非转染人角膜上皮细胞系的建立、鉴定及其克隆化研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 角膜上皮细胞体外培养技术的研究现状 | 第11-17页 |
| ·角膜上皮细胞的培养方法 | 第12-14页 |
| ·组织块贴壁法 | 第12-13页 |
| ·酶消化培养法 | 第13-14页 |
| ·角膜上皮细胞的培养条件 | 第14-17页 |
| ·基础培养基 | 第14页 |
| ·血清 | 第14-16页 |
| ·添加因子 | 第16页 |
| ·细胞外基质 | 第16页 |
| ·饲养层和载体 | 第16-17页 |
| ·气液界面 | 第17页 |
| 2 连续性角膜上皮细胞细胞系的建立 | 第17-20页 |
| ·癌基因转染法建立角膜上皮细胞细胞系 | 第18-19页 |
| ·端粒酶转染法建立角膜上皮细胞细胞系 | 第19页 |
| ·非转染的连续培养法建立角膜上皮细胞细胞系 | 第19-20页 |
| 3 本文的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 非转染人角膜上皮细胞系的建立 | 第21-30页 |
| 1 实验用品 | 第21-24页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·主要实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验药品 | 第22页 |
| ·常用溶液配方 | 第22-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-25页 |
| ·人角膜上皮细胞原代培养的启动 | 第24页 |
| ·培养板的处理 | 第24页 |
| ·角膜上皮材料的获取 | 第24页 |
| ·人角膜上皮细胞的原代培养启动 | 第24页 |
| ·人角膜上皮细胞的继代培养 | 第24-25页 |
| ·人角膜上皮细胞的冻存与复苏 | 第25页 |
| ·人角膜上皮细胞的冻存 | 第25页 |
| ·人角膜上皮细胞的复苏 | 第25页 |
| 3 实验结果 | 第25-27页 |
| ·人角膜上皮细胞的原代培养 | 第25-26页 |
| ·人角膜上皮细胞的继代培养 | 第26页 |
| ·人角膜上皮细胞的冻存与复苏 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27-29页 |
| 5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 非转染人角膜上皮细胞系的鉴定 | 第30-43页 |
| 1 实验用品 | 第30-33页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验药品 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-36页 |
| ·人角膜上皮细胞的形态学观察 | 第33-34页 |
| ·人角膜上皮细胞的光学显微镜观察 | 第33页 |
| ·人角膜上皮细胞的扫描电镜观察 | 第33-34页 |
| ·人角膜上皮细胞的生长特性测定 | 第34页 |
| ·人角膜上皮细胞的染色体组型分析 | 第34-35页 |
| ·处理、收集细胞 | 第34页 |
| ·低渗处理细胞 | 第34页 |
| ·固定 | 第34-35页 |
| ·制片 | 第35页 |
| ·染色和观察 | 第35页 |
| ·人角膜上皮细胞标志蛋白的免疫荧光检测 | 第35页 |
| ·人角膜上皮细胞的致瘤性检验 | 第35-36页 |
| 3 实验结果 | 第36-40页 |
| ·人角膜上皮细胞的形态学观察 | 第36-37页 |
| ·光学显微镜观察 | 第36-37页 |
| ·扫描电镜观察 | 第37页 |
| ·人角膜上皮细胞的生长特性测定 | 第37-38页 |
| ·人角膜上皮细胞的染色体组型分析 | 第38-39页 |
| ·人角膜上皮细胞标志蛋白的免疫荧光检测 | 第39-40页 |
| ·人角膜上皮细胞的致瘤性检验 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第四章 人角膜上皮细胞的克隆化培养及鉴定 | 第43-54页 |
| 1 实验用品 | 第43-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 5 本章小结 | 第53-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简历 | 第62页 |
| 在学期间发表的学术论文及专利 | 第62页 |
