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应用RNAi技术抑制鸡传染性法氏囊病病毒复制的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-30页
   ·研究的目的和意义第11-12页
   ·文献综述第12-30页
     ·鸡传染性法氏囊病研究概况第12-19页
     ·RNAI研究进展第19-30页
2 材料与方法第30-39页
   ·细胞和病毒第30页
   ·主要材料和试剂第30-31页
     ·主要器材第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·主要分析软件第31页
   ·实验方法第31-39页
     ·抑制IBDV VP1、VP2、VP3蛋白表达的有效SIRNA的筛选与合成第31-33页
     ·PEGFP-VP2、PEGFP-VP3载体的构建第33-35页
     ·SIRNA的转染第35-36页
     ·RNAI效果的检测第36-39页
3 结果与分析第39-58页
   ·IBDV VP1蛋白特异的有效SIRNA序列的筛选第39-44页
     ·体外转录法合成VP1-SIRNA第39页
     ·VP1-SIRNA抑制IBDV病毒粒子的形成第39-40页
     ·荧光定量PCR标准品PMD18-T-B重组质粒的鉴定第40-41页
     ·VP1-SIRNA在RNA水平减少VP1蛋白的表达第41-44页
   ·IBDV VP2蛋白特异的有效SIRNA序列的筛选第44-48页
     ·体外转录法合成VP2-SIRNA第44-45页
     ·PEGFP-VP2重组质粒的鉴定第45页
     ·VP2-SIRNA抑制N-EGFP融合蛋白的表达第45-46页
     ·VP2-SIRNA抑制IBDV病毒粒子的形成第46-47页
     ·流式细胞仪检测VP2-SIRNA抑制N-EGFP阳性细胞第47-48页
   ·IBDV VP3蛋白特异的有效SIRNA序列的筛选第48-58页
     ·体外转录法合成VP3-SIRNA第48-49页
     ·PEGFP-VP3重组质粒的鉴定第49页
     ·VP3-SIRNA抑制N-EGFP融合蛋白的表达第49-50页
     ·VP3-SIRNA抑制IBDV病毒粒子的形成第50-51页
     ·流式细胞仪检测VP3-SIRNA抑制N-EGFP阳性细胞第51-53页
     ·VP3-SIRNA在RNA水平减少VP3蛋白的表达第53-58页
4 讨论第58-62页
   ·应用RNAI技术对IBDV研究的必要性第58-59页
   ·SIRNA的设计原则第59页
   ·RNAI的T7体外转录体系的建立及验证第59-61页
   ·转染的效率第61-62页
5 结论第62-63页
致谢第63-65页
参考文献第65-73页
附录第73-74页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第74页

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