| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 一、前言 | 第9-11页 |
| 二、实验材料和方法 | 第11-20页 |
| （一）细胞株 | 第11页 |
| （二）基础质粒及感受态细 | 第11页 |
| （三）主要试剂 | 第11页 |
| （四）主要仪器 | 第11-12页 |
| （五）主要溶液剂配置方 | 第12-13页 |
| （六）SP-B shRNA的设计和合成 | 第13-14页 |
| 1、SP-B shRNA的设计 | 第13页 |
| 2、 SP-B shRNA引物的合成 | 第13-14页 |
| （七）PGPU6/GFP/Neo-shRNA质粒载体表达载体的构建 | 第14-17页 |
| 1、 shRNA模板的合成 | 第14-15页 |
| 2、 shRNA模板及PGPU6/GFP/Neo载体的酶切 | 第15页 |
| 3、重组质粒的构建 | 第15-17页 |
| （八） PGPU6/GFP/Neo-SP-B shRNA重组质粒的鉴定 | 第17页 |
| （九）SP-B shRNA有效序列的筛选 | 第17页 |
| 1、细胞转染 | 第17页 |
| 2、转染效率的测定 | 第17页 |
| （十）Real-time PCR检测SP-BmRNA表达 | 第17-19页 |
| （十一）统计学处理 | 第19-20页 |
| 三、实验结果 | 第20-25页 |
| （一）重组质粒的鉴定 | 第20-21页 |
| 1、酶切鉴定 | 第20页 |
| 2、测序鉴定 | 第20-21页 |
| （二）观察表达质粒PGPU6/GFP/Neo-SP-B shRNA的转染结果 | 第21-23页 |
| （三） Real-time PCR检测SP-B mRNA表达结果 | 第23-25页 |
| 四、讨论 | 第25-27页 |
| 五、结论 | 第27页 |
| 参考文献 | 第27-28页 |
| 综述 | 第28-36页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 附录 研究生期间投稿的文章 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37页 |
