摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-24页 |
·根瘤菌的竞争结瘤研究进展 | 第9-13页 |
·土壤环境因素 | 第9-11页 |
·宿主植物 | 第11页 |
·根瘤菌自身的竞争结瘤能力 | 第11-13页 |
·微生物生态学的研究技术 | 第13-23页 |
·荧光定位杂交 | 第14页 |
·BIOLOG(群落水平底物利用图谱) | 第14-15页 |
·磷脂脂肪酸(PLFA)分析方法 | 第15-16页 |
·基于PCR的研究方法 | 第16-23页 |
·本工作的研究目的 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-40页 |
·材料 | 第24页 |
·菌种保存 | 第24-25页 |
·培养基及生长条件 | 第25-26页 |
·抗生素 | 第26-27页 |
·溶液、缓冲液和试剂 | 第27-28页 |
·质粒DNA的制备 | 第28-30页 |
·质粒DNA的纯化、定量与沉淀 | 第30-31页 |
·电泳 | 第31页 |
·试剂盒法回收DNA片段 | 第31-32页 |
·电转化感受态细胞的制备 | 第32页 |
·DNA的连接 | 第32-34页 |
·β-葡糖苷酸酶活性检测(β-glucuronidase,GUS) | 第34页 |
·供试菌株 | 第34页 |
·植物材料 | 第34页 |
·实验处理 | 第34页 |
·占瘤率检测 | 第34-35页 |
·土壤样品的取样方法 | 第35页 |
·土壤pH值测定:电位法 | 第35页 |
·土壤有机质:重铬酸钾容量法-外加热法 | 第35页 |
·土壤水分测定 | 第35页 |
·碱解氮的测定——碱解扩散法 | 第35页 |
·土壤速效磷的测定——0.5mol/LHaHCO_3法 | 第35-36页 |
·土壤速效钾的测定——NH_4OAc浸提,火焰光度法 | 第36页 |
·土壤样品细菌、放线菌和真菌培养计数 | 第36页 |
·土壤总DNA的提取 | 第36-37页 |
·PCR扩增 | 第37页 |
·DGGE凝胶电泳溶液的制备: | 第37-38页 |
·DGGE电泳凝胶的制备 | 第38页 |
·DGGE凝胶的染色 | 第38页 |
·DGGE凝胶的分析方法 | 第38-39页 |
·细菌遗传多样性的统计学分析 | 第39页 |
·用"压碎与浸泡法"从DGGE凝胶上回收目的条带 | 第39-40页 |
第三章 GXHN100与HN01田间试验结瘤及竞争结瘤能力的研究 | 第40-42页 |
·引言 | 第40页 |
·GXHN100与HN01田间试验结瘤及竞争结瘤能力的研究 | 第40-41页 |
·竞争结瘤 | 第40-41页 |
·共生固氮效应 | 第41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第四章 接种根瘤菌对大豆根系土壤微生态效应的研究 | 第42-55页 |
·引言 | 第42页 |
·不同取样时间大豆根系微生物数量变化 | 第42-44页 |
·不同取样时间大豆根系细菌数量变化 | 第42-43页 |
·不同取样时间大豆根系放线菌数量变化 | 第43-44页 |
·不同取样时间大豆根系真菌数量变化 | 第44页 |
·变性梯度凝胶电泳(DGGE)研究接种根瘤菌到大豆根系土壤的微生态效应 | 第44-49页 |
·土壤样品总DNA的提取 | 第44-45页 |
·16SrDNA可变区V3区片断的PCR扩增结果 | 第45页 |
·变性梯度凝胶电泳DGGE分析 | 第45-49页 |
·16SrDNA文库的构建与分析 | 第49-53页 |
·16SrDNA PCR扩增结果 | 第49页 |
·PCR产物的T/A克隆 | 第49-50页 |
·16SrDNA文库克隆筛选 | 第50-53页 |
·小结 | 第53-55页 |
第五章 总结与讨论 | 第55-58页 |
·研究总结 | 第55页 |
·讨论 | 第55-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
附录 | 第67-71页 |
致谢 | 第71页 |