| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-16页 |
| ·φc31 整合酶的研究进展 | 第11-14页 |
| ·φc31 整合酶的研究背景 | 第11-12页 |
| ·φc31 整合酶的特点 | 第12-14页 |
| ·动物转基因技术 | 第14-15页 |
| ·动物转基因技术发展史 | 第14-15页 |
| ·链霉菌噬菌体φC31 整合酶在转基因动物研制中的探索 | 第15页 |
| ·研究目的、内容及意义 | 第15-16页 |
| 第二章 φc31 整合酶的表达 | 第16-24页 |
| ·材料与方法 | 第16-21页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-21页 |
| ·结果 | 第21-23页 |
| ·整合酶表达载体的构建结果 | 第21-22页 |
| ·φC31 整合酶表达检测 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23-24页 |
| ·φC31 整合酶融合表达载体构建 | 第23页 |
| ·φC31 整合酶蛋白表达 | 第23-24页 |
| 第三章 报告载体和整合酶表达载体的构建 | 第24-37页 |
| ·材料与方法 | 第24-30页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·结果 | 第30-35页 |
| ·报告载体 pEGFP-C1-attB 构建结果 | 第30-32页 |
| ·整合酶表达载体 pCMV-φC31-NLS-int 构建结果 | 第32-34页 |
| ·整合酶表达载体 pCMV-φC31-3NLS-int 构建结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| ·报告载体和整合酶表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 第四章 获得稳定转染的转基因细胞系 | 第37-43页 |
| ·材料与方法 | 第37-39页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·山羊胎儿成纤维细胞电转，细胞筛选和单克隆培养 | 第39-41页 |
| ·基因定点整合检测结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·细胞筛选 | 第42页 |
| ·单克隆定点整合检测 | 第42-43页 |
| 第五章 整合位点的检测与分析 | 第43-52页 |
| ·材料与方法 | 第43-46页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·结果 | 第46-51页 |
| ·染色体步移（TAIL-PCR）结果 | 第46-47页 |
| ·TAIL-PCR 结果与 attB 序列及报告载体比对 | 第47页 |
| ·实验前期测序结果与牛基因组数据库比对 | 第47-49页 |
| ·测序结果与山羊基因组数据库比对 | 第49-50页 |
| ·整合位点统计 | 第50页 |
| ·山羊和牛定点整合频率比对 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·TAIL-PCR 注意事项 | 第51页 |
| ·统计 attp 位点发生频率 | 第51页 |
| ·山羊和牛定点整合频率比对 | 第51-52页 |
| 第六章 讨论与结论 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| ·全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 英文缩略词表 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
