| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-18页 |
| ·文昌鱼概述 | 第10-13页 |
| ·文昌鱼分类 | 第10-11页 |
| ·文昌鱼的形态结构及生活习性 | 第11-12页 |
| ·文昌鱼的性腺与繁殖 | 第12-13页 |
| ·文昌鱼研究现状 | 第13页 |
| ·miRNA 的研究 | 第13-17页 |
| ·miRNA 的概述 | 第13-14页 |
| ·miRNA 的形成与分子机制 | 第14-15页 |
| ·miRNA 作用机制 | 第15-16页 |
| ·miRNA 的研究方法 | 第16页 |
| ·miRNA 与性腺发育方面的研究 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 文昌鱼分类及性腺分期 | 第18-23页 |
| ·材料与方法 | 第18-21页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·仪器与试剂 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-21页 |
| ·日本文昌鱼和白氏文昌鱼分类 | 第18-19页 |
| ·文昌鱼性腺分期 | 第19-20页 |
| ·日本文昌鱼雌雄性腺总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·实验结果 | 第21-23页 |
| ·文昌鱼分类及分期结果 | 第21页 |
| ·总 RNA 的质量检测 | 第21-22页 |
| ·文昌鱼性腺中 miRNA 的表达普分析 | 第22-23页 |
| 第三章 实时荧光定量验证 miRNA 的表达 | 第23-32页 |
| ·材料与方法 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·仪器与试剂 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-28页 |
| ·差异表达 miRNA 的实验验证 | 第23-28页 |
| ·日本文昌鱼雌雄性腺总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·日本文昌鱼雌雄性腺 small RNA 的分离与纯化 | 第24-25页 |
| ·small RNA 加尾 | 第25-26页 |
| ·逆转录合成 cDNA 第一链 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·荧光实时定量 PCR 反应 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-32页 |
| ·Small RNA（加 ployA 尾）质量检测及 RT-PCR 结果 | 第28-29页 |
| ·差异表达 miRNA 的荧光定量 RT-PCR 验证 | 第29-32页 |
| 第四章 在斑马鱼体中低表达 miRNA | 第32-45页 |
| ·材料与方法 | 第35-39页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·仪器与试剂 | 第35-36页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·质粒转化与菌液检测 | 第36-37页 |
| ·质粒 DNA 提出与纯化 | 第37页 |
| ·斑马鱼显微注射 | 第37-38页 |
| ·miRNAs 的低表达 | 第38-39页 |
| ·低表达 miRNA 观察斑马鱼性腺的发育状况 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-45页 |
| ·kop-GFN 质粒转染检测结果 | 第39-40页 |
| ·转基因亲本阳性检测结果 | 第40-41页 |
| ·转基因荧光蛋白表达结果 | 第41-42页 |
| ·文昌鱼与斑马鱼 miRNA 的保守性分析及低表达实验结果 | 第42-43页 |
| ·低表达 miRNA，斑马鱼性腺的发育状况分析 | 第43-45页 |
| 第五章 结论与展望 | 第45-47页 |
| ·主要结论 | 第45-46页 |
| ·文昌鱼精巢和卵巢差异表达 miRNA 的筛选 | 第45页 |
| ·实时荧光定量 RT-PCR 验证 | 第45页 |
| ·在斑马鱼胚胎中低表达 miR-04 | 第45-46页 |
| ·展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
