中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
目录 | 第6-9页 |
符号说明 | 第9-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-19页 |
第一章 玉米赤霉烯酮研究进展 | 第11-14页 |
1 玉米赤霉烯酮及其污染现状 | 第11页 |
2 ZEA的毒性危害 | 第11-12页 |
·ZEA对生殖系统的危害 | 第11-12页 |
·ZEA对肿瘤发生的影响 | 第12页 |
·ZEA对免疫系统的影响 | 第12页 |
·ZEA对肝脏与肾脏的毒性影响 | 第12页 |
3 ZEA毒性机理 | 第12-14页 |
·生殖毒性机理 | 第12-13页 |
·诱导细胞凋亡毒性机理 | 第13页 |
·DNA损伤毒性机理 | 第13-14页 |
第二章 睾丸间质细胞研究进展 | 第14-19页 |
1 Leydig形态 | 第14-15页 |
2 Leydig功能 | 第15-16页 |
3 睾酮分泌功能调节 | 第16-18页 |
·下丘脑分泌激素的调节作用 | 第16页 |
·垂体分泌激素的调节作用 | 第16-17页 |
·甲状腺分泌激素的调节 | 第17页 |
·雌激素的调节 | 第17页 |
·其他因素的影响 | 第17-18页 |
4 ZEA对睾丸Leydig细胞的影响 | 第18页 |
5 本研究目的和意义 | 第18-19页 |
下篇 实验部分 | 第19-52页 |
第三章 睾丸Leydig细胞培养及ZEA染毒浓度的确定 | 第19-27页 |
1 材料 | 第19-20页 |
·实验动物及细胞 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
2 方法 | 第20-23页 |
·溶液的配制 | 第20-21页 |
·细胞及细胞培养方法 | 第21-23页 |
·SD大鼠睾丸Leydig细胞取材与原代培养 | 第21-22页 |
·猪睾丸Leydig细胞株培养传代与保存 | 第22-23页 |
·MTT法(四氮唑蓝比色分析法)确定ZEA染毒浓度 | 第23页 |
·统计学分析 | 第23页 |
3 结果 | 第23-25页 |
·细胞染色及纯度鉴定 | 第23-24页 |
·ZEA染毒剂量的确定 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25-27页 |
第四章 ZEA对原代培养Leydig细胞睾酮(T)分泌的影响 | 第27-33页 |
1 材料 | 第27-28页 |
·实验动物 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
2 方法 | 第28-29页 |
·染毒 | 第28页 |
·收集上清 | 第28页 |
·试剂盒检测 | 第28-29页 |
·标准品的稀释 | 第28页 |
·清洗缓冲液的稀释 | 第28页 |
·操作过程 | 第28-29页 |
·结果计算 | 第29页 |
·统计学分析 | 第29页 |
3 结果 | 第29-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
第五章 ZEA对睾丸Leydig细胞DNA的损伤作用 | 第33-40页 |
1 材料 | 第33-34页 |
·细胞 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
2 方法 | 第34-35页 |
·染毒 | 第34页 |
·彗星实验 | 第34-35页 |
·制片 | 第34页 |
·细胞裂解 | 第34页 |
·DNA解旋 | 第34页 |
·电泳 | 第34-35页 |
·中和 | 第35页 |
·脱水 | 第35页 |
·染色 | 第35页 |
·镜检 | 第35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
3 结果 | 第35-38页 |
·彗星图像 | 第35-36页 |
·彗星率 | 第36-37页 |
·拖尾细胞尾长和尾部DNA含量 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
第六章 ZEA诱导睾丸Leydig细胞凋亡的研究 | 第40-52页 |
1 材料 | 第40-41页 |
·细胞 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
2 方法 | 第41-45页 |
·溶液的配制 | 第41-42页 |
·流式细胞术 | 第42-43页 |
·染毒 | 第42页 |
·收获细胞 | 第42-43页 |
·流式细胞仪分析 | 第43页 |
·Western blotting | 第43-45页 |
·染毒 | 第43页 |
·蛋白样品制备 | 第43页 |
·制胶 | 第43-44页 |
·电泳 | 第44页 |
·考马斯亮蓝染色 | 第44页 |
·转印 | 第44页 |
·抗原抗体反应 | 第44-45页 |
·拍照 | 第45页 |
·统计学分析 | 第45页 |
3 结果 | 第45-50页 |
·ZEA对猪睾丸Leydig细胞凋亡的影响 | 第45-47页 |
·ZEA对猪睾丸Leydig细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响 | 第47-50页 |
·Bax和Bcl-2表达量 | 第47-48页 |
·Bax和Bcl-2相对表达量 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
全文结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
致谢 | 第63-64页 |