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Neuronostatin对痛觉、胃肠运动和情绪的影响及脂基化蛋白LC3-Ⅱ的半合成

中文摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一部分 Neuronostatin对痛觉、胃肠运动和情绪的影响第11-55页
 第一章 前言第11-22页
  1 Neuronostatin的研究进展第11-17页
   ·Neuronostatin的发现及结构特征第11-13页
   ·Neuronostatin的组织分布第13页
   ·Neuronostatin的生物学效应第13-17页
   ·Neuronostatin的候选受体第17页
  2. Neuronostatin和生长抑素在分布、结构和生理功能上的异同第17-19页
  3. 中枢黑皮素系统第19-20页
   ·内源性黑皮素第19-20页
   ·黑皮素受体第20页
  4. 阿片系统第20-21页
   ·内源性阿片肽第20-21页
   ·阿片受体第21页
  5 GABA和GABA受体第21-22页
 第二章 立题依据第22-23页
 第三章 实验材料和方法第23-28页
  1 实验材料第23页
   ·实验动物第23页
   ·药品第23页
   ·仪器第23页
  2 实验方法第23-27页
   ·多肽合成第23-25页
   ·实验动物模型及测试第25-27页
  3 统计方法第27-28页
 第四章 结果及其分析第28-47页
  1 多肽合成第28-30页
  2 Neuronostatin对小鼠急性痛觉的影响(小鼠热甩尾实验)第30-33页
   ·热甩尾模型中neuronostatin能诱导镇痛效应第30页
   ·不同的受体的拮抗剂对neuronostatin诱导的镇痛效应的影响第30-33页
  3 Neuronostatin对小鼠慢性疼痛的影响(小鼠福尔马林实验)第33-37页
   ·慢性炎症痛觉模型侧脑室注射neuronostatin诱导痛敏效应第33-34页
   ·Neuronostatin诱导慢性炎症痛觉模型痛敏效应的作用机制第34-37页
  4 侧脑室注射neuronostatin对小鼠胃肠功能的的影响第37-41页
   ·侧脑室注射neuronostatin对小鼠胃排空率和胃肠推进率的的影响第37-38页
   ·侧脑室注射neuronostatin抑制胃排空率和胃肠推进率的作用机制第38-41页
  5 侧脑室注射neuronostatin对情绪的影响第41-45页
   ·侧脑室注射neuronostatin诱导了小鼠抑郁样行为第41-42页
   ·侧脑室注射neuronostatin对小鼠自主活动没有显著影响第42-43页
   ·不同受体的抑制剂对neuronostatin诱导的抑郁样行为的影响第43-45页
  6 C-末端未酰胺化修饰的neuronostatin的生物活性第45-47页
 第五章 讨论第47-54页
 第六章 结论第54-55页
第二部分 脂基化蛋白LC3-Ⅱ的半合成第55-129页
 第一章 前言第55-85页
  1 细胞自噬第55-76页
   ·细胞自噬的分类第56-58页
   ·细胞自噬相关基因(autophagy-related genes,Atg)第58-60页
   ·细胞自噬的分子机制第60-72页
   ·细胞自噬的生理功能第72-76页
  2 细胞自噬的研究方法第76-80页
   ·形态学方法第77-78页
   ·细胞自噬的特异标志物第78-80页
  3 蛋白化学合成第80-83页
   ·自然化学连接(NCL)第80-81页
   ·自然化学连接(NCL)方法的改进第81-82页
   ·表达蛋白连接(EPL)第82-83页
  4 膜融合的研究方法第83-85页
   ·动态光散射技术(dynamic light scattering,DLS)第83页
   ·膜脂混合测试(lipid mixing assay)第83-85页
 第二章 立题依据第85-86页
 第三章 实验材料和方法第86-108页
  1 实验材料第86-92页
   ·药品第86-89页
   ·材料第89-90页
   ·菌株第90页
   ·仪器第90-91页
   ·实验中用到的缓冲液和培养基第91-92页
  2 方法第92-108页
   ·肽合成及分析和制备方法第92-96页
   ·基因的克隆第96-101页
   ·蛋白表达和纯化第101-105页
   ·蛋白硫酯和脂肽的连接和纯化第105-106页
   ·脂基化蛋白的纯化第106页
   ·Atg4对LC3蛋白的剪切第106-107页
   ·脂质体测试第107-108页
 第四章 结果及其分析第108-124页
  1 LC3-Ⅱ的合成策略第108-110页
  2 蛋白硫酯的表达测试第110-114页
   ·LC3的克隆和蛋白表达测试第110-111页
   ·MBP-LC3的克隆和蛋白表达测试第111-112页
   ·LC3蛋白硫酯的表达和纯化第112-114页
  3 LC3蛋白硫酯的化学反应性测试第114-117页
  4 脂基化蛋白LC3-ⅡC末端脂肽的合成第117-120页
  5 蛋白硫酯和脂肽的连接及其产物的纯化第120-122页
  6 Atg4对半合成的脂基化蛋白LC3-PE的剪切第122页
  7 脂质体测试第122-124页
 第五章 讨论第124-128页
 第六章 结论第128-129页
参考文献第129-140页
附录第140-147页
在学期间的研究成果第147-148页
致谢第148页

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