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SP对内蒙古绒山羊皮肤干细胞β-catenin及BMP2/4表达影响的初步研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 前言第9-21页
   ·SP作用及研究进展第9-13页
     ·SP的发现及生物学特点第9页
     ·SP的分布第9-11页
     ·SP的作用第11-13页
   ·Wnt信号通路在皮肤中的研究第13-17页
     ·Wnt信号通路第13-14页
     ·β-catenin作用及调控第14-16页
     ·Wnt信号通路对皮肤生长发育的影响第16-17页
   ·BMP信号通路对毛囊发生及周期的影响第17-20页
     ·TGF-β信号通路第17页
     ·BMP信号通路第17-18页
     ·BMP在毛囊发生及周期中的作用第18-20页
   ·本项目研究的目的及意义第20-21页
2 实验一 绒山羊皮肤干细胞的复苏及SP对其生长的影响第21-31页
   ·实验材料第21页
     ·主要实验仪器及耗材第21页
     ·主要试剂第21页
     ·几种溶液及培养液的配制第21页
   ·实验方法第21-23页
     ·培养皿的处理第21-22页
     ·内蒙古绒山羊皮肤干细胞的复苏第22页
     ·皮肤干细胞的传代培养第22页
     ·皮肤干细胞的冻存第22页
     ·SP对皮肤干细胞的生长影响第22-23页
   ·结果与分析第23-29页
     ·干细胞的复苏第23页
     ·干细胞的传代第23-24页
     ·SP对干细胞的影响第24-29页
   ·讨论第29-30页
   ·结论第30-31页
3 实验二 SP最适浓度的选择第31-48页
   ·实验材料第31页
     ·主要实验仪器及耗材第31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要试剂配方第31页
   ·实验方法第31-36页
     ·培养皿的处理第31-32页
     ·皮肤千细胞的解冻第32页
     ·SP处理皮肤干细胞第32页
     ·细胞总RNA的提取第32页
     ·RNA琼脂糖凝胶电泳检测第32-33页
     ·RT-PCR制备cDNA第33页
     ·荧光定量PCR引物设计及合成第33-34页
     ·β-catenin、BMP2/4及β-actin目的片段PCR扩增及回收第34-35页
     ·相对定量PCR检测β-catenin及BMP2/4基因在不同组中的表达第35-36页
   ·结果与分析第36-45页
     ·细胞总RNA提取第36页
     ·目的基因片段特异性扩增第36-37页
     ·β-catenin、BMP2/4及β-actin基因标准曲线第37-38页
     ·β-catenin、BMP2/4及β-actin基因扩增曲线及熔解曲线第38-39页
     ·SP刺激后β-catenin表达量及与空白对照组表达量的变化关系第39-41页
     ·SP刺激后BMP2表达量及与空白对照组表达量的变化关系第41-43页
     ·SP刺激后BMP4表达量及与空白对照组表达量的变化关系第43-45页
   ·讨论第45-47页
   ·结论第47-48页
4 实验三 SP受体对β-catenin与BMP2/4 表达的影响第48-57页
   ·实验材料第48页
     ·主要实验仪器及耗材第48页
     ·主要试剂第48页
   ·实验方法第48-49页
     ·皮肤干细胞的培养第48-49页
     ·细胞总RNA的提取第49页
     ·cDNA获取第49页
     ·定量PCR检测β-catenin及BMP2/4基因在不同组中的表达第49页
   ·结果与分析第49-56页
     ·SP刺激后β-catenin表达量及与空白对照组表达量的比值变化第49-51页
     ·SP刺激后BMP2表达量及与空白对照组表达量的比值变化第51-53页
     ·SP刺激后BMP4表达量及与空白对照组表达量的比值变化第53-56页
   ·讨论第56页
   ·结论第56-57页
5 全文结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-65页
作者简介第65页

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