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乳胶凝集试验、间接ELISA诊断鸭病毒性肝炎方法的建立

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
前言第15-17页
综述第17页
一、鸭病毒性肝炎概述第17-20页
 1 历史和分布第17-18页
 2 流行病学第18-19页
 3 发病机理第19页
 4 临床症状第19页
 5 病理变化第19页
 6 血清学诊断第19-20页
二、鸭肝炎病毒概述第20-21页
 1 Ⅰ型DHV第20-21页
 2 Ⅱ垂DHV第21页
 3 Ⅲ型DHV第21页
三、乳胶凝集试验的研究进展第21-25页
 1 凝集试验原理第21-22页
 2 乳胶凝集试验原理第22页
 3 乳胶致敏技术的研究现状第22-25页
实验一 抗原与抗体的制备及二抗酶标第25-34页
 1 材料第25页
 2 方法第25-30页
   ·抗原的制备第25-27页
     ·病毒的增殖第25-26页
     ·病毒感染力的测定第26页
     ·病毒抗原的提纯第26-27页
   ·抗体的制备第27-29页
     ·阳性血清的制备第27页
     ·阴性血清的制备第27页
     ·二抗(兔抗番鸭)阳性血清的制备第27-29页
   ·二抗(兔抗番鸭)的酶标第29-30页
     ·二抗血清IgG的提纯第29页
     ·经提纯的二抗IgG的酶标第29-30页
 3 结果第30-34页
   ·病毒感染力的测定第30-31页
   ·病毒纯化第31-32页
     ·氯仿处理及PEG浓缩第31页
     ·分子筛层析第31-32页
   ·抗体制备第32-34页
     ·阳性血清的质量鉴定第32页
     ·番鸭抗体(一抗)的纯化第32页
     ·兔抗番鸭抗体的纯化第32-33页
     ·酶标二抗的质量鉴定第33-34页
实验二 反向乳胶凝集试验检测鸭肝炎病毒抗原方法的建立第34-40页
 1 材料第34页
 2 方法第34-35页
   ·乳胶的预处理第34页
   ·抗体致敏乳胶条件的选择第34页
     ·抗体致敏乳胶最佳浓度与最佳致敏温度的选择(方阵法)第34页
     ·最佳致敏时间的选择第34页
   ·致敏乳胶质量检验第34-35页
     ·自凝性检验第34页
     ·特异性检验第34页
     ·重复性试验第34-35页
     ·阻断试验第35页
   ·对比试验第35页
   ·人工感染试验第35页
 3 结果第35-40页
   ·抗体致敏乳胶最佳条件选择第35-36页
     ·抗体致敏乳胶最佳浓度与最佳致敏温度(方阵法)第35-36页
     ·最佳致敏时间的选择第36页
   ·致敏乳胶质量检验第36-38页
     ·自凝性检验第36页
     ·特异性检验第36-37页
     ·重复性试验第37-38页
     ·阻断试验第38页
   ·对比试验第38页
   ·人工感染试验第38-39页
   ·乳胶凝集试验操作程序第39-40页
实验三 竞争乳胶凝集试验检测鸭肝炎病毒抗体方法的建立第40-46页
 1 材料第40页
 2 方法第40-41页
   ·抗原最小反应量的确定第40页
   ·敏感性试验第40页
   ·特异性试验第40-41页
     ·交叉试验第40-41页
     ·阻断试验第41页
   ·重复试验第41页
   ·结果判定标准第41页
 3 结果第41-46页
   ·抗原最小反应量的确定第41页
   ·敏感性试验第41-43页
   ·特异性试验第43-44页
     ·交叉试验第43-44页
     ·阻断试验第44页
   ·重复试验第44-46页
实验四 间接ELISA法检测鸭肝炎病毒抗体方法的建立第46-56页
 1 材料第46页
 2 方法第46-48页
   ·最佳反应条件的选择第46页
     ·酶标抗体最佳工作浓度的选择第46页
     ·最佳包被抗原浓度与最佳反应血清浓度的选择(方阵法)第46页
   ·封闭液的选择第46页
   ·临界值的确定第46页
   ·敏感性试验第46-47页
   ·特异性试验第47页
     ·交叉试验第47页
     ·阻断试验第47页
   ·重复试验第47页
   ·人工感染试验第47页
   ·间接ELISA检测DHV抗体滴度操作方法与结果判定第47-48页
 3 结果第48-56页
   ·酶标抗体工作浓度的选择(方阵法)第48页
   ·最佳包被抗原浓度与最佳反应血清浓度的选择(方阵法)第48-49页
   ·封闭液的选择第49-50页
   ·临界值的确定第50页
   ·敏感性试验第50-53页
   ·特异性试验第53-54页
     ·交叉试验第53页
     ·阻断试验第53-54页
   ·重复试验第54-55页
   ·人工攻毒雏鸭抗体检测第55-56页
讨论第56-60页
 1 抗原的制备第56页
 2 抗体的制备第56-57页
 3 反向乳胶凝集试验第57-58页
 4 竞争乳胶凝集试验第58页
 5 关于间接ELISA第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-65页
附录第65-68页
致谢第68页

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