摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-29页 |
1 ETEC F4受体国内外研究现状 | 第12-15页 |
·F4受体的遗传机制 | 第12-13页 |
·受体的生化特征 | 第13-14页 |
·、影响受体定型的因素 | 第14-15页 |
2.基因差异表达研究方法 | 第15-20页 |
·差异显示PCR法 | 第16-18页 |
·消减杂交法 | 第18-20页 |
·应用 | 第20页 |
3 畜禽抗病育种研究进展 | 第20-25页 |
·抗病基因的遗传基础 | 第21-22页 |
·抗病育种的途径 | 第22-25页 |
·开展抗病育种的困难和存在问题 | 第25页 |
·展望 | 第25页 |
4 SNP及其应用 | 第25-27页 |
5 研究目标与技术路线 | 第27-29页 |
第二章 二个猪种F4受体黏附差异研究 | 第29-35页 |
1 材料与方法 | 第29-30页 |
·材料 | 第29页 |
·方法 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-33页 |
·ETEC细菌培养效果 | 第30-31页 |
·黏附结果 | 第31页 |
·猪种间黏附差异比较 | 第31-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
·猪种间黏附差异比较 | 第33页 |
·检测方法 | 第33-34页 |
4 小结 | 第34-35页 |
第三章 差异片段的获得 | 第35-51页 |
1 材料与方法 | 第35-43页 |
·材料 | 第35-37页 |
·方法 | 第37-43页 |
·总RNA的提取与相关检测 | 第37-39页 |
·总RNA的DNase Ⅰ消化 | 第39-40页 |
·cDNA合成 | 第40-41页 |
·δ差异显示PCR | 第41-42页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染显示 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-48页 |
·总RNA的检测 | 第43-46页 |
·浓度与纯度检测 | 第43-45页 |
·完整性检测 | 第45-46页 |
·δ差异显示结果 | 第46-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
·总RNA提取 | 第48-49页 |
·差异片断 | 第49页 |
·δ差异显示技术 | 第49-50页 |
4 小结 | 第50-51页 |
第四章 差异片段的回收、再扩增纯化与Northern blot | 第51-61页 |
1 材料与方法 | 第51-58页 |
·材料 | 第51-52页 |
·凝胶显示差异片段 | 第51页 |
·实验试剂 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-58页 |
·差异片段的回收 | 第52页 |
·差异片段的再扩增 | 第52-53页 |
·再扩增PCR产物的纯化与回收 | 第53-55页 |
·Northern blot | 第55-58页 |
2 结果与分析 | 第58-59页 |
·再扩增结果 | 第58页 |
·Northern杂交 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
·差异片断的选择 | 第59页 |
·差异片段的回收 | 第59-60页 |
·Northern blot | 第60页 |
4 小结 | 第60-61页 |
第五章 阳性差异片段的克隆、测序与序列分析 | 第61-77页 |
1 材料与方法 | 第61-67页 |
·材料 | 第61-63页 |
·方法 | 第63-67页 |
·克隆 | 第63-66页 |
·测序 | 第66页 |
·序列分析 | 第66-67页 |
2 结果与分析 | 第67-72页 |
·克隆 | 第67页 |
·蓝白筛选 | 第67页 |
·质粒DNA克隆片段的鉴定 | 第67页 |
·测序结果 | 第67-72页 |
·EST提交 | 第72页 |
3.讨论 | 第72-75页 |
·克隆相关问题 | 第72-73页 |
·用BLAST进行同源比对 | 第73-74页 |
·相关基因分析 | 第74-75页 |
4 小结 | 第75-77页 |
第六章 猪相关基因SNP筛选 | 第77-87页 |
1 材料与方法 | 第77-79页 |
·试验样品 | 第77页 |
·基因组DNA的提取 | 第77-78页 |
·各引物的设计 | 第78-79页 |
·PCR扩增 | 第79页 |
·扩增产物的回收、纯化 | 第79页 |
·测序 | 第79页 |
·SNP筛选 | 第79页 |
2 结果与分析 | 第79-83页 |
·引物扩增结果 | 第80-81页 |
·测序结果及同源性比较 | 第81-83页 |
·ASIP基因扩增产物SNP分析结果 | 第81-82页 |
·PMCA 1基因扩增产物SNP分析结果 | 第82页 |
·GPI 1基因扩增产物SNP分析结果 | 第82-83页 |
3 讨论 | 第83-86页 |
·引物设计与PCR反应优化 | 第83-84页 |
·SNP及其筛选 | 第84-86页 |
5 小结 | 第86-87页 |
第七章 结论 | 第87-90页 |
参考文献 | 第90-100页 |
附录 | 第100页 |
附录A:部分克隆片断序列峰型图 | 第100-106页 |
附录B:登录的EST结果 | 第106-111页 |
附录C 英文缩略词中英文全称 | 第111-112页 |
附录D:研究中常用试剂的配法 | 第112-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
作者简历 | 第114-115页 |