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鸭肠炎病毒部分基因结构及相关功能的初步研究

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第一章 绪论第16-31页
   ·鸭病毒性肠炎概述第16页
   ·鸭肠炎病毒生物学特性第16-18页
     ·鸭肠炎病毒特性第16-17页
     ·鸭肠炎病毒形态发生第17-18页
   ·鸭肠炎病毒分子生物学研究进展第18-19页
   ·鸭病毒性肠炎诊断方法研究进展第19-21页
     ·综合分析流行病学、临床症状和病理变化第19页
     ·病毒的分离和鉴定第19页
     ·血清学方法第19-21页
     ·分子生物学方法第21页
   ·鸭病毒性肠炎的防制第21-23页
     ·灭活苗第22页
     ·弱毒疫苗第22-23页
     ·治疗第23页
   ·疱疹病毒分类及基因组结构第23-28页
     ·疱疹病毒分类第23页
     ·疱疹病毒形态结构第23-24页
     ·疱疹病毒基因组结构第24-25页
     ·疱疹病毒基因及其表达调节第25-26页
     ·疱疹病毒主要结构蛋白第26-28页
   ·B细胞抗原表位的筛选第28-30页
     ·抗原表位概述第28页
     ·B细胞抗原表位的研究方法第28-30页
   ·研究的目的和意义第30-31页
第二章 鸭肠炎病毒部分基因系统发育进化分析第31-55页
   ·材料与方法第31-34页
     ·病毒与细胞第31页
     ·质粒与菌种第31页
     ·酶类及主要生化试剂第31页
     ·主要仪器第31页
     ·扩增引物第31-32页
     ·鸡胚成纤维细胞的制备第32-33页
     ·鸭肠炎病毒的增殖第33页
     ·鸭肠炎病毒滴度的测定第33页
     ·鸭肠炎病毒基因组DNA提取及PCR扩增第33页
     ·基因的分子特征及系统发育进化分析第33-34页
   ·结果第34-50页
     ·鸭肠炎病毒在鸡胚成纤维细胞上的TCID_(50)、细胞病变及蚀斑形态第34-37页
     ·DEV clone-03 UL19、TK及其侧翼序列及UL27的PCR扩增第37页
     ·DEV clone-03 UL19、UL22、TK、UL24及UL27基因的分子特征第37-44页
     ·鸭肠炎病毒系统发育进化分析第44-50页
   ·讨论第50-55页
     ·鸭肠炎病毒增殖第50页
     ·鸭肠炎病毒部分基因的分子特征第50-53页
     ·鸭肠炎病毒系统发育进化分析第53-55页
第三章 鸭肠炎病毒部分功能基因的鉴定第55-73页
   ·材料与方法第55-59页
     ·病毒与细胞第55页
     ·质粒与菌种第55页
     ·酶类及主要生化试剂第55页
     ·主要仪器第55页
     ·扩增引物第55-56页
     ·鸡胚成纤维细胞的制备第56页
     ·鸭肠炎病毒的增殖第56页
     ·鸭肠炎病毒基因组DNA提取及PCR扩增第56页
     ·DEV clone-03 TK、UL19-N、UL19-M、UL19-C及UL27-M重组表达质粒的构建第56-57页
     ·DEV clone-03 TK、UL19-N、UL19-M、UL19-C及UL27-M表达及纯化第57-58页
     ·抗血清的制备第58页
     ·Western blot检测UL6、UL19及UL27第58页
     ·间接免疫荧光检测DEV clone-03 UL6、UL19及UL27第58-59页
     ·DEV clone-03 UL19作为诊断抗原的初步应用第59页
   ·结果第59-67页
     ·PCR扩增第59-60页
     ·重组质粒p19N、p19M、p19C、pTK及p27M的鉴定第60页
     ·重组表达质粒的鉴定第60-62页
     ·重组蛋白的表达及纯化第62-65页
     ·DEV clone-03 UL6、UL19及UL27的Western blot鉴定第65-66页
     ·DEV clone-03 UL6、UL19及UL27的间接免疫荧光鉴定第66-67页
     ·DEV clone-03 UL19检测疑似鸭病毒性肠炎血清样品第67页
   ·讨论第67-73页
     ·表达载体的选择第67-68页
     ·DEV clone-03 UL19、TK和UL27的表达第68-69页
     ·DEV clone-03 UL19、TK及UL27的纯化和复性第69-70页
     ·DEV clone-03 UL19、UL27和UL6的鉴定第70-72页
     ·DEV clone-03 UL19检测鸭病毒性肠炎第72-73页
第四章 鸭肠炎病毒UL19抗原表位的初步定位第73-89页
   ·材料与方法第73-79页
     ·病毒与细胞第73页
     ·质粒与菌种第73页
     ·酶类及主要生化试剂第73页
     ·实验动物第73页
     ·扩增引物第73-74页
     ·主要仪器第74页
     ·动物免疫第74页
     ·间接ELISA检测方法的建立第74-75页
     ·细胞融合第75-76页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第76页
     ·杂交瘤细胞的克隆化第76页
     ·细胞冻存及复苏第76页
     ·单克隆抗体腹水的制备第76-77页
     ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定第77-78页
     ·DEV clone-03 UL19抗原表位的初步定位第78-79页
   ·结果第79-87页
     ·抗原的制备第79页
     ·ELISA筛选方法的建立第79-80页
     ·动物免疫与抗体水平检测第80页
     ·细胞融合率第80-81页
     ·杂交瘤细胞株的建立第81页
     ·腹水效价的测定第81页
     ·杂交瘤细胞染色体分析第81-82页
     ·单克隆抗体亚类鉴定第82-83页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第83-84页
     ·DEV clone-03 UL19-C1、UL19-C2基因片段的扩增第84页
     ·重组质粒的鉴定第84-85页
     ·重组表达质粒的构建第85-86页
     ·DEV clone-03 UL19-C1、UL19-C2的表达第86页
     ·DEV UL19抗原表位的初步定位第86-87页
   ·讨论第87-89页
     ·DEV clone-03 UL19单克隆抗体的制备第87-88页
     ·DEV clone-03 UL19抗原表位的初步定位第88-89页
第五章 全文结论第89-90页
参考文献第90-99页
致谢第99-100页
作者简历第100页

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