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接种根瘤菌HN01及其突变株GXHN100对大豆根系结瘤及微生物生态的影响

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 前言第9-24页
   ·根瘤菌的竞争结瘤研究进展第9-13页
     ·土壤环境因素第9-11页
     ·宿主植物第11页
     ·根瘤菌自身的竞争结瘤能力第11-13页
   ·微生物生态学的研究技术第13-23页
     ·荧光定位杂交第14页
     ·BIOLOG(群落水平底物利用图谱)第14-15页
     ·磷脂脂肪酸(PLFA)分析方法第15-16页
     ·基于PCR的研究方法第16-23页
   ·本工作的研究目的第23-24页
第二章 材料与方法第24-40页
   ·材料第24页
   ·菌种保存第24-25页
   ·培养基及生长条件第25-26页
   ·抗生素第26-27页
   ·溶液、缓冲液和试剂第27-28页
   ·质粒DNA的制备第28-30页
   ·质粒DNA的纯化、定量与沉淀第30-31页
   ·电泳第31页
   ·试剂盒法回收DNA片段第31-32页
   ·电转化感受态细胞的制备第32页
   ·DNA的连接第32-34页
   ·β-葡糖苷酸酶活性检测(β-glucuronidase,GUS)第34页
   ·供试菌株第34页
   ·植物材料第34页
   ·实验处理第34页
   ·占瘤率检测第34-35页
   ·土壤样品的取样方法第35页
   ·土壤pH值测定:电位法第35页
   ·土壤有机质:重铬酸钾容量法-外加热法第35页
   ·土壤水分测定第35页
   ·碱解氮的测定——碱解扩散法第35页
   ·土壤速效磷的测定——0.5mol/LHaHCO_3法第35-36页
   ·土壤速效钾的测定——NH_4OAc浸提,火焰光度法第36页
   ·土壤样品细菌、放线菌和真菌培养计数第36页
   ·土壤总DNA的提取第36-37页
   ·PCR扩增第37页
   ·DGGE凝胶电泳溶液的制备:第37-38页
   ·DGGE电泳凝胶的制备第38页
   ·DGGE凝胶的染色第38页
   ·DGGE凝胶的分析方法第38-39页
   ·细菌遗传多样性的统计学分析第39页
   ·用"压碎与浸泡法"从DGGE凝胶上回收目的条带第39-40页
第三章 GXHN100与HN01田间试验结瘤及竞争结瘤能力的研究第40-42页
   ·引言第40页
   ·GXHN100与HN01田间试验结瘤及竞争结瘤能力的研究第40-41页
     ·竞争结瘤第40-41页
     ·共生固氮效应第41页
   ·小结第41-42页
第四章 接种根瘤菌对大豆根系土壤微生态效应的研究第42-55页
   ·引言第42页
   ·不同取样时间大豆根系微生物数量变化第42-44页
     ·不同取样时间大豆根系细菌数量变化第42-43页
     ·不同取样时间大豆根系放线菌数量变化第43-44页
     ·不同取样时间大豆根系真菌数量变化第44页
   ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)研究接种根瘤菌到大豆根系土壤的微生态效应第44-49页
     ·土壤样品总DNA的提取第44-45页
     ·16SrDNA可变区V3区片断的PCR扩增结果第45页
     ·变性梯度凝胶电泳DGGE分析第45-49页
   ·16SrDNA文库的构建与分析第49-53页
     ·16SrDNA PCR扩增结果第49页
     ·PCR产物的T/A克隆第49-50页
     ·16SrDNA文库克隆筛选第50-53页
   ·小结第53-55页
第五章 总结与讨论第55-58页
   ·研究总结第55页
   ·讨论第55-58页
参考文献第58-67页
附录第67-71页
致谢第71页

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