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用于关节软骨损伤修复的胶原基材料的研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一章 绪论第13-31页
    1.1 参与关节软骨损伤和修复的因素第13-15页
        1.1.1 细胞外基质第13-15页
        1.1.2 软骨细胞第15页
    1.2 关节软骨的损伤分类第15-16页
    1.3 传统外科手术修复方法第16-17页
    1.4 生物活性分子介导的修复方法第17-18页
    1.5 胶原基材料复合生物活性分子的修复方法第18-23页
        1.5.1 胶原第18页
        1.5.2 胶原基材料的结构和类型第18-20页
        1.5.3 胶原基材料复合生长因子第20-23页
            1.5.3.1 体相载体第21页
            1.5.3.2 微米和纳米粒子第21-22页
            1.5.3.3 多生长因子控释胶原基材料第22页
            1.5.3.4 空间控释胶原基材料第22-23页
    1.6 课题的提出和主要研究内容第23-24页
    参考文献第24-31页
第二章 定向递送FGF2和IGF-1胶原基材料的研究第31-50页
    2.1 前言第31-32页
    2.2 试剂和仪器第32-33页
        2.2.1 试剂第32页
        2.2.2 仪器设备第32-33页
    2.3 实验方法第33-38页
        2.3.1 构建负载IGF-1和FGF2的胶原基材料第33-34页
        2.3.2 扫描电镜表征第34页
        2.3.3 胶原基材料的体外定性释放第34-36页
        2.3.4 胶原基材料的体外定释放第36-37页
        2.3.5 胶原基材料的体内释放第37-38页
        2.3.6 数据处理第38页
    2.4 实验结果第38-44页
    2.5 讨论和结论第44-46页
    2.6 本章小结第46页
    参考文献第46-50页
第三章 定向递送FGF2和IGF-1的胶原基材料对关节软骨损伤修复的作用第50-73页
    3.1 前言第50-51页
    3.2 实验试剂和仪器第51-52页
    3.3 实验方法第52-62页
        3.3.1 定向递送IGF-1和FGF2胶原基材料对关节软骨损伤修复的早期影响第52-58页
            3.3.1.1 实验动物及其分组第52-53页
            3.3.1.2 手术过程及取材第53-54页
            3.3.1.3 总RNA的分离提取第54页
            3.3.1.4 cDNA的合成第54-55页
            3.3.1.5 实时荧光定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)第55-57页
            3.3.1.6 BMP2和BMP4蛋白酶联免疫分析第57-58页
        3.3.2 定向递送IGF-1和FGF2胶原基材料对关节软骨损伤的修复作用第58-59页
            3.3.2.1 实验动物及分组第58页
            3.3.2.2 手术操作及取材第58页
            3.3.2.3 苏木精-伊红染色(HE染色)第58-59页
            3.3.2.4 番红O-固绿染色第59页
            3.3.2.5 Ⅱ型胶原免疫组化染色第59页
        3.3.3 组织学评分第59-62页
        3.3.4 统计分析第62页
    3.4 实验结果第62-69页
        3.4.1 软骨基因表达谱的变化第62-63页
        3.4.2 软骨下骨基因的改变第63-64页
        3.4.3 BMP2和BMP4表达的变化第64-65页
        3.4.4 关节软骨缺损的修复第65-66页
        3.4.5 组织免疫学观察第66-68页
        3.4.6 组织学评分第68-69页
    3.5 实验结果和讨论第69-71页
    3.6 本章小结第71页
    参考文献第71-73页
第四章 Ga13胶原基材料对关节软骨损伤的研究第73-91页
    4.1 前言第73-74页
    4.2 实验试剂和仪器第74-75页
        4.2.1 试剂第74-75页
        4.2.2 仪器设备第75页
    4.3 实验方法第75-80页
        4.3.1 分离培养软骨组织块和细胞第75-76页
            4.3.1.1 软骨组织块的分离和培养第75-76页
            4.3.1.2 软骨细胞的分离和培养第76页
        4.3.2 Ga13胶原基材料的制备第76-77页
        4.3.3 动物实验第77-78页
            4.3.3.1 实验动物及其分组第77页
            4.3.3.2 手术过程及取材第77-78页
        4.3.4 基因表达谱的检测第78-79页
            4.3.4.1 RNA的分离提取第78页
            4.3.4.2 cDNA的合成第78页
            4.3.4.3 qRT-PCR第78-79页
        4.3.5 酶联免疫分析(Elisa分析)第79-80页
        4.3.6 苏木素-伊红染色(HE染色)第80页
        4.3.7 统计分析第80页
    4.4 实验结果第80-86页
        4.4.1 Gal3对软骨细胞的迁移和基因表达的影响第80-82页
        4.4.2 Gal3胶原基材料的构建第82-83页
        4.4.3 Gal3胶原基材料对软骨组织基因表达的影响第83-84页
        4.4.4 Gal3胶原基材料对炎症的影响第84-85页
        4.4.5 Gal3胶原基材料对滑膜的影响第85-86页
    4.5 讨论与结论第86-88页
    4.6 本章小结第88页
    参考文献第88-91页
第五章 取向改性胶原基材料第91-113页
    5.1 前言第91-92页
    5.2 实验试剂和仪器第92-94页
        5.2.1 试剂第92-93页
        5.2.2 仪器设备第93-94页
    5.3 实验方法第94-98页
        5.3.1 CTBP和CTBP-PEG-CTBP的合成第94-95页
            5.3.1.1 CTBP的合成第94页
            5.3.1.2 CTBP-PEG-CTBP的合成第94-95页
        5.3.2 CTBP及CTBP-PEG-CTBP对胶原纤维的影响第95-96页
            5.3.2.1 胶原纤维自组装第95页
            5.3.2.2 CTBP-PEG-CTBP对胶原纤维取向的影响第95-96页
        5.3.3 取向胶原基材料的CTBP-PEG-CTBP释放第96页
        5.3.4 CTBP-PEG-CTBP取向胶原基材料对软骨细胞的影响第96-97页
            5.3.4.1 软骨细胞提取和培养第96页
            5.3.4.2 取向胶原基材料对软骨细胞活性的影响第96-97页
            5.3.4.3 取向胶原基材料对软骨细胞形态的影响第97页
        5.3.5 统计分析第97-98页
    5.4 实验结果第98-107页
        5.4.1 CTBP对胶原纤维自组装的影响第98-100页
        5.4.2 CTBP-PEG-CTBP对胶原纤维自组装的影响第100-102页
        5.4.3 CTBP-PEG-CTBP对胶原纤维取向排列的影响第102-104页
        5.4.4 取向改性胶原基材料的CTBP-PEG-CTBP释放第104-105页
        5.4.5 取向改性胶原基材料对软骨细胞的影响第105-107页
    5.5 结论和讨论第107-109页
    5.6 本章小结第109页
    参考文献第109-113页
全文总结第113-114页
在学期间发表论文及成果第114-116页
致谢第116页

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