| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·高等植物成花诱导研究进展 | 第10-16页 |
| ·光周期途径 | 第10-12页 |
| ·光周期现象 | 第10页 |
| ·植物对光周期信号的接受和感应 | 第10-11页 |
| ·光周期信号诱导成花相关基因 | 第11-12页 |
| ·春化途径 | 第12-13页 |
| ·春化作用 | 第12页 |
| ·春化作用相关基因及作用机制 | 第12-13页 |
| ·赤霉素途径 | 第13-14页 |
| ·自主途径 | 第14-16页 |
| ·开花途径整合因子 | 第16页 |
| ·蝴蝶兰成花研究进展 | 第16-17页 |
| ·蝴蝶兰生物学习性 | 第16-17页 |
| ·蝴蝶兰成花相关基因研究进展 | 第17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 朵丽蝶兰成花相关基因的获得与分析 | 第18-20页 |
| ·抑制性消减文库的构建 | 第18页 |
| ·成花相关基因的筛选 | 第18-20页 |
| ·筛选方法 | 第18页 |
| ·筛选结果 | 第18-20页 |
| 第三章 DhPRP39 和DhFVE基因的克隆 | 第20-42页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·菌种和载体 | 第20页 |
| ·仪器设备 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-29页 |
| ·提取总RNA | 第20-21页 |
| ·消化基因组DNA | 第21-22页 |
| ·特异性引物设计 | 第22页 |
| ·3' RACE扩增基因 3'端序列 | 第22-24页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第22-23页 |
| ·3' RACE第一轮扩增 | 第23页 |
| ·3' RACE第二轮扩增 | 第23-24页 |
| ·5 'RACE扩增基因 5'端序列 | 第24-27页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第24-25页 |
| ·cDNA纯化 | 第25页 |
| ·cDNA加尾 | 第25页 |
| ·5' RACE第一轮扩增 | 第25-26页 |
| ·5' RACE第二轮扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR产物回收 | 第27页 |
| ·回收产物与载体连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第27-28页 |
| ·连接产物转化及阳性克隆筛选 | 第28页 |
| ·菌检及测序 | 第28页 |
| ·基因序列生物学信息学分析 | 第28-29页 |
| ·开放阅读框与氨基酸序列 | 第28页 |
| ·同源基因氨基酸序列分析 | 第28-29页 |
| ·蛋白质分析预测 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-40页 |
| ·总RNA的提取 | 第29页 |
| ·3' RACE结果 | 第29-30页 |
| ·DhPRP39 基因扩增 | 第29-30页 |
| ·DhFVE基因扩增 | 第30页 |
| ·5'RACE结果 | 第30-32页 |
| ·DhPRP39 基因扩增 | 第30-31页 |
| ·DhFVE基因扩增 | 第31-32页 |
| ·cDNA序列分析 | 第32-34页 |
| ·DhPRP39 基因序列分析 | 第32页 |
| ·DhFVE基因序列分析 | 第32-34页 |
| ·蛋白质预测与分析 | 第34-35页 |
| ·DhPRP39 基因编码蛋白预测与分析 | 第34-35页 |
| ·DhFVE基因编码蛋白预测与分析 | 第35页 |
| ·同源性分析 | 第35-39页 |
| ·DhPRP39 基因同源性分析 | 第35-38页 |
| ·DhFVE基因同源性分析 | 第38-39页 |
| ·聚类分析 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 DhPRP39 和DhFVE基因的时空表达 | 第42-50页 |
| ·试验材料 | 第42页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·试验方法 | 第42-45页 |
| ·材料取样 | 第42-43页 |
| ·提取总RNA | 第43页 |
| ·引物设计 | 第43页 |
| ·内参引物 | 第43页 |
| ·DNA消化与cDNA的合成 | 第43-44页 |
| ·模板与引物验证 | 第44-45页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·模板与引物检测 | 第45-46页 |
| ·DhPRP39 基因表达分析 | 第46-47页 |
| ·DhFVE基因表达分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 DhPRP39 和DhFVE基因表达载体的构建 | 第50-62页 |
| ·试验材料 | 第50页 |
| ·菌种和载体 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·试验方法 | 第50-56页 |
| ·提取总RNA | 第50页 |
| ·cDNA的合成 | 第50页 |
| ·ORF特异性引物设计 | 第50-51页 |
| ·ORF扩增 | 第51页 |
| ·PCR产物回收 | 第51页 |
| ·回收产物与载体连接 | 第51-52页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌及阳性克隆筛选 | 第52页 |
| ·菌检与测序 | 第52页 |
| ·提取质粒 | 第52-53页 |
| ·载体酶切 | 第53页 |
| ·pC1301-DhPRP39 载体的构建 | 第53页 |
| ·pC1301-DhFVE载体的构建 | 第53页 |
| ·酶切产物胶回收 | 第53页 |
| ·酶切目的产物连接 | 第53-54页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌及阳性克隆筛选 | 第54页 |
| ·表达载体第一轮酶切验证 | 第54-55页 |
| ·pC1301-DhPRP39 载体酶切验证 | 第54页 |
| ·pC1301-DhFVE载体酶切验证 | 第54-55页 |
| ·电击法农杆菌感受态的制备 | 第55页 |
| ·载体质粒转化农杆菌及阳性克隆筛选 | 第55-56页 |
| ·农杆菌菌液提取质粒 | 第56页 |
| ·载体质粒转化大肠杆菌及阳性克隆筛选 | 第56页 |
| ·表达载体第二轮酶切验证 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-61页 |
| ·ORF扩增 | 第56-57页 |
| ·DhPRP39 基因扩增结果 | 第56-57页 |
| ·DhFVE基因扩增结果 | 第57页 |
| ·中间载体酶切结果 | 第57-59页 |
| ·表达载体酶切验证结果 | 第59-61页 |
| ·第一轮酶切验证 | 第59-60页 |
| ·第二轮酶切验证 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| 第六章 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第62-68页 |
| ·试验材料 | 第62页 |
| ·植物材料 | 第62页 |
| ·主要试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器设备 | 第62页 |
| ·试验方法 | 第62-64页 |
| ·拟南芥种植与处理 | 第62页 |
| ·转化介质的配制 | 第62页 |
| ·转化菌液的培养 | 第62页 |
| ·浸花法侵染 | 第62页 |
| ·纯合子筛选 | 第62-63页 |
| ·转基因植株表型观察 | 第63页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第63页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-66页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第64-65页 |
| ·转基因植株表型分析 | 第65-66页 |
| ·DhPRP39 转基因分析 | 第65-66页 |
| ·DhFVE转基因分析 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第七章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·研究结论 | 第68页 |
| ·研究展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 个人简介 | 第79-82页 |
| 致谢 | 第82页 |