| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 图表目录 | 第9-10页 |
| 本论文常用中英文缩写词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 1 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·实验菌株与质粒载体 | 第18页 |
| ·酶类与主要试剂(盒) | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要培养基与溶液的配制 | 第18-21页 |
| ·LB培养基 | 第18页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第18-19页 |
| ·制备感受态细胞所需溶液 | 第19页 |
| ·蛋白电泳检测所需溶液 | 第19-20页 |
| ·蛋白诱导表达及提纯所需溶液 | 第20页 |
| ·Western-blot试验所用溶液 | 第20-21页 |
| ·ELISA实验所需溶液 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·拟态弧菌OmpU蛋白B细胞线性表位的预测与筛选 | 第21-22页 |
| ·OmpU蛋白B细胞线性表位的预测 | 第21-22页 |
| ·OmpU蛋白三维结构的同源模建与B细胞线性表位筛选 | 第22页 |
| ·OmpU蛋白主要抗原域基因的克隆 | 第22-24页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第22页 |
| ·OmpU蛋白主要抗原域基因的PCR扩增 | 第22页 |
| ·PCR产物的胶回收与纯化 | 第22页 |
| ·OmpUa基因与pMD-18T载体的连接与转化 | 第22-24页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第24-25页 |
| ·克隆质粒pMD-18T-OmpUa与表达载体的双酶切 | 第24页 |
| ·OmpUa与pAML-c4x的连接与转化 | 第24-25页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第25页 |
| ·重组表达质粒的表达与表达产物的鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第25页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第25-26页 |
| ·表达产物的表达形式分析 | 第26页 |
| ·重组融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第26-28页 |
| ·重组融合蛋白的大量表达 | 第26页 |
| ·重组融合蛋白的提纯 | 第26-27页 |
| ·免疫原制备 | 第27页 |
| ·实验兔免疫 | 第27页 |
| ·间接ELISA法检测抗体水平 | 第27-28页 |
| ·免疫琼脂扩散沉淀试验检测抗体水平 | 第28页 |
| ·OmpU蛋白B细胞线性表位的鉴定 | 第28-30页 |
| ·预测表位肽的生物合成 | 第28页 |
| ·预测表位的鉴定 | 第28-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-38页 |
| ·拟态弧菌OmpU蛋白B细胞线性表位的预测与筛选 | 第30-32页 |
| ·B细胞线性表位的预测 | 第30-31页 |
| ·B细胞线性表位的筛选 | 第31-32页 |
| ·重组克隆质粒的构建与鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第33页 |
| ·融合蛋白MBP-OmpUa的诱导表达与鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组融合蛋白的表达形式分析 | 第34-35页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·重组融合蛋白多克隆抗体的效价 | 第36页 |
| ·OmpU蛋白优势B细胞线性表位鉴定 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-42页 |
| ·蛋白质三维结构的构建及其在表位预测中的应用 | 第38页 |
| ·促进目的蛋白可溶性表达的方法 | 第38-39页 |
| ·肽ELISA方法的建立 | 第39-40页 |
| ·拟态弧菌OmpU蛋白抗原表位的研究意义 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |