| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| ·研究目的和意义 | 第12页 |
| ·国内外文献综述 | 第12-24页 |
| ·野生大豆耐盐性研究进展 | 第12-14页 |
| ·渗透胁迫相关转录因子的研究现状 | 第14-20页 |
| ·生物信息手段在基因克隆中的应用 | 第20-23页 |
| ·酵母单杂交技术在转录因子研究中的应用 | 第23-24页 |
| ·本研究的研究内容 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-44页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·仪器 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-44页 |
| ·电子克隆方法克隆耐盐野生大豆DREB基因 | 第27-32页 |
| ·同源克隆方法克隆耐盐野生大豆DREB基因 | 第32-34页 |
| ·酵母单杂交方法克隆耐盐野生大豆DREB基因 | 第34-40页 |
| ·DREB转录因子基因体内结合特异性分析 | 第40-43页 |
| ·克隆的6个DREB基因的进化分析 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-79页 |
| ·电子克隆方法克隆耐盐野生大豆DREB基因 | 第44-51页 |
| ·GsDREB1基因的电子克隆 | 第44-48页 |
| ·RT-PCR验证试验 | 第48-51页 |
| ·同源克隆方法克隆耐盐野生大豆DREB基因 | 第51-63页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第51-52页 |
| ·测序结果分析 | 第52-63页 |
| ·酵母单杂交方法克隆耐盐野生大豆DREB基因 | 第63-72页 |
| ·耐盐野生大豆cDNA文库的构建 | 第63-64页 |
| ·诱饵质粒3-AT抑制浓度的确定 | 第64-65页 |
| ·共转化酵母Y187 | 第65-66页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第66-67页 |
| ·阳性克隆测序结果的分析 | 第67-70页 |
| ·A52克隆全长序列的获得 | 第70-72页 |
| ·DREB转录因子基因体内结合特异性分析 | 第72-77页 |
| ·DREB转录因子基因结构域的分析 | 第72-74页 |
| ·PCR扩增DREB转录因子基因的结构域 | 第74-75页 |
| ·pGADT7-Rec2文库载体质粒的提取及线性化 | 第75页 |
| ·酵母感受态细胞的制备及转化 | 第75-77页 |
| ·克隆的6个DREB基因的进化分析 | 第77-79页 |
| 4 讨论 | 第79-82页 |
| 1.电子克隆技术 | 第79页 |
| 2.酵母单杂交技术 | 第79-81页 |
| 3.两次PCR方法引入同源重组序列 | 第81页 |
| 4.DREB转录因子基因功能的复杂性 | 第81页 |
| 5.下一步工作展望 | 第81-82页 |
| 5 结论 | 第82-83页 |
| 1.电子克隆方法克隆了GsDREB1基因 | 第82页 |
| 2.同源克隆方法克隆了5个DREB基因 | 第82页 |
| 3.酵母单杂交方法克隆与DRE顺式作用元件结合的转录因子基因 | 第82页 |
| 4.进行了DREB类转录因子基因体内结合特异性分析 | 第82页 |
| 5.分析了6个DREB基因的进化关系 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第91页 |
