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低温胁迫对香蕉幼苗生理特性的影响及冷诱导相关基因的分离

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
第一部分 文献综述第13-40页
 第一章 植物抗寒、基因克隆及香蕉抗寒研究进展第13-40页
   ·植物的抗寒性第13-15页
     ·冷冻伤害及低温驯化植物的生理生化变化第13-14页
     ·植物的低温胁迫响应第14-15页
   ·植物的抗冻基因及其表达产物功能第15-16页
   ·抗冻基因的表达调控第16-19页
     ·低温信号的转导第17-18页
     ·CBF/DREB1 转录活化因子调节抗冻基因的表达第18-19页
   ·诱导抗冻基因充分表达的条件第19-22页
     ·温度条件第19-20页
     ·光照条件第20页
     ·水分条件第20-21页
     ·植物激素第21-22页
   ·差异表达基因分离技术及其应用第22-29页
     ·mRNA 差异显示第23-24页
     ·cDNA 代表性差异分析第24页
     ·抑制性消减杂交第24-26页
     ·DNA 芯片第26页
     ·cDNA-AFLP第26-27页
     ·ADGE第27-29页
   ·香蕉抗寒研究进展第29-37页
     ·香蕉抗寒力评价指标第30-32页
     ·香蕉寒害产生的机理第32-34页
     ·香蕉抗寒相关基因的克隆与表达第34-35页
     ·抗寒防寒栽培技术第35页
     ·问题与展望第35-37页
   ·研究意义第37-38页
   ·研究内容与范围第38-39页
     ·脱落酸及油菜素内酯对香蕉幼苗抗寒性的影响第38页
     ·ABA 和BR 对香蕉幼苗形态学细胞组织学的影响第38页
     ·ADGE 技术研究香蕉幼苗冷胁迫的分子机理第38-39页
     ·香蕉 1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc) 的克隆,生物信息学分析及表达第39页
     ·香蕉 1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc) 的植物表达载体的构建及烟草的转化第39页
   ·本研究技术路线第39-40页
第二部分 正文部分第40-115页
 第二章 脱落酸(ABA)及油菜素内酯(BR)对香蕉幼苗抗寒性的影响第40-51页
   ·材料与方法第40-43页
     ·材料第40页
     ·处理方法第40页
     ·生理指标测定第40-43页
   ·结果与分析第43-49页
     ·脱落酸(ABA)对香蕉幼苗抗寒性的影响第43-46页
     ·油菜素内酯(BR)对香蕉幼苗抗寒性的影响第46-49页
   ·结论第49-50页
   ·讨论第50-51页
 第三章 ABA 和 BR 对香蕉幼苗形态学及细胞组织学的影响第51-60页
   ·外部形态学观察及冷害分级第51-52页
   ·组织切片第52-55页
     ·材料第52页
     ·方法第52-55页
   ·结果与分析第55-58页
     ·脱落酸(ABA)对低温胁迫下香蕉幼苗植株形态变化的影响第55页
     ·脱落酸(ABA)对低温胁迫下香蕉幼苗功能叶形态变化的影响第55-56页
     ·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗外部形态变化的影响第56-57页
     ·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗功能叶形态变化的影响第57页
     ·香蕉叶片组织与细胞结构第57页
     ·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗叶片解剖结构的影响第57-58页
     ·油菜素内酯(BR)对低温胁迫下香蕉幼苗叶片组织细胞结构的影响第58页
   ·讨论第58-60页
 第四章 ADGE 技术研究香蕉幼苗冷胁迫的分子机理第60-79页
   ·材料和试剂第60-63页
     ·材料第60页
     ·试剂第60页
     ·溶液配制第60-62页
     ·主要仪器第62-63页
   ·实验方法第63-70页
     ·ADGE 引物设计第63页
     ·接头设计和合成第63页
     ·植物总RNA 的提取与纯化第63-64页
     ·mRNA 的纯化第64-65页
     ·ADGE 分析第65-68页
     ·PCR 产物的回收第68页
     ·E.coli DH5α感受态细胞的制备第68-69页
     ·待克隆片段与T-载体的连接及转化E. coli DH5α感受态细胞第69页
     ·重组克隆的鉴定第69-70页
     ·DNA 测序及同源序列的检索与比较第70页
   ·实验结果第70-77页
     ·总RNA 的提取第70-71页
     ·m RNA 的提纯第71页
     ·TaqI 酶消化第71-72页
     ·PCR 扩增第72-73页
     ·部分阳性克隆的酶切鉴定第73页
     ·差异片断的序列分析第73-77页
   ·讨论第77-79页
 第五章 香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基 因(rbcS-mc)的克隆,生物信息学分析及表达第79-106页
   ·材料和试剂第79-80页
     ·材料第79页
     ·试剂第79-80页
     ·主要仪器第80页
   ·实验方法第80-87页
     ·香蕉植株总RNA 的提取第80页
     ·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc)的5'端扩增第80-83页
     ·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc)的3'端扩增第83-84页
     ·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)全长cDNA 的克隆第84-85页
     ·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)的生物信息学分析第85-86页
     ·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)的RT-PCR 表达分析第86-87页
   ·结果与分析第87-104页
     ·香蕉1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(rbcS-mc)的cDNA 序列第87-90页
     ·香蕉基因 rbcS-mc 核苷酸序列分析第90-93页
     ·香蕉 rbcS-mc 蛋白的氨基酸序列分析第93-95页
     ·香蕉rbcS-mc 基因编码蛋白的结构分析第95-100页
     ·香蕉rbcS-mc 蛋白的二级结构预测第100页
     ·香蕉rbcS-mc 蛋白的高级结构预测第100-101页
     ·rbcS-mc与其它植物rbcS家族的蛋白质序列系统进化树分析第101-103页
     ·香蕉rbcS-mc 基因在香蕉不同组织部位的RT-PCR 表达第103-104页
   ·讨论第104-106页
 第六章 香蕉 1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因(rbcS-mc)的植物表达载体的构建及烟草的转化第106-115页
   ·材料与试剂第106-107页
     ·植物材料第106页
     ·菌种与质粒第106页
     ·主要试剂第106页
     ·主要仪器第106-107页
     ·常用缓冲液和试剂的成分及配制第107页
   ·实验方法第107-111页
     ·香蕉rbcS-mc 基因完整ORF 框的引物设计第107-108页
     ·香蕉rbcS-mc 基因完整 ORF 框的 PCR 扩增第108页
     ·植物表达载体的构建第108页
     ·其它克隆操作第108-109页
     ·植物转化第109-111页
     ·转基因植株的PCR 检测第111页
   ·实验结果第111-114页
     ·植物表达载体pBrbcS 的构建第111-112页
     ·重组农杆菌工程菌株的获得及鉴定第112页
     ·转基因烟草的再生第112-113页
     ·转基因烟草植株的PCR 检测第113-114页
   ·讨论第114-115页
结论第115-117页
参考文献第117-127页
附录1第127-132页
附录2第132-134页
致谢第134页

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