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中性氨基酸转运蛋白SNAT2拓扑结构初探

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-11页
中英文缩略词对照表第11-13页
第一章 综述第13-29页
 1 SLC38 家族(Solute carrier family 38)的钠偶联中性氨基酸转运蛋白第13-18页
   ·SLC38 基因家族的发现第13-14页
   ·SLC38 基因家族的分布及分类第14-15页
     ·SLC38 基因家族的分布第14页
     ·SLC38 基因家族的分类第14-15页
   ·SLC38 基因家族的功能第15-18页
     ·参与大脑中谷氨酸/GABA-谷氨酰胺循环第15-16页
     ·SNAT3 在肝脏氨解毒中的作用第16-17页
     ·SNAT2 在肝脏中对糖异生的作用第17页
     ·SNAT3-介导的谷氨酸转运以及肾脏酸中毒反应第17-18页
 2 SNAT2 的结构功能研究现状第18-22页
   ·SNAT2 的发现第18-19页
   ·SNAT2 的分布第19页
   ·SNAT2 功能研究及调控第19-20页
   ·SNAT2 结构与分子机制研究现状第20-22页
     ·SNAT2 结构研究现状第20-21页
     ·SNAT2 分子机制研究现状第21-22页
 3 膜拓扑结构的研究第22-27页
   ·已知拓扑结构的膜蛋白第22-26页
     ·人类乳腺癌抗性蛋白 BCRP 的膜拓扑结构第22-23页
     ·中性氨基酸转运蛋白 SNAT4 的膜拓扑结构第23-24页
     ·通道样基因 1 编码转运蛋白 TMC1 的膜拓扑结构第24-26页
   ·糖基化位点第26-27页
 4 SNAT2 拓扑结构研究的意义第27-29页
第二章 EGFP-SNAT2 融合蛋白在真核表达载体中的构建和鉴定第29-40页
 0 前言第29-30页
 1 材料和方法第30-35页
   ·材料第30-31页
     ·质粒、菌株和细胞株第30页
     ·主要试剂第30-31页
   ·方法第31-35页
     ·引物的设计与合成第31页
     ·EGFP 基因 PCR 扩增、酶切及连接第31-32页
     ·载体的构建、终止子突变及鉴定第32-33页
     ·转染及激光共聚焦显微镜检测蛋白表达第33页
     ·蛋白提取及 Western Blot第33-35页
 2 结果第35-39页
   ·pBK-CMV⊿-EGFP-SNAT2 质粒载体构建第35-37页
   ·pBK-CMV⊿-EGFP-SNAT2 载体表达鉴定第37-39页
 3 讨论第39-40页
第三章 SNAT2 中糖基化位点的确定第40-48页
 0 前言第40-41页
 1 材料和方法第41-44页
   ·材料第41-42页
     ·质粒、菌株和细胞株第41页
     ·主要试剂第41-42页
   ·方法第42-44页
     ·突变引物的设计和合成第42页
     ·定点突变第42-43页
     ·蛋白提取及 Western Blot第43-44页
 2 结果第44-46页
   ·验证预测的糖基化位点 N258,N272第44-45页
   ·验证新发现的糖基化位点 N254第45-46页
 3 讨论第46-48页
第四章 SNAT2 中 N 端 C 端的膜定位第48-56页
 0 前言第48页
 1 材料和方法第48-51页
   ·材料第48-49页
     ·质粒、菌株和细胞株第48-49页
     ·主要试剂第49页
   ·方法第49-51页
     ·引物的设计与合成第49-50页
     ·HA-SNAT2 基因 PCR 扩增、酶切及连接第50页
     ·载体的构建及鉴定第50页
     ·蛋白提取及 Western Blot第50-51页
     ·细胞免疫荧光第51页
 2 结果第51-54页
   ·HA-SNAT2 融合蛋白在真核表达载体中的构建和鉴定第51-54页
   ·确定 N 端 C 端的定位第54页
 3 讨论第54-56页
参考文献第56-62页
研究小结第62-63页
致谢第63-64页
附录第64页

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