     ·植物材料的栽培与管理第28页
     ·植物材料的PCR阳性检测第28页
   ·病原菌第28-31页
     ·PstDC3000第28-29页
       ·Pst DC3000的活化与保存第28-29页
       ·Pst DC3000浓度的测定与悬浮液的配制第29页
       ·Pst DC3000的离体叶片接种方法第29页
       ·Pst DC3000的果实接种方法第29页
     ·Botrytis cinerea第29-31页
       ·Botrytis cinerea的活化与保存第29-30页
       ·Botrytis cinerea孢子浓度的测定与悬浮液的配制第30页
       ·Botrytis cinerea的离体叶片接种方法第30页
       ·Botrytis cinerea的果实接种方法第30-31页
   ·离体叶片的病菌接种第31页
     ·光照及黑暗条件下接种Pst DC3000第31页
     ·光照及黑暗条件下接种Botrytis cinerea孢子第31页
   ·过氧化氢的原位检测(DAB染色)第31-32页
   ·死亡细胞的原位检测(台盼蓝染色)第32页
   ·叶绿素含量的测定第32页
   ·ROS清除酶活性测定第32-36页
     ·酶粗提液的制备第32-33页
     ·SOD活性测定第33页
     ·POD活性测定第33-34页
     ·CAT活性测定第34-35页
     ·APX活性测定第35-36页
   ·相关基因的表达分析第36-38页
     ·离体叶片接种Pst DC3000后不同时间点取样第36页
     ·RNA的提取及反转录第36-37页
     ·HSR203J,PAO、ROS及PR相关基因的表达分析第37-38页
   ·乙烯释放量的测定第38-39页
   ·番茄果实的病菌接种第39页
     ·MG、BR番茄果实接种Pst DC3000第39页
     ·MG、BR番茄果实接种Botrytis cinerea孢子第39页
3 结果与分析第39-61页
   ·SlSGR1组织表达分析第39-40页
   ·SlSGR1转基因超量及干涉植株的PCR阳性检测第40-41页
   ·光照及黑暗条件下离体叶片接种Pst DC3000实验第41-54页
     ·接种Pst DC3000 6 d后出现的表型差异第41-42页
     ·接种Pst DC3000后转基因番茄衰老相关的生理生化分析第42-45页
       ·叶绿素含量变化及PAO表达分析第42-44页
       ·乙烯释放量的变化分析第44-45页
     ·接种Pst DC3000后HR反应分析第45-54页
       ·H_2O_2含量及坏死斑点的差异分析第45-48页
       ·HSR203J基因的表达动态第48页
       ·SOD、POD、CAT及APX活性变化分析第48-51页
       ·光照下SOD、CAT、cAPX基因的表达动态第51-52页
       ·接种Pst DC3000后光照可促进HR反应第52-54页
     ·干涉SlSGR1可提高叶片对Pst DC3000的抗性第54页
   ·光照及黑暗条件下离体叶片接种Botrytis cinerea实验第54-58页
     ·接种Botrytis cinerea 10 d后出现的表型差异第54-55页
     ·叶绿素含量变化分析第55-56页
     ·SOD、POD、CAT及APX活性变化分析第56-58页
   ·MG时期番茄果实具有抗Pst DC3000的特性并且抑制表达SlSGR1增强BR番茄对Pst DC3000的抗性第58-60页
   ·MG时期番茄果实具有抗Botrytis cinerea的特性并且抑制表达SlSGR1增强BR番茄对Botrytis cinerea的抗性第60-61页
4 讨论第61-66页
   ·SlSGR1参与调控光照下病原菌诱导的叶片衰老过程第61-62页
   ·H_2O_2参与调控病原菌诱导的叶片衰老及细胞的死亡第62-63页
   ·植物衰老和抗病反应中的PCD及HR鉴定方法探讨第63-66页
参考文献第66-77页
致谢第77-78页
附录第78-81页
 附录一:小量法提取植物DNA第78-79页
 附录二:TriZOL一步法提取植物总RNA第79-80页
 附录三:PDA/PDB培养基的配方第80-81页
 附录四:KB培养基配方第81页

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