摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
縮略语表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-27页 |
·课题的提出及研究的主要内容 | 第13-14页 |
·STAY-GREEN基因的研究现状 | 第14-15页 |
·滞绿突变体的研究与应用意义 | 第15-18页 |
·Pst DC3000细菌与植物抗病性研究 | 第18-19页 |
·Botrytis cinerea真菌与植物抗病性研究 | 第19-20页 |
·叶片衰老 | 第20-25页 |
·叶片衰老的特征 | 第20-21页 |
·植物内源激素与叶片的衰老 | 第21-22页 |
·病原菌与叶片的衰老 | 第22-23页 |
·ROS与叶片的衰老 | 第23页 |
·非生物逆境与叶片的衰老 | 第23-25页 |
·矿质营养与叶片衰老 | 第25页 |
·植物细胞死亡的调控 | 第25-27页 |
·过敏性反应在植物抵御病害中的作用 | 第27页 |
2 材料与方法 | 第27-39页 |
·植物材料 | 第27-28页 |
·植物材料的栽培与管理 | 第28页 |
·植物材料的PCR阳性检测 | 第28页 |
·病原菌 | 第28-31页 |
·PstDC3000 | 第28-29页 |
·Pst DC3000的活化与保存 | 第28-29页 |
·Pst DC3000浓度的测定与悬浮液的配制 | 第29页 |
·Pst DC3000的离体叶片接种方法 | 第29页 |
·Pst DC3000的果实接种方法 | 第29页 |
·Botrytis cinerea | 第29-31页 |
·Botrytis cinerea的活化与保存 | 第29-30页 |
·Botrytis cinerea孢子浓度的测定与悬浮液的配制 | 第30页 |
·Botrytis cinerea的离体叶片接种方法 | 第30页 |
·Botrytis cinerea的果实接种方法 | 第30-31页 |
·离体叶片的病菌接种 | 第31页 |
·光照及黑暗条件下接种Pst DC3000 | 第31页 |
·光照及黑暗条件下接种Botrytis cinerea孢子 | 第31页 |
·过氧化氢的原位检测(DAB染色) | 第31-32页 |
·死亡细胞的原位检测(台盼蓝染色) | 第32页 |
·叶绿素含量的测定 | 第32页 |
·ROS清除酶活性测定 | 第32-36页 |
·酶粗提液的制备 | 第32-33页 |
·SOD活性测定 | 第33页 |
·POD活性测定 | 第33-34页 |
·CAT活性测定 | 第34-35页 |
·APX活性测定 | 第35-36页 |
·相关基因的表达分析 | 第36-38页 |
·离体叶片接种Pst DC3000后不同时间点取样 | 第36页 |
·RNA的提取及反转录 | 第36-37页 |
·HSR203J,PAO、ROS及PR相关基因的表达分析 | 第37-38页 |
·乙烯释放量的测定 | 第38-39页 |
·番茄果实的病菌接种 | 第39页 |
·MG、BR番茄果实接种Pst DC3000 | 第39页 |
·MG、BR番茄果实接种Botrytis cinerea孢子 | 第39页 |
3 结果与分析 | 第39-61页 |
·SlSGR1组织表达分析 | 第39-40页 |
·SlSGR1转基因超量及干涉植株的PCR阳性检测 | 第40-41页 |
·光照及黑暗条件下离体叶片接种Pst DC3000实验 | 第41-54页 |
·接种Pst DC3000 6 d后出现的表型差异 | 第41-42页 |
·接种Pst DC3000后转基因番茄衰老相关的生理生化分析 | 第42-45页 |
·叶绿素含量变化及PAO表达分析 | 第42-44页 |
·乙烯释放量的变化分析 | 第44-45页 |
·接种Pst DC3000后HR反应分析 | 第45-54页 |
·H_2O_2含量及坏死斑点的差异分析 | 第45-48页 |
·HSR203J基因的表达动态 | 第48页 |
·SOD、POD、CAT及APX活性变化分析 | 第48-51页 |
·光照下SOD、CAT、cAPX基因的表达动态 | 第51-52页 |
·接种Pst DC3000后光照可促进HR反应 | 第52-54页 |
·干涉SlSGR1可提高叶片对Pst DC3000的抗性 | 第54页 |
·光照及黑暗条件下离体叶片接种Botrytis cinerea实验 | 第54-58页 |
·接种Botrytis cinerea 10 d后出现的表型差异 | 第54-55页 |
·叶绿素含量变化分析 | 第55-56页 |
·SOD、POD、CAT及APX活性变化分析 | 第56-58页 |
·MG时期番茄果实具有抗Pst DC3000的特性并且抑制表达SlSGR1增强BR番茄对Pst DC3000的抗性 | 第58-60页 |
·MG时期番茄果实具有抗Botrytis cinerea的特性并且抑制表达SlSGR1增强BR番茄对Botrytis cinerea的抗性 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-66页 |
·SlSGR1参与调控光照下病原菌诱导的叶片衰老过程 | 第61-62页 |
·H_2O_2参与调控病原菌诱导的叶片衰老及细胞的死亡 | 第62-63页 |
·植物衰老和抗病反应中的PCD及HR鉴定方法探讨 | 第63-66页 |
参考文献 | 第66-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
附录 | 第78-81页 |
附录一:小量法提取植物DNA | 第78-79页 |
附录二:TriZOL一步法提取植物总RNA | 第79-80页 |
附录三:PDA/PDB培养基的配方 | 第80-81页 |
附录四:KB培养基配方 | 第81页 |