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重组MUC1融合蛋白的制备及检测MUC1双抗体夹心ELISA方法的建立

提要第1-5页
英文缩写词表第5-10页
第一章 文献回顾第10-21页
 1 MUC1 的特点第10-14页
   ·Mucin家族第10-12页
   ·MUC1 分布第12页
   ·MUC1 基因与MUC1 蛋白第12-13页
   ·MUC1 同种型第13-14页
 2 MUC1 生物学功能第14-18页
   ·MUC1 介导细胞间的相互作用第14页
   ·MUC1 在信号传导中的作用第14-16页
   ·MUC1 在肿瘤发生发展中的作用第16-17页
   ·MUC1 通过各种途径参与肿瘤侵袭和转移第17-18页
 3 外周血MUC1 的检测第18-21页
第二章 材料与方法第21-35页
 1 实验材料第21-22页
   ·细胞、质粒与菌株第21页
   ·酶、抗体及其它试剂第21页
   ·培养基第21页
   ·电泳试剂第21-22页
   ·Western blot 相关试剂第22页
   ·纯化蛋白试剂第22页
   ·免疫活性测定的相关试剂第22页
 2 实验方法第22-35页
   ·pGEX- MUC1 表达载体的构建第22-23页
   ·重组质粒pGEX- MUC1转化大肠杆菌BL21第23-24页
   ·重组克隆的筛选与鉴定第24页
   ·重组 MUC1 融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达第24-25页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第25-26页
   ·Western blot第26-27页
   ·重组人 MUC1 融合蛋白的纯化第27-28页
   ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化重组 MUC1 融合蛋白第28-29页
   ·动物免疫第29-30页
   ·ELISA 检测动物血清中抗MUC1 抗体效价第30-31页
   ·免疫血清的分离及抗MUC1 多克隆抗体的纯化第31-32页
   ·MUC1 蛋白双抗体夹心ELISA 检测方法的建立第32-33页
   ·双抗体夹心法检测乳腺癌患者血清中MUC1第33-35页
第三章 实验结果第35-45页
 1 pGEX- MUC1 表达载体的成功构建第35-36页
 2 重组MUC1-GST 融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达第36-37页
 3 重组人 MUC1 融合蛋白的鉴定第37-38页
 4 重组MUC1-GST 及MUC1-MBP 融合蛋白的纯化第38-41页
 5 重组人MUC1 融合蛋白免疫动物诱导产生抗MUC1 特异性多克隆抗体第41-42页
 6 成功建立MUC1 蛋白双抗体夹心ELISA 检测方法第42-43页
 7 双抗体夹心ELISA 方法检测乳腺癌患者血清中MUC1蛋白水平第43-45页
第四章 讨论第45-51页
 1 重组人MUC1-GST 和MUC1-MBP 融合蛋白的制备第45-46页
 2 兔抗人MUC1 多克隆抗体及大鼠抗人MUC1多克隆抗体的制备第46-48页
 3 建立双抗体夹心ELISA 试剂盒最佳条件的选择第48-50页
 4 双抗体夹心ELISA 检测结果的综合分析第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-60页
中文摘要第60-62页
Abstract第62-65页
致谢第65页

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