| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-44页 |
| 1．鱼类免疫系统 | 第12-22页 |
| ·鱼类非特异性免疫 | 第12-13页 |
| ·鱼类的免疫器官和组织 | 第13-16页 |
| ·鱼类的免疫细胞 | 第16-18页 |
| ·鱼类体液免疫因子 | 第18-22页 |
| 2．阳离子抗菌肽 | 第22-36页 |
| ·概述 | 第22-23页 |
| ·阳离子抗菌肽结构特点 | 第23-24页 |
| ·阳离子抗菌肽的分类 | 第24-26页 |
| ·阳离子抗菌肽的生物学活性 | 第26-31页 |
| ·抗菌肽的免疫调节活性 | 第31-34页 |
| ·作用机理 | 第34-36页 |
| 3．鱼类细胞免疫因子 | 第36-42页 |
| ·概述 | 第36-37页 |
| ·干扰素(interferon, IFN) | 第37-38页 |
| ·白细胞介素(interleukin,IL) | 第38-40页 |
| ·肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF) | 第40-41页 |
| ·其它细胞免疫因子 | 第41-42页 |
| 4 本文的研究目的及技术路线 | 第42-44页 |
| 第二章 小分子量抗菌活性肽的大量原核表达 | 第44-62页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2. 材料与方法 | 第44-55页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·实验菌株及菌株表达前活化与确认 | 第46-47页 |
| ·原核表达条件的优化 | 第47-50页 |
| ·SDS-PAGE 条件的改进 | 第50-51页 |
| ·表达蛋白的纯化及 western-blot 检测 | 第51-55页 |
| ·Pt5 和 M13 蛋白的体外抗菌活性检测 | 第55页 |
| 3. 实验结果 | 第55-60页 |
| ·表达质粒的酶切鉴定 | 第55-56页 |
| ·优化前的蛋白表达 | 第56-57页 |
| ·自诱导条件下目的蛋白的表达 | 第57-58页 |
| ·western-blot 检测 | 第58-59页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第59页 |
| ·重组蛋白的体外抑菌活性 | 第59-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-62页 |
| 第三章 抗菌肽 Pt5 在鱼类急性感染中的免疫保护和调节作用 | 第62-81页 |
| 1 前言 | 第62-63页 |
| 2.材料和方法 | 第63-68页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·斑马鱼败血症模型的建立 | 第64-65页 |
| ·抗菌肽 Pt5 对斑马鱼感染的保护实验 | 第65页 |
| ·抗菌活性蛋白 Pt5 对斑马鱼器官的保护性分析 | 第65-66页 |
| ·外周血细胞血液学检测 | 第66-68页 |
| 3 结果 | 第68-78页 |
| ·斑马鱼败血症模型 | 第68页 |
| ·斑马鱼细菌性感染败血症保护效果分析 | 第68-70页 |
| ·Pt5 抑制细菌在感染败血症斑马鱼体内组织中扩散 | 第70-73页 |
| ·抗菌活性蛋白对感染斑马鱼外周血细胞的影响 | 第73-78页 |
| 4.讨论 | 第78-81页 |
| ·腹腔注射 Pt5 对斑马鱼感染败血症中的保护作用 | 第78页 |
| ·腹腔注射 Pt5 对斑马鱼组织器官的染菌情况的影响 | 第78-79页 |
| ·腹腔注射 Pt5 对斑马鱼外周血各类白细胞数量的影响 | 第79-81页 |
| 第四章 抗菌肽 Pt5 对斑马鱼免疫相关细胞因子的表达影响分析 | 第81-101页 |
| 1.前言 | 第81-82页 |
| 2.实验材料与方法 | 第82-89页 |
| ·实验材料 | 第82页 |
| ·实验试剂 | 第82页 |
| ·实验仪器 | 第82-83页 |
| ·实验设计 | 第83页 |
| ·Realtime-PCR 引物设计与合成 | 第83-85页 |
| ·各组织总 RNA 的提取 | 第85-86页 |
| ·反转录制备 cDNA | 第86-87页 |
| ·Real-time PCR 分析 | 第87-89页 |
| 3. 实验结果 | 第89-98页 |
| ·各组织各时期总 RNA 的质量 | 第89-91页 |
| ·RNA 样品中基因组 DNA 的消除及 cDNA 的检测 | 第91-92页 |
| ·定量 PCR 各引物的特异性检测 | 第92-93页 |
| ·促炎症因子基因在斑马鱼脾脏和肾脏中的表达 | 第93-96页 |
| ·抗炎症因子基因在斑马鱼脾脏和头肾中的表达 | 第96-98页 |
| 4 讨论 | 第98-101页 |
| ·促炎症因子基因在斑马鱼脾脏和肾脏中的表达 | 第99-100页 |
| ·抗炎症因子基因在斑马鱼脾脏和肾脏中的表达 | 第100-101页 |
| 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 作者简介 | 第112页 |
