| 目录 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-8页 |
| 英文摘要 | 第8-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 技术路线 | 第18-19页 |
| 第一部分:卵巢癌γδTIL CDR3δ肽OT3肿瘤结合特异性验证及采用基于其结合特性的免疫—生物化学技术策略鉴定TCRγδ识别性蛋白抗原 | 第19-67页 |
| 实验材料 | 第19-28页 |
| 1、原代培养细胞及细胞系 | 第19页 |
| 2、人工合成多肽 | 第19-21页 |
| 3、CDR3δ移植抗体OT3Ab的构建 | 第21页 |
| 4、主要试剂 | 第21-22页 |
| 5、主要仪器和设备 | 第22页 |
| 6、溶液配制 | 第22-28页 |
| 实验方法 | 第28-44页 |
| 一、检测OT3肽与肿瘤细胞系细胞结合特异性的实验 | 第28-32页 |
| 二、检测OT3Ab与肿瘤细胞系细胞结合特异性的实验 | 第32-35页 |
| 三、筛选OT3肽反应性噬菌体随机展示十二肽的方法 | 第35-39页 |
| 四、用OT3肽筛选预制人卵巢癌cDNA λ噬菌体表达文库 | 第39-41页 |
| 五、OT3肽偶联柱亲和层析钓取反应性蛋白 | 第41-44页 |
| 实验结果 | 第44-67页 |
| 一、OT3肽与肿瘤细胞结合特异性验证 | 第44-48页 |
| 二、OT3Ab与肿瘤细胞结合特异性验证 | 第48-51页 |
| 三、筛选OT3肽反应性噬菌体随机展示十二肽 | 第51-56页 |
| 四、用OT3肽筛选预制人卵巢癌cDNAλ噬菌体表达文库 | 第56-58页 |
| 五、OT3肽偶联柱亲和层析钓取反应性蛋白 | 第58-67页 |
| 第二部分:hMSH2在肿瘤组织、细胞系中的表达情况分析及重组hMSH2蛋白及蛋白片段的原核表达和功能验证 | 第67-100页 |
| 实验材料 | 第67-73页 |
| 1、各种肿瘤细胞系及原代细胞 | 第67页 |
| 2、人工合成多肽 | 第67页 |
| 3、组织标本 | 第67页 |
| 4、菌株及质粒载体 | 第67-69页 |
| 5、主要试剂 | 第69-70页 |
| 6、主要仪器和设备 | 第70页 |
| 7、试剂及溶液配制 | 第70-73页 |
| 实验方法 | 第73-84页 |
| 一、分析hMSH2在SKOV3中的表达的实验 | 第73-79页 |
| 二、五种hMSH2重组蛋白的原核表达及功能验证 | 第79-84页 |
| 实验结果 | 第84-100页 |
| 一、hMSH2在SKOV3中表达情况的检测 | 第84-90页 |
| 二、五个重组hMSH2蛋白的原核表达及功能验证 | 第90-100页 |
| 第三部分:hMSH2在昆虫病毒表达系统中的表达及与原核表达的hMSH2重组蛋白的生物活性比较 | 第100-111页 |
| 实验材料 | 第100-103页 |
| 1、质粒、细胞及菌株 | 第100-101页 |
| 2、人工合成多肽 | 第101页 |
| 3、主要试剂 | 第101页 |
| 4、主要仪器和设备 | 第101页 |
| 5、试剂及溶液配制 | 第101-103页 |
| 实验方法 | 第103-106页 |
| 一、hMSH2蛋白在昆虫病毒表达系统中的表达 | 第103-105页 |
| 二、昆虫病毒表达系统表达的hMSH2蛋白与原核大肠杆菌系统表达的hMSH2蛋白的生物活性对比 | 第105-106页 |
| 实验结果 | 第106-111页 |
| 一、hMSH2蛋白在昆虫病毒表达系统中的表达 | 第106-107页 |
| 二、昆虫病毒表达系统表达的hMSH2蛋白与原核大肠杆菌系统表达的hMSH2蛋白的生物活性对比 | 第107-111页 |
| 讨论 | 第111-118页 |
| 全文小结 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 文献综述 | 第123-139页 |
| 个人简历 | 第139-141页 |
| 致谢 | 第141-142页 |
