中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-40页 |
第一章 植物抗寒、基因克隆及香蕉抗寒研究进展 | 第13-40页 |
·植物的抗寒性 | 第13-15页 |
·冷冻伤害及低温驯化植物的生理生化变化 | 第13-14页 |
·植物的低温胁迫响应 | 第14-15页 |
·植物的抗冻基因及其表达产物功能 | 第15-16页 |
·抗冻基因的表达调控 | 第16-19页 |
·低温信号的转导 | 第17-18页 |
·CBF/DREB1 转录活化因子调节抗冻基因的表达 | 第18-19页 |
·诱导抗冻基因充分表达的条件 | 第19-22页 |
·温度条件 | 第19-20页 |
·光照条件 | 第20页 |
·水分条件 | 第20-21页 |
·植物激素 | 第21-22页 |
·差异表达基因分离技术及其应用 | 第22-29页 |
·mRNA 差异显示 | 第23-24页 |
·cDNA 代表性差异分析 | 第24页 |
·抑制性消减杂交 | 第24-26页 |
·DNA 芯片 | 第26页 |
·cDNA-AFLP | 第26-27页 |
·ADGE | 第27-29页 |
·香蕉抗寒研究进展 | 第29-37页 |
·香蕉抗寒力评价指标 | 第30-32页 |
·香蕉寒害产生的机理 | 第32-34页 |
·香蕉抗寒相关基因的克隆与表达 | 第34-35页 |
·抗寒防寒栽培技术 | 第35页 |
·问题与展望 | 第35-37页 |
·研究意义 | 第37-38页 |
·研究内容与范围 | 第38-39页 |
·脱落酸及油菜素内酯对香蕉幼苗抗寒性的影响 | 第38页 |
·ABA 和BR 对香蕉幼苗形态学细胞组织学的影响 | 第38页 |
·ADGE 技术研究香蕉幼苗冷胁迫的分子机理 | 第38-39页 |
·香蕉 1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc) 的克隆,生物信息学分析及表达 | 第39页 |
·香蕉 1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc) 的植物表达载体的构建及烟草的转化 | 第39页 |
·本研究技术路线 | 第39-40页 |
第二部分 正文部分 | 第40-115页 |
第二章 脱落酸(ABA)及油菜素内酯(BR)对香蕉幼苗抗寒性的影响 | 第40-51页 |
·材料与方法 | 第40-43页 |
·材料 | 第40页 |
·处理方法 | 第40页 |
·生理指标测定 | 第40-43页 |
·结果与分析 | 第43-49页 |
·脱落酸(ABA)对香蕉幼苗抗寒性的影响 | 第43-46页 |
·油菜素内酯(BR)对香蕉幼苗抗寒性的影响 | 第46-49页 |
·结论 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第三章 ABA 和 BR 对香蕉幼苗形态学及细胞组织学的影响 | 第51-60页 |
·外部形态学观察及冷害分级 | 第51-52页 |
·组织切片 | 第52-55页 |
·材料 | 第52页 |
·方法 | 第52-55页 |
·结果与分析 | 第55-58页 |
·脱落酸(ABA)对低温胁迫下香蕉幼苗植株形态变化的影响 | 第55页 |
·脱落酸(ABA)对低温胁迫下香蕉幼苗功能叶形态变化的影响 | 第55-56页 |
·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗外部形态变化的影响 | 第56-57页 |
·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗功能叶形态变化的影响 | 第57页 |
·香蕉叶片组织与细胞结构 | 第57页 |
·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗叶片解剖结构的影响 | 第57-58页 |
·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗叶片组织细胞结构的影响 | 第58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第四章 ADGE 技术研究香蕉幼苗冷胁迫的分子机理 | 第60-79页 |
·材料和试剂 | 第60-63页 |
·材料 | 第60页 |
·试剂 | 第60页 |
·溶液配制 | 第60-62页 |
·主要仪器 | 第62-63页 |
·实验方法 | 第63-70页 |
·ADGE 引物设计 | 第63页 |
·接头设计和合成 | 第63页 |
·植物总RNA 的提取与纯化 | 第63-64页 |
·mRNA 的纯化 | 第64-65页 |
·ADGE 分析 | 第65-68页 |
·PCR 产物的回收 | 第68页 |
·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第68-69页 |
·待克隆片段与T-载体的连接及转化E. coli DH5α感受态细胞 | 第69页 |
·重组克隆的鉴定 | 第69-70页 |
·DNA 测序及同源序列的检索与比较 | 第70页 |
·实验结果 | 第70-77页 |
·总RNA 的提取 | 第70-71页 |
·m RNA 的提纯 | 第71页 |
·TaqI 酶消化 | 第71-72页 |
·PCR 扩增 | 第72-73页 |
·部分阳性克隆的酶切鉴定 | 第73页 |
·差异片断的序列分析 | 第73-77页 |
·讨论 | 第77-79页 |
第五章 香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基 因(rbcS-mc)的克隆,生物信息学分析及表达 | 第79-106页 |
·材料和试剂 | 第79-80页 |
·材料 | 第79页 |
·试剂 | 第79-80页 |
·主要仪器 | 第80页 |
·实验方法 | 第80-87页 |
·香蕉植株总RNA 的提取 | 第80页 |
·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc)的5'端扩增 | 第80-83页 |
·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc)的3'端扩增 | 第83-84页 |
·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)全长cDNA 的克隆 | 第84-85页 |
·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)的生物信息学分析 | 第85-86页 |
·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)的RT-PCR 表达分析 | 第86-87页 |
·结果与分析 | 第87-104页 |
·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)的cDNA 序列 | 第87-90页 |
·香蕉基因 rbcS-mc 核苷酸序列分析 | 第90-93页 |
·香蕉 rbcS-mc 蛋白的氨基酸序列分析 | 第93-95页 |
·香蕉rbcS-mc 基因编码蛋白的结构分析 | 第95-100页 |
·香蕉rbcS-mc 蛋白的二级结构预测 | 第100页 |
·香蕉rbcS-mc 蛋白的高级结构预测 | 第100-101页 |
·rbcS-mc与其它植物rbcS家族的蛋白质序列系统进化树分析 | 第101-103页 |
·香蕉rbcS-mc 基因在香蕉不同组织部位的RT-PCR 表达 | 第103-104页 |
·讨论 | 第104-106页 |
第六章 香蕉 1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc)的植物表达载体的构建及烟草的转化 | 第106-115页 |
·材料与试剂 | 第106-107页 |
·植物材料 | 第106页 |
·菌种与质粒 | 第106页 |
·主要试剂 | 第106页 |
·主要仪器 | 第106-107页 |
·常用缓冲液和试剂的成分及配制 | 第107页 |
·实验方法 | 第107-111页 |
·香蕉rbcS-mc 基因完整ORF 框的引物设计 | 第107-108页 |
·香蕉rbcS-mc 基因完整 ORF 框的 PCR 扩增 | 第108页 |
·植物表达载体的构建 | 第108页 |
·其它克隆操作 | 第108-109页 |
·植物转化 | 第109-111页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第111页 |
·实验结果 | 第111-114页 |
·植物表达载体pBrbcS 的构建 | 第111-112页 |
·重组农杆菌工程菌株的获得及鉴定 | 第112页 |
·转基因烟草的再生 | 第112-113页 |
·转基因烟草植株的PCR 检测 | 第113-114页 |
·讨论 | 第114-115页 |
结论 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-127页 |
附录1 | 第127-132页 |
附录2 | 第132-134页 |
致谢 | 第134页 |