中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-30页 |
·研究的目的和意义 | 第11-12页 |
·文献综述 | 第12-30页 |
·鸡传染性法氏囊病研究概况 | 第12-19页 |
·RNAI研究进展 | 第19-30页 |
2 材料与方法 | 第30-39页 |
·细胞和病毒 | 第30页 |
·主要材料和试剂 | 第30-31页 |
·主要器材 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·主要分析软件 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-39页 |
·抑制IBDV VP1、VP2、VP3蛋白表达的有效SIRNA的筛选与合成 | 第31-33页 |
·PEGFP-VP2、PEGFP-VP3载体的构建 | 第33-35页 |
·SIRNA的转染 | 第35-36页 |
·RNAI效果的检测 | 第36-39页 |
3 结果与分析 | 第39-58页 |
·IBDV VP1蛋白特异的有效SIRNA序列的筛选 | 第39-44页 |
·体外转录法合成VP1-SIRNA | 第39页 |
·VP1-SIRNA抑制IBDV病毒粒子的形成 | 第39-40页 |
·荧光定量PCR标准品PMD18-T-B重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
·VP1-SIRNA在RNA水平减少VP1蛋白的表达 | 第41-44页 |
·IBDV VP2蛋白特异的有效SIRNA序列的筛选 | 第44-48页 |
·体外转录法合成VP2-SIRNA | 第44-45页 |
·PEGFP-VP2重组质粒的鉴定 | 第45页 |
·VP2-SIRNA抑制N-EGFP融合蛋白的表达 | 第45-46页 |
·VP2-SIRNA抑制IBDV病毒粒子的形成 | 第46-47页 |
·流式细胞仪检测VP2-SIRNA抑制N-EGFP阳性细胞 | 第47-48页 |
·IBDV VP3蛋白特异的有效SIRNA序列的筛选 | 第48-58页 |
·体外转录法合成VP3-SIRNA | 第48-49页 |
·PEGFP-VP3重组质粒的鉴定 | 第49页 |
·VP3-SIRNA抑制N-EGFP融合蛋白的表达 | 第49-50页 |
·VP3-SIRNA抑制IBDV病毒粒子的形成 | 第50-51页 |
·流式细胞仪检测VP3-SIRNA抑制N-EGFP阳性细胞 | 第51-53页 |
·VP3-SIRNA在RNA水平减少VP3蛋白的表达 | 第53-58页 |
4 讨论 | 第58-62页 |
·应用RNAI技术对IBDV研究的必要性 | 第58-59页 |
·SIRNA的设计原则 | 第59页 |
·RNAI的T7体外转录体系的建立及验证 | 第59-61页 |
·转染的效率 | 第61-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
附录 | 第73-74页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第74页 |