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铜耐性植物内生和根际细菌的生物多样性及其强化植物富集铜的研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
符号及缩略语说明第14-16页
第一章 文献综述第16-42页
 第一节 矿区土壤重金属污染概况及危害第16-19页
  1 矿区废弃地现状及特点第16-17页
  2 矿区土壤重金属污染及危害第17-19页
   ·矿区重金属污染现状第17-18页
   ·重金属污染的危害第18-19页
 第二节 重金属污染土壤的修复措施第19-23页
  1 物理化学修复第19页
  2 生物修复第19-23页
   ·微生物修复技术第19-20页
   ·动物修复技术第20页
   ·植物修复技术第20-23页
     ·植物提取技术第21-22页
       ·超积累植物第21-22页
       ·重金属的生物有效性第22页
     ·植物修复的促进措施第22-23页
 第三节 微生物强化植物修复土壤重金属污染第23-32页
  1 微生物在植物-微生物联合修复中的作用第24-28页
   ·微生物对植物生长的促进作用第24-27页
     ·根际促生细菌第24-25页
     ·内生促生细菌第25-27页
   ·微生物对重金属的活化作用第27-28页
  2 微生物强化植物修复重金属污染土壤的研究进展第28-32页
   ·菌根真菌第28-29页
   ·根际细菌第29-31页
   ·内生细菌第31-32页
 第四节 重金属污染环境下微生物资源及其多样性第32-39页
  1 微生物多样性研究方法与手段第32-34页
   ·培养(Culture-dependent)方法第32页
   ·生理学的方法—BIOLOG微量分析法第32页
   ·生物化学方法—PLFA(磷脂脂肪酸)技术第32-33页
   ·基于PCR技术的分子生物学方法第33-34页
     ·变性/温度梯度凝胶电泳(DGGE/TGGE)技术第33页
     ·16S rDNA克隆文库的构建第33页
     ·限制性片段长度多态性(RFLP)和扩增核糖体DNA限制性分析(ARDRA)第33-34页
     ·末端限制性片段多态性(T-RFLP)第34页
     ·随机引物扩增多态性DNA—RAPD第34页
   ·其它方法第34页
  2 重金属污染环境下微生物多样性研究进展第34-39页
   ·重金属污染环境下裸地微生物多样性第35-36页
   ·重金属污染环境下植物根际细菌多样性第36-38页
   ·重金属污染环境下内生细菌群落多样性第38-39页
 第五节 立题依据与研究意义第39-42页
第二章 铜耐性植物根内生细菌和根际土壤细菌多样性第42-80页
 第一节 铜耐性植物根内生细菌多样性第42-63页
  1 材料第42页
  2 方法第42-48页
  3 结果与分析第48-61页
   ·土壤样品分析第48-49页
   ·植物样品分析第49-50页
   ·植物根总DNA的提取第50页
   ·内生细菌16S rDNA片段的PCR扩增第50-51页
   ·16S rDNA克隆文库的构建及检测第51-52页
   ·16S rDNA克隆文库的ARDRA分型第52页
   ·克隆文库的评价第52-53页
   ·两种植物根内生细菌群落16S rDNA多样性及系统发育学分析第53-61页
     ·海州香薷根内生细菌群落16S rDNA多样性及系统发育学分析第53-56页
     ·鸭跖草根内生细菌群落16S rDNA多样性及系统发育学分析第56-59页
     ·两种植物根部内生细菌群落16S rDNA多样性的比较第59-61页
  4 讨论第61-63页
 第二节 铜耐性植物根际土壤细菌多样性第63-80页
  1 材料第63页
  2 方法第63-66页
  3 结果与分析第66-76页
   ·两种植物根际不同类群细菌的相对丰度第66-67页
   ·两种植物根际细菌的系统发育分析第67-70页
   ·根际土壤中16S rDNA扩增片段的DGGE分析第70-76页
     ·海州香薷根际细菌的多样性分析第71-74页
     ·鸭跖草根际细菌的多样性分析第74-76页
  4 讨论第76-78页
  5 本章小结第78-80页
第三章 铜抗性细菌的分离及其多样性第80-100页
 1 材料第80页
 2 方法第80-83页
 3 结果与分析第83-97页
   ·细菌数量分析及菌株的分离筛选第83-84页
   ·菌株的生物学特性第84-87页
     ·菌株对铜的抗性第84-85页
     ·具ACC脱氨酶菌株的筛选第85页
     ·菌株产吲哚乙酸(IAA)和铁载体能力测定第85-87页
   ·16S rDNA的ARDRA分析第87-90页
     ·内生细菌的16S rDNA限制性酶切聚类分析第88-89页
     ·根际细菌的16S rDNA限制性酶切聚类分析第89-90页
   ·功能菌株的系统发育学研究第90-96页
     ·内生细菌16S rDNA的系统发育分析第90-91页
     ·根际细菌16S rDNA的系统发育分析第91-94页
     ·具ACC脱氨酶菌株的系统发育学研究第94-96页
   ·两种植物可培养优势菌群的分析第96-97页
 4 讨论第97-99页
 5 本章小结第99-100页
第四章 铜耐性植物促生细菌的生物学特性第100-118页
 1 材料第100页
 2 方法第100-105页
 3 结果与分析第105-115页
   ·供试菌株的ACC脱氨酶活性第105页
   ·供试菌株产精氨酸脱羧酶的能力第105-106页
   ·供试菌株对重金属的抗性第106-107页
   ·供试菌株对碱式碳酸铜的溶解能力第107-108页
   ·供试细菌的鉴定第108-110页
     ·菌株形态学特征第108-109页
     ·菌株的生理生化特征第109-110页
     ·菌株的16S rDNA序列分析第110页
   ·环境条件对菌株生长的影响第110-112页
     ·温度、pH和盐浓度对菌株生长的影响第110-111页
     ·抗生素对菌株生长的影响第111-112页
   ·油菜砂培试验第112-115页
     ·供试菌株对铜胁迫下油菜生物量的影响第112-113页
     ·供试菌株对油菜地上部和根部铜浓度的影响第113-114页
     ·供试菌株对油菜铜吸收量的影响第114-115页
 4 讨论第115-117页
 5 本章小结第117-118页
第五章 铜抗性植物内生促生菌株对植物富集土壤Cu的促进作用第118-137页
 1 材料第118页
 2 方法第118-123页
 3 结果与分析第123-134页
   ·GFP标记菌株的获得与验证第123页
   ·菌株对油菜、玉米生物量的影响第123-124页
   ·菌株对油菜、玉米体内铜浓度的影响第124-125页
   ·菌株对油菜、玉米铜吸收富集的影响第125页
   ·菌株对可培养细菌数量的影响及其定殖情况第125-127页
   ·菌株对植物根际土壤水溶态、有效态、交换态铜的影响第127页
   ·菌株对植物根际土壤pH的影响第127-128页
   ·不同处理对植物根际土壤酶活性的影响第128-129页
   ·供试菌株提高植物生长和铜耐受性的机制第129-134页
     ·铜胁迫下供试菌株对玉米根部丙二醛含量的影响第129-130页
     ·铜胁迫下供试菌株对玉米根部抗氧化酶活性的影响第130页
     ·铜胁迫下供试菌株对玉米根部抗氧化非酶物质的影响第130-131页
     ·供试菌株对玉米根际细菌及根内生细菌群落的影响第131-134页
 4 讨论第134-136页
 5 本章小结第136-137页
全文总结第137-139页
研究展望第139-140页
本文的创新之处第140-141页
主要参考文献第141-153页
附录 培养基及主要试剂配方第153-159页
攻读博士学位期间发表论文第159-160页
致谢第160页

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