| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-36页 |
| 引言 | 第16页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第16-26页 |
| ·PRRS概述 | 第16-17页 |
| ·PRRSV分子生物学特征 | 第17-21页 |
| ·PRRSV免疫学与致病机制的研究进展 | 第21-25页 |
| ·PRRSV的遗传变异 | 第25-26页 |
| ·PRRSV的疫苗与防治 | 第26页 |
| ·病毒的细胞受体 | 第26-31页 |
| ·病毒受体的概述 | 第26页 |
| ·病毒侵入宿主细胞的过程 | 第26-28页 |
| ·鉴定受体的方法 | 第28-31页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒受体的研究进展 | 第31-35页 |
| ·位于PAM细胞上的受体 | 第31-34页 |
| ·位于Marc-145细胞上的受体 | 第34-35页 |
| ·研究目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒宿主靶细胞受体结合域的鉴定 | 第36-53页 |
| ·材料和方法 | 第36-42页 |
| ·毒株、细胞、菌种、表达载体、抗体 | 第36-37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·主要试剂与药品 | 第37页 |
| ·仪器设备 | 第37页 |
| ·PAM细胞总RNA的提取及唾液酸粘附素全长基因的克隆 | 第37-39页 |
| ·全长Sn重组质粒的纯化、转染与其介导病毒结合能力的检测 | 第39-40页 |
| ·Sn分段表达载体的构建与其介导病毒结合能力的检测 | 第40页 |
| ·Sn结构域表达载体的构建与其介导病毒结合能力的检测 | 第40-41页 |
| ·氨基端结构域短肽的原核表达,蛋白纯化及高免血清的制备 | 第41页 |
| ·高免血清抑制病毒与转染细胞的吸附 | 第41-42页 |
| ·高免血清抑制病毒与PAM细胞的吸附 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-50页 |
| ·Sn基因的获得 | 第42-43页 |
| ·真核载体的构建 | 第43页 |
| ·全长唾液酸粘附素介导病毒的结合 | 第43-44页 |
| ·分段唾液酸粘附素介导病毒的结合 | 第44-46页 |
| ·结构域唾液酸粘附素介导病毒的结合 | 第46-47页 |
| ·氨基端短肽的原核表达与抗血清制备 | 第47-49页 |
| ·抗血清抑制病毒与转染PK15细胞或PAM细胞的吸附 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒中参与受体结合的病毒蛋白 | 第53-62页 |
| ·材料和方法 | 第53-56页 |
| ·毒株、细胞与抗体 | 第53-54页 |
| ·实验动物 | 第54页 |
| ·主要试剂与药品 | 第54页 |
| ·仪器设备 | 第54页 |
| ·病毒囊膜蛋白中七肽重复序列的分析 | 第54页 |
| ·PAM细胞的制备与培养 | 第54页 |
| ·病毒的纯化 | 第54-55页 |
| ·病毒囊膜蛋白的提取 | 第55页 |
| ·病毒囊膜蛋白与PAM细胞的结合 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-58页 |
| ·PRRSV结构蛋白中不包含七肽重复序列 | 第56-57页 |
| ·囊膜蛋白提取物与PAM细胞的结合 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-62页 |
| 第四章 我国大陆1996-2006年初猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株GP5蛋白的遗传变异与拓扑结构分析 | 第62-76页 |
| ·材料和方法 | 第63-64页 |
| ·临床样品 | 第63页 |
| ·毒株的地理分布 | 第63页 |
| ·GP5蛋白的进化树分析 | 第63页 |
| ·GP5蛋白的氨基酸序列分析 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-73页 |
| ·所检测的我国分离株均为北美洲型 | 第64-65页 |
| ·我国大陆分离株呈明显的两极分布态势 | 第65-67页 |
| ·发生变异的关键氨基酸 | 第67-70页 |
| ·亚群间其他特征性变异 | 第70页 |
| ·毒株的地域差异分布 | 第70-71页 |
| ·我国大陆分离株与疫苗株的关系 | 第71-73页 |
| ·GP5蛋白的拓扑结构 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-76页 |
| 第五章 我国大陆2006-2007年猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的遗传变异分析 | 第76-95页 |
| ·材料与方法 | 第78-80页 |
| ·全长基因组序列来源 | 第78页 |
| ·PRRSV变异株全长基因组的进化树分析 | 第78页 |
| ·PRRSV变异株各蛋白的氨基酸同源性分析 | 第78页 |
| ·PRRSV变异株二级结构、抗原性的变化 | 第78-79页 |
| ·潜在毒力相关位点的分析 | 第79页 |
| ·NSP2蛋白缺失部分的分析 | 第79页 |
| ·GP5蛋白变异与可能的功能改变 | 第79-80页 |
| ·N蛋白变异与可能的功能改变 | 第80页 |
| ·5'-NCR和RFS两翼序列RNA结构的改变 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-90页 |
| ·高致病性PRRSV变异株与现行疫苗株的亲缘关系较远 | 第80-81页 |
| ·不同地域分离的“高热综合病”PRRSV变异株来源于同一个祖先 | 第81-82页 |
| ·PRRSV变异株的高变区 | 第82-83页 |
| ·潜在毒力相关位点的比较分析 | 第83-84页 |
| ·NSP2蛋白缺失部分的分析 | 第84-85页 |
| ·GP5蛋白变异与可能的功能改变 | 第85-87页 |
| ·N蛋白变异与可能的功能改变 | 第87-88页 |
| ·RNA二级结构的变异 | 第88-90页 |
| ·讨论 | 第90-95页 |
| 第六章 全文结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-115页 |
| 附录 | 第115-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 作者简历 | 第134-135页 |
