毛果杨内参基因的筛选和验证及其miR164e的克隆、表达和转化
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-13页 |
| ·关于杨树的生物学特征 | 第9页 |
| ·转基因杨树研究情况 | 第9-10页 |
| ·关于内参基因的研究情况 | 第10页 |
| ·miRNA 研究现状 | 第10-11页 |
| ·植物 miR164 家族研究情况 | 第11-12页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| 2 实验材料与方法 | 第13-29页 |
| ·材料采集 | 第13页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第13页 |
| ·试剂 | 第13页 |
| ·仪器 | 第13页 |
| ·所用培养基配方 | 第13-16页 |
| ·方法 | 第16-29页 |
| ·RNA 的提取与纯化 | 第16-17页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第17页 |
| ·看家基因的选择和引物设计 | 第17-18页 |
| ·PCR 反应条件 | 第18页 |
| ·引物扩增效率的计算 | 第18页 |
| ·内参基因引物特异性鉴定 | 第18-19页 |
| ·数据处理与分析 | 第19页 |
| ·5’RACE | 第19-23页 |
| ·3’RACE | 第23-24页 |
| ·miR164e 前体序列的克隆 | 第24页 |
| ·转毛果杨 miR164e 基因 | 第24-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-43页 |
| ·毛果杨内参基因的筛选和验证 | 第29-38页 |
| ·毛果杨 RNA 的分离与纯化 | 第29页 |
| ·扩增效率和扩增特异性分析 | 第29-32页 |
| ·看家基因 CT 值分析 | 第32-33页 |
| ·看家基因稳定性分析 | 第33-35页 |
| ·锌胁迫下看家基因的稳定性分析 | 第35-36页 |
| ·看家基因稳定性的验证 | 第36-38页 |
| ·miR164e 的克隆、表达和转化 | 第38-43页 |
| ·miR164e 前体序列的分析 | 第38-39页 |
| ·miR164e 前体的二级结构分析 | 第39页 |
| ·miR164e 前体的表达 | 第39-40页 |
| ·表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·将构建好的表达载体转化至毛果杨 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| ·毛果杨内参基因的筛选和验证 | 第43-44页 |
| ·miR164e 的克隆、表达和转化 | 第44-47页 |
| 5 结论 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第59页 |
