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白腐菌漆酶的制备、催化聚合的研究及漆酶基因克隆的初探

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
第一章 绪论第15-29页
   ·真菌漆酶的生产第15-18页
     ·白腐菌的生物学背景第15-16页
     ·白腐菌Trametes hirsuta BYBF第16页
     ·白腐菌漆酶的的发酵调控第16-17页
     ·影响漆酶生产的因素第17-18页
   ·白腐菌漆酶的特性第18-22页
     ·白腐菌漆酶的理化性质第18-20页
     ·漆酶的活性中心结构第20-21页
     ·催化机制及特性第21-22页
     ·白腐菌漆酶的分子生物学第22页
   ·漆酶的应用第22-24页
     ·降解环境中有机污染物第23页
     ·白腐菌应用于生物造纸第23页
     ·食品行业第23-24页
     ·有机合成第24页
     ·其他方面第24页
   ·白腐菌漆酶在制浆造纸废水处理中的应用第24-26页
     ·白腐菌漆酶用于漂白废水第25页
     ·白腐菌漆酶用于造纸废水脱色第25页
     ·白腐菌生物强化技术处理造纸废水第25-26页
   ·本论文研究的目的和主要内容第26-29页
第二章 白腐菌 Trametes hirsuta BYBF 在三相流化床生物反应器产漆酶的研究第29-37页
   ·材料和方法第29-32页
     ·菌种和实验试剂第29-30页
     ·主要实验器材第30页
     ·培养基第30页
     ·培养方法第30页
     ·三相流化床生物反应器第30-31页
     ·培养方式第31页
     ·测定菌丝体生物量第31-32页
     ·粗酶液的提取第32页
     ·酶活测定方法第32页
   ·结果和讨论第32-36页
     ·摇瓶种子制备第32-33页
     ·接种量对产酶的影响第33-34页
     ·通气量对产酶的影响第34-35页
     ·重复分批培养产酶第35-36页
   ·本章小结第36-37页
第三章 漆酶的分离纯化及其部分酶学性质的研究第37-49页
   ·材料和方法第37-41页
     ·菌种第37页
     ·实验药品第37页
     ·实验仪器第37-38页
     ·白腐菌发酵产漆酶第38页
     ·漆酶酶活的测定第38页
     ·漆酶蛋白含量的测定第38-39页
     ·漆酶的分离和纯化第39-40页
     ·分子量的测定第40页
     ·分离纯化计算公式第40页
     ·漆酶动力学参数测定第40页
     ·漆酶部分酶学性质的分析第40-41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·漆酶的分离纯化第41-43页
     ·分子量的测定第43-44页
     ·pH 对酶活性的影响和pH 稳定性第44-45页
     ·漆酶的最适温度和热稳定性第45-46页
     ·漆酶的动力学参数第46-47页
     ·部分无机离子对漆酶活性的影响第47-48页
   ·本章小结第48-49页
第四章 白腐菌 Trametes hirsuta产漆酶用于含氯酚类废水的研究第49-63页
   ·材料和方法第50-52页
     ·菌种第50页
     ·实验试剂第50页
     ·实验仪器第50页
     ·粗漆酶的制备第50页
     ·酶活测定方法第50页
     ·漆酶对2,4-DCP 的催化实验第50页
     ·漆酶的分离纯化第50页
     ·2,4-DCP 浓度的测定及去除率的计算第50-51页
     ·酶促反应动力学分析第51页
     ·产物分子量的测定第51-52页
     ·产物的红外光谱图第52页
     ·催化聚合产物的13C-NMR 谱图第52页
   ·结果与分析第52-60页
     ·反应时间对2,4-DCP 去除率的影响第52-53页
     ·反应温度对2,4-DCP 去除率的影响第53-54页
     ·pH 值对2,4-DCP 去除率的影响第54页
     ·底物初始浓度对2,4-DCP 去除率的影响第54-55页
     ·粗漆酶液与纯化漆酶对2,4-DCP 去除作用的比较第55页
     ·酶促反应动力学分析第55页
     ·聚合产物相对分子量的测定第55-57页
     ·聚合产物的红外光谱图第57-59页
     ·聚合产物13C-NMR 谱图分析第59-60页
     ·漆酶催化聚合2,4-DCP 的机理分析第60页
   ·本章小结第60-63页
第五章 漆酶基因的克隆和序列分析第63-75页
   ·材料和方法第63-68页
     ·实验相关试剂第63页
     ·菌体的收集第63页
     ·CTAB 法提取基因组DNA第63-64页
     ·RNA 的提取第64页
     ·PCR 扩增第64-66页
     ·目的片段的回收第66-67页
     ·目的片段与载体连接第67页
     ·CaCl_2 法制备感受态大肠杆菌细胞第67-68页
     ·目的片段的转化及克隆鉴定第68页
     ·序列测定和同源性比较第68页
   ·结果与分析第68-73页
     ·DNA 的提取第68-69页
     ·提取RNA 的电泳检测第69-70页
     ·漆酶基因的克隆第70-71页
     ·漆酶基因序列的生物学分析第71-73页
   ·本章小结第73-75页
第六章 结论与展望第75-79页
   ·本研究的主要结论第75-77页
   ·本研究的创新之处第77页
   ·下一步的计划第77-79页
参考文献第79-89页
致谢第89-91页
攻读硕士学位期间发表的论文第91页

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