| 英文缩略词 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第1章 H2-Calponin在四种不同癌组织的表达 | 第16-26页 |
| 1 材料和试剂 | 第16-17页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·主要溶液的配置 | 第17页 |
| ·主要设备 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-20页 |
| ·原位RT-PCR技术检测H2-Calponin mRNA的表达 | 第18页 |
| ·免疫组织化学技术检测H2-Calponin蛋白的表达 | 第18-19页 |
| ·阳性结果判定 | 第19-20页 |
| ·统计学处理 | 第20页 |
| 3 结果 | 第20-23页 |
| ·CNN2 mRNA在四种不同癌组织中的表达分析 | 第20-21页 |
| ·H2-Calponin蛋白在四种不同癌组织中的表达分布 | 第21-23页 |
| 4 讨论 | 第23-25页 |
| 5 本章小结 | 第25-26页 |
| 第2章 稳定表达CNN2肝细胞癌细胞株的建立 | 第26-52页 |
| 1 材料和试剂 | 第26-29页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要溶液配置 | 第27-28页 |
| ·主要设备 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-38页 |
| ·pIRES2-ZsGreen1-CNN2表达载体构建 | 第29-31页 |
| ·细胞培养和G418最佳筛选浓度的确定 | 第31-32页 |
| ·脂质体法基因转染 | 第32-33页 |
| ·荧光倒置显微镜下检测分时段转染效率 | 第33页 |
| ·G418抗性筛选和扩增 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR检测转染细胞中CNN2 mRNA表达 | 第33-36页 |
| ·Western-blot检测转染细胞中CNN2蛋白表达 | 第36-38页 |
| 3 结果 | 第38-48页 |
| ·成功构建pIRES2-ZsGreen1-CNN2表达载体 | 第38-39页 |
| ·G418最低耐受浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·荧光倒置显微镜下检测分时段转染效率 | 第40-41页 |
| ·总RNA提取结果与鉴定 | 第41页 |
| ·qPCR检测转染细胞中CNN2 mRNA的表达 | 第41-46页 |
| ·总蛋白提取及其浓度测定 | 第46-47页 |
| ·Western Blot转染细胞中CNN2蛋白的表达 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第3章 CNN2对肝细胞癌细胞生物学行为的影响 | 第52-63页 |
| 1 材料和试剂 | 第52页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·主要设备 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-55页 |
| ·划痕愈合实验测定细胞迁移能力 | 第52-53页 |
| ·侵袭试验 | 第53-54页 |
| ·CCK-8法检测细胞增殖 | 第54页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-58页 |
| ·划痕实验结果 | 第55-56页 |
| ·细胞侵袭实验结果 | 第56-57页 |
| ·CCK-8法检测细胞增殖实验结果 | 第57页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 5 本章小结 | 第61-63页 |
| 整篇总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 综述 | 第67-78页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 在读期间发表文章 | 第80-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
