摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-25页 |
·流感病毒的分子生物学 | 第12-18页 |
·病毒的结构与编码蛋白的功能 | 第12-16页 |
·流感病毒的复制 | 第16-17页 |
·流感病毒的遗传与变异 | 第17-18页 |
·高致病性禽流感的流行现状、危害及其公共卫生学意义 | 第18-21页 |
·H5亚型高致病性禽流感的流行与危害 | 第18-19页 |
·H5亚型高致病性禽流感病毒的公共卫生学意义 | 第19-21页 |
·禽流感疫苗研究进展 | 第21-23页 |
·全病毒灭活苗 | 第21页 |
·基因重组活载体疫苗 | 第21-22页 |
·核酸疫苗 | 第22-23页 |
·亚单位疫苗 | 第23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-34页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·毒株和细胞 | 第25页 |
·菌种和载体 | 第25页 |
·实验动物 | 第25页 |
·其他材料 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-34页 |
·四个 HA基因序列的测定及比较分析 | 第26-27页 |
·HA基因克隆以及杆状病毒转移载体的构建 | 第27-28页 |
·重组杆状病毒穿梭载体的筛选及鉴定 | 第28-29页 |
·HA蛋白的表达 | 第29-30页 |
·重组蛋白的检测 | 第30-31页 |
·疫苗的制备 | 第31-32页 |
·抗体效价(HI)监测及抗原相关性分析 | 第32-33页 |
·病毒中和试验 | 第33页 |
·疫苗的免疫保护试验 | 第33-34页 |
第三章 结果 | 第34-44页 |
·四种 HA基因的序列测定及比较分析 | 第34-35页 |
·HA基因的 RT-PCR扩增 | 第34页 |
·氨基酸序列的比较分析 | 第34-35页 |
·重组转移载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
·重组穿梭载体的构建及鉴定 | 第36页 |
·转染后细胞的形态学变化 | 第36-37页 |
·表达蛋白的分析及鉴定 | 第37-38页 |
·表达蛋白的 SDS-PAGE分析 | 第37页 |
·表达蛋白的 Western-blot检测结果 | 第37-38页 |
·表达蛋白的血凝试验检测结果 | 第38页 |
·表达蛋白的血凝抑制试验检测结果 | 第38页 |
·疫苗的制备 | 第38-40页 |
·总蛋白的浓度测定 | 第38-39页 |
·目的蛋白的定量 | 第39-40页 |
·蛋白的乳化 | 第40页 |
·免疫后抗体消长情况 | 第40-41页 |
·病毒中和试验 | 第41-42页 |
·病毒滴定 | 第41页 |
·中和试验 | 第41-42页 |
·疫苗的免疫保护情况 | 第42-44页 |
·攻毒保护试验 | 第42页 |
·排毒情况 | 第42-43页 |
·排毒量的滴定 | 第43-44页 |
第四章 讨论 | 第44-47页 |
第五章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54-55页 |
附录 | 第55-58页 |