| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 符号说明 | 第18-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-54页 |
| ·小分子化合物靶点鉴定方法概述 | 第19-30页 |
| ·采用亲和层析法的靶点鉴定策略 | 第19-21页 |
| ·采用生物素化法的靶点鉴定策略 | 第21-26页 |
| ·采用同位素或荧光标记法的靶点鉴定策略 | 第26-27页 |
| ·采用光亲和法的靶点鉴定策略 | 第27-28页 |
| ·靶点蛋白种类的鉴定和验证 | 第28页 |
| ·现存靶点鉴定方法的不足与利用金纳米探针鉴定靶点的优势 | 第28-30页 |
| ·金纳米颗粒的合成,与细胞的相互作用及其在靶点鉴定中的应用 | 第30-34页 |
| ·金纳米颗粒的合成方法 | 第30-31页 |
| ·金纳米颗粒与细胞的相互作用 | 第31-33页 |
| ·金纳米颗粒在靶点鉴定中的应用 | 第33-34页 |
| ·细胞内激酶对微管损伤后的细胞存活的影响 | 第34-38页 |
| ·微管损伤后促进细胞凋亡的激酶 | 第35-36页 |
| ·微管损伤后维持细胞存活的激酶 | 第36-37页 |
| ·Dyrk1B激酶的功能及其在微管损伤后的作用 | 第37-38页 |
| ·本研究工作的意义与前景 | 第38-39页 |
| ·参考文献 | 第39-54页 |
| 第二章 利用纳米探针鉴定新型噻唑烷酮类化合物的抗癌靶点 | 第54-83页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·主要实验材料 | 第55-56页 |
| ·主要实验仪器 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-65页 |
| ·化合物2和4的设计与合成 | 第57-61页 |
| ·金纳米探针GNP-2 and GNP-4的合成 | 第61页 |
| ·金纳米探针的电镜观察 | 第61页 |
| ·定量金纳米探针表面连接的化合物的数量 | 第61页 |
| ·非小细胞肺癌H460细胞的培养 | 第61-62页 |
| ·细胞存活率的检测 | 第62页 |
| ·金纳米探针细胞摄入的电镜观察 | 第62-63页 |
| ·H460细胞裂解液的准备 | 第63页 |
| ·靶点蛋白的鉴定 | 第63页 |
| ·微管蛋白聚合实验 | 第63-64页 |
| ·微管免疫荧光实验 | 第64页 |
| ·蛋白印迹法(Western Blot)检测 | 第64-65页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期分布 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-77页 |
| ·阴性对照小分子化合物3的细胞效应确定 | 第65-66页 |
| ·金纳米探针GNP-2和GNP-4的表征 | 第66-68页 |
| ·金纳米探针的生物活性 | 第68-70页 |
| ·利用金纳米探针进行化合物1的靶点鉴定 | 第70-73页 |
| ·化合物1的靶点验证 | 第73-76页 |
| ·化合物1引起细胞周期阻滞和凋亡的发生 | 第76-77页 |
| ·结论 | 第77-78页 |
| ·参考文献 | 第78-83页 |
| 第三章 双靶向抑制微管聚合及Dyrk1B激酶的新型噻唑烷酮类化合物的研究 | 第83-111页 |
| ·引言 | 第83-84页 |
| ·主要实验材料 | 第84-85页 |
| ·主要实验仪器 | 第85-86页 |
| ·实验方法 | 第86-90页 |
| ·探针A和B的合成与表征 | 第86页 |
| ·细胞外微管蛋白聚合实验 | 第86-87页 |
| ·横纹肌肉瘤RD细胞的培养 | 第87页 |
| ·免疫荧光实验 | 第87页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期分布 | 第87页 |
| ·RD细胞裂解液的准备 | 第87-88页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第88页 |
| ·细胞存活率的检测 | 第88-89页 |
| ·KINOMEscan's激酶实验 | 第89页 |
| ·细胞外Dyrk1B激酶活性的检测 | 第89页 |
| ·免疫复合物激酶试验 | 第89-90页 |
| ·蛋白印迹法(Western Blot)检测 | 第90页 |
| ·结果与讨论 | 第90-106页 |
| ·两个小分子探针具有相似的微管聚合抑制作用 | 第90-92页 |
| ·两个小分子探针引发不同的细胞效应 | 第92-98页 |
| ·与探针B相比,探针A可以抑制Dyrk1B激酶的活性并阻断Dyrk1B相关的细胞修复途径 | 第98-102页 |
| ·微管损伤后Dyrk1B激酶介导的细胞存活效应的程度定量 | 第102-103页 |
| ·Dyrk1B相关的维持细胞存活的机制 | 第103-106页 |
| ·结论 | 第106-107页 |
| ·参考文献 | 第107-111页 |
| 附录1 | 第111-112页 |
| 附录2 | 第112-114页 |
| 附录3 | 第114-118页 |
| 附录4 | 第118-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文目录 | 第122-124页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第124页 |
