摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 绪论 | 第16-31页 |
·鸭病毒性肠炎概述 | 第16页 |
·鸭肠炎病毒生物学特性 | 第16-18页 |
·鸭肠炎病毒特性 | 第16-17页 |
·鸭肠炎病毒形态发生 | 第17-18页 |
·鸭肠炎病毒分子生物学研究进展 | 第18-19页 |
·鸭病毒性肠炎诊断方法研究进展 | 第19-21页 |
·综合分析流行病学、临床症状和病理变化 | 第19页 |
·病毒的分离和鉴定 | 第19页 |
·血清学方法 | 第19-21页 |
·分子生物学方法 | 第21页 |
·鸭病毒性肠炎的防制 | 第21-23页 |
·灭活苗 | 第22页 |
·弱毒疫苗 | 第22-23页 |
·治疗 | 第23页 |
·疱疹病毒分类及基因组结构 | 第23-28页 |
·疱疹病毒分类 | 第23页 |
·疱疹病毒形态结构 | 第23-24页 |
·疱疹病毒基因组结构 | 第24-25页 |
·疱疹病毒基因及其表达调节 | 第25-26页 |
·疱疹病毒主要结构蛋白 | 第26-28页 |
·B细胞抗原表位的筛选 | 第28-30页 |
·抗原表位概述 | 第28页 |
·B细胞抗原表位的研究方法 | 第28-30页 |
·研究的目的和意义 | 第30-31页 |
第二章 鸭肠炎病毒部分基因系统发育进化分析 | 第31-55页 |
·材料与方法 | 第31-34页 |
·病毒与细胞 | 第31页 |
·质粒与菌种 | 第31页 |
·酶类及主要生化试剂 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·扩增引物 | 第31-32页 |
·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第32-33页 |
·鸭肠炎病毒的增殖 | 第33页 |
·鸭肠炎病毒滴度的测定 | 第33页 |
·鸭肠炎病毒基因组DNA提取及PCR扩增 | 第33页 |
·基因的分子特征及系统发育进化分析 | 第33-34页 |
·结果 | 第34-50页 |
·鸭肠炎病毒在鸡胚成纤维细胞上的TCID_(50)、细胞病变及蚀斑形态 | 第34-37页 |
·DEV clone-03 UL19、TK及其侧翼序列及UL27的PCR扩增 | 第37页 |
·DEV clone-03 UL19、UL22、TK、UL24及UL27基因的分子特征 | 第37-44页 |
·鸭肠炎病毒系统发育进化分析 | 第44-50页 |
·讨论 | 第50-55页 |
·鸭肠炎病毒增殖 | 第50页 |
·鸭肠炎病毒部分基因的分子特征 | 第50-53页 |
·鸭肠炎病毒系统发育进化分析 | 第53-55页 |
第三章 鸭肠炎病毒部分功能基因的鉴定 | 第55-73页 |
·材料与方法 | 第55-59页 |
·病毒与细胞 | 第55页 |
·质粒与菌种 | 第55页 |
·酶类及主要生化试剂 | 第55页 |
·主要仪器 | 第55页 |
·扩增引物 | 第55-56页 |
·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第56页 |
·鸭肠炎病毒的增殖 | 第56页 |
·鸭肠炎病毒基因组DNA提取及PCR扩增 | 第56页 |
·DEV clone-03 TK、UL19-N、UL19-M、UL19-C及UL27-M重组表达质粒的构建 | 第56-57页 |
·DEV clone-03 TK、UL19-N、UL19-M、UL19-C及UL27-M表达及纯化 | 第57-58页 |
·抗血清的制备 | 第58页 |
·Western blot检测UL6、UL19及UL27 | 第58页 |
·间接免疫荧光检测DEV clone-03 UL6、UL19及UL27 | 第58-59页 |
·DEV clone-03 UL19作为诊断抗原的初步应用 | 第59页 |
·结果 | 第59-67页 |
·PCR扩增 | 第59-60页 |
·重组质粒p19N、p19M、p19C、pTK及p27M的鉴定 | 第60页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第60-62页 |
·重组蛋白的表达及纯化 | 第62-65页 |
·DEV clone-03 UL6、UL19及UL27的Western blot鉴定 | 第65-66页 |
·DEV clone-03 UL6、UL19及UL27的间接免疫荧光鉴定 | 第66-67页 |
·DEV clone-03 UL19检测疑似鸭病毒性肠炎血清样品 | 第67页 |
·讨论 | 第67-73页 |
·表达载体的选择 | 第67-68页 |
·DEV clone-03 UL19、TK和UL27的表达 | 第68-69页 |
·DEV clone-03 UL19、TK及UL27的纯化和复性 | 第69-70页 |
·DEV clone-03 UL19、UL27和UL6的鉴定 | 第70-72页 |
·DEV clone-03 UL19检测鸭病毒性肠炎 | 第72-73页 |
第四章 鸭肠炎病毒UL19抗原表位的初步定位 | 第73-89页 |
·材料与方法 | 第73-79页 |
·病毒与细胞 | 第73页 |
·质粒与菌种 | 第73页 |
·酶类及主要生化试剂 | 第73页 |
·实验动物 | 第73页 |
·扩增引物 | 第73-74页 |
·主要仪器 | 第74页 |
·动物免疫 | 第74页 |
·间接ELISA检测方法的建立 | 第74-75页 |
·细胞融合 | 第75-76页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第76页 |
·杂交瘤细胞的克隆化 | 第76页 |
·细胞冻存及复苏 | 第76页 |
·单克隆抗体腹水的制备 | 第76-77页 |
·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第77-78页 |
·DEV clone-03 UL19抗原表位的初步定位 | 第78-79页 |
·结果 | 第79-87页 |
·抗原的制备 | 第79页 |
·ELISA筛选方法的建立 | 第79-80页 |
·动物免疫与抗体水平检测 | 第80页 |
·细胞融合率 | 第80-81页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第81页 |
·腹水效价的测定 | 第81页 |
·杂交瘤细胞染色体分析 | 第81-82页 |
·单克隆抗体亚类鉴定 | 第82-83页 |
·单克隆抗体特异性鉴定 | 第83-84页 |
·DEV clone-03 UL19-C1、UL19-C2基因片段的扩增 | 第84页 |
·重组质粒的鉴定 | 第84-85页 |
·重组表达质粒的构建 | 第85-86页 |
·DEV clone-03 UL19-C1、UL19-C2的表达 | 第86页 |
·DEV UL19抗原表位的初步定位 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-89页 |
·DEV clone-03 UL19单克隆抗体的制备 | 第87-88页 |
·DEV clone-03 UL19抗原表位的初步定位 | 第88-89页 |
第五章 全文结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
作者简历 | 第100页 |