目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
实验材料与方法 | 第12-27页 |
一 肿瘤相关纤维母细胞原代培养及胰腺癌肿瘤细胞系培养 | 第12-13页 |
二 免疫组化 | 第13-14页 |
三 Kras突变检测 | 第14-16页 |
四 流式细胞术分选间充质干细胞样CAF | 第16-17页 |
五 间充质干细胞分化 | 第17-18页 |
六 集落形成实验 | 第18页 |
七 肿瘤干细胞球形成实验 | 第18-19页 |
八 CAF条件培养基收集 | 第19页 |
九 三维培养的迁移实验 | 第19-20页 |
十 qPCR | 第20-21页 |
十一 细胞因子检测 | 第21-22页 |
十二 流式细胞术细胞周期检测 | 第22页 |
十三 AnnexinV-APC与7-AAD双染法检测细胞凋亡 | 第22-23页 |
十四 Edu细胞增殖检测 | 第23页 |
十五 western blot | 第23-26页 |
十六 统计学方法 | 第26-27页 |
第一部分 间充质干细胞样肿瘤相关纤维母细胞的分离、鉴定及对肿瘤细胞干细胞性和迁移力的影响 | 第27-53页 |
技术路线 | 第27-28页 |
前言 | 第28-29页 |
结果 | 第29-44页 |
一 纤维母细胞原代培养及鉴定 | 第29-33页 |
二 间充质干细胞样肿瘤相关纤维母细胞的分离和鉴定 | 第33-37页 |
三 间充质干细胞样肿瘤相关纤维母细胞对肿瘤细胞的影响 | 第37-44页 |
讨论 | 第44-52页 |
小结 | 第52-53页 |
第二部分 维甲酸通过静止肿瘤相关纤维母细胞的功能抑制胰腺肿瘤细胞迁移和上皮-间质转化 | 第53-76页 |
技术路线 | 第53-54页 |
前言 | 第54-55页 |
结果 | 第55-72页 |
一 维甲酸对胰腺癌肿瘤细胞系Panc-1和Aspc-1的影响 | 第55-61页 |
二 维甲酸对胰腺癌肿瘤相关纤维母细胞的作用 | 第61-66页 |
三 维甲酸作用后CAF条件培养基对肿瘤细胞迁移力影响 | 第66-69页 |
四 维甲酸作用后CAF条件培养基内IL-6变化对肿瘤细胞EMT的影响 | 第69-72页 |
讨论 | 第72-75页 |
小结 | 第75-76页 |
综述一 MSCs在肿瘤微环境中的作用 | 第76-80页 |
综述二 维甲酸对肿瘤的抑制作用 | 第80-85页 |
参考文献 | 第85-101页 |
致谢 | 第101-102页 |