摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-21页 |
·棉花体细胞胚胎发生 | 第12-15页 |
·棉花的组织培养研究 | 第12-13页 |
·棉花体细胞胚胎发生 | 第13页 |
·棉花体细胞胚胎发生过程的生理生化变化 | 第13页 |
·影响棉花体细胞胚胎发生的主要因素 | 第13-15页 |
·棉花体细胞胚胎发生相关基因的研究及相关方法 | 第15-19页 |
·植物体细胞胚胎发生相关基因研究概述 | 第15-16页 |
·研究体细胞胚胎发生相关基因的方法 | 第16-19页 |
·立题依据及意义 | 第19页 |
·实验目的 | 第19-20页 |
·实验路线 | 第20-21页 |
第二章 陆地棉体细胞胚胎发生过程抑制性消减文库的构建 | 第21-36页 |
·材料与试剂 | 第21-22页 |
·材料 | 第21页 |
·化学试剂、酶及试剂盒 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-29页 |
·总RNA 的提取 | 第22页 |
·mRNA 的分离纯化 | 第22-23页 |
·cDNA 的合成 | 第23-25页 |
·Rsa I 酶切 | 第25页 |
·接头连接 | 第25-26页 |
·杂交 | 第26-27页 |
·PCR 扩增 | 第27-29页 |
·消减文库的构建 | 第29页 |
·实验结果与分析 | 第29-35页 |
·总RNA 的提取 | 第29-30页 |
·mRNA 的分离 | 第30-31页 |
·cDNA 合成及酶切效率检测 | 第31-32页 |
·接头连接效率检测 | 第32-34页 |
·PCR 扩增 | 第34页 |
·消减效率检测 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
第三章体细胞胚胎发生消减文库的筛选及生物信息学分析 | 第36-53页 |
·材料与试剂 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·文库滴度检测 | 第36页 |
·插入片段的PCR 检测 | 第36-37页 |
·反向Northern 鉴定 | 第37-38页 |
·激素应答相关基因筛选 | 第38-39页 |
·测序及生物信息学分析 | 第39页 |
·RT-PCR | 第39-41页 |
·实验结果与分析 | 第41-50页 |
·消减文库的滴度检测 | 第41页 |
·插入片断大小检测 | 第41-42页 |
·反向Northern 鉴定 | 第42-43页 |
·激素应答基因的筛选 | 第43-44页 |
·测序及生物信息学分析 | 第44-49页 |
·RT-PCR | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
第四章 EST-SSR 分子标记的开发 | 第53-59页 |
·材料与试剂 | 第53页 |
·材料 | 第53页 |
·化学试剂、酶 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-57页 |
·寻找简单重复序列 | 第53页 |
·模板DNA 的提取 | 第53-55页 |
·PCR 扩增及检测 | 第55-57页 |
·实验结果与分析 | 第57-58页 |
·简单重复序列筛选 | 第57-58页 |
·单标记分析 | 第58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
第五章 创新点 | 第59-60页 |
第六章全文结论 | 第60-61页 |
·构建了陆地棉体细胞胚分化过程的抑制性消减文库 | 第60页 |
·消减文库的筛选与生物信息学分析 | 第60页 |
·对8 个ESTs 进行了半定量RT-PCR 的验证 | 第60页 |
·EST-SSR 分子标记的筛选 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简历 | 第71页 |