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拟南芥生育酚环化酶基因(VTE1)遗传转化和转基因烟草抗性的研究

提要第1-8页
第一章 绪论第8-21页
 1 研究背景第8-9页
 2 维生素E的研究进展第9-11页
 3 维生素E的基本结构与种类第11-12页
 4 维生素E的作用第12-15页
   ·维生素E的抗氧化作用第12页
   ·维生素E的光保护作用第12-14页
   ·维生素E在细胞内信号传导上的作用第14-15页
 5 维生素E代谢的基本途径第15-19页
   ·VE生物合成的基本途径第15-16页
   ·维生素E合成代谢中的关键酶基因第16-19页
 6 维生素E代谢工程第19-20页
 7 目的及意义第20-21页
   ·对提高烟草维生素E含量的效应第20页
   ·对植物抗逆境胁迫的效应第20-21页
第二章 材料与方法第21-37页
 1 实验材料第21页
   ·植物材料第21页
   ·菌株与质粒第21页
 2 实验方法第21-37页
   ·正义表达载体的获得第21-22页
   ·反义表达载体构建第22-27页
     ·细菌培养第22-23页
     ·碱裂解法(alkaline lysis)提取质粒第23页
     ·PCR引物设计第23-24页
     ·PCR反应体系第24页
     ·PCR反应程序第24页
     ·PCR产物回收与纯化第24-25页
     ·pBINAR载体及VTE1基因PCR扩增产物的分步酶切第25页
     ·酶切产物回收与纯化第25页
     ·VTE1基因与载体pBINAR连接第25页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备与转化第25-26页
     ·三亲交配转化第26-27页
   ·烟草遗传转化及转基因烟草的获得第27-28页
     ·烟草转化基本培养基第27页
     ·烟草转化(叶盘法)第27-28页
     ·转基因烟草移栽第28页
   ·转基因烟草分子检测第28-33页
     ·CTAB法(cetyltriethylammonnium bromide)提取植物基因组DNA第28-29页
     ·转基因烟草PCR检测第29页
     ·转基因烟草PCR-Southern检测第29-32页
     ·转基因植株RT-PCR检测第32-33页
   ·转基因植株表型分析第33-34页
   ·转基因烟草植株对胁迫耐受性的鉴定第34-37页
     ·材料处理第34页
     ·VE含量测定第34页
     ·脯氨酸含量测定第34-35页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第35页
     ·过氧化物酶(POD)活性测定第35-36页
     ·丙二醛(MDA)含量测定第36-37页
第三章 结果与分析第37-48页
 1 转基因烟草植株的获得第37页
 2 转基因烟草的分子检测第37-40页
   ·转基因烟草的PCR检测第37-38页
   ·转基因烟草的PCR-Southern杂交检测第38-39页
   ·转基因烟草植株RT-PCR检测第39-40页
 3 转基因与非转基因烟草表型分析第40页
 4 转基因与非转基因烟草VE含量的测定第40-41页
 5 转基因烟草耐受性分析第41-48页
   ·转基因烟草的耐盐性分析第41-44页
     ·盐胁迫下转基因烟草的表型第41-42页
     ·盐胁迫下转基因烟草VE含量测定第42-43页
     ·盐胁迫下转基因烟草脯氨酸含量测定第43-44页
   ·转基因烟草的耐强光分析第44-48页
     ·强光胁迫下转基因烟草VE含量测定第44-45页
     ·强光胁迫下转基因烟草SOD活性测定第45-46页
     ·强光胁迫下转基因烟草POD活性测定第46页
     ·强光胁迫下转基因烟草和野生型烟草MDA含量测定第46-48页
第四章 讨论第48-57页
 1 野生型与转基因烟草的表型分析第48页
 2 野生型与转基因烟草VE含量比较第48页
 3 野生型与转基因烟草盐胁迫比较第48-49页
 4 强光胁迫下野生型与转基因烟草VE含量比较第49-51页
 5 强光胁迫下超氧化物歧化酶(SOD)活性比较第51-52页
 6 强光胁迫下过氧化物酶(POD)活性比较第52-53页
 7 强光胁迫下丙二醛(MDA)含量比较第53-56页
 8 结论第56-57页
参考文献第57-69页
在学期间发表文章第69-70页
摘要第70-75页
Abstract第75-79页
致谢第79页

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