提要 | 第1-5页 |
英文缩写词表 | 第5-10页 |
第一章 文献回顾 | 第10-21页 |
1 MUC1 的特点 | 第10-14页 |
·Mucin家族 | 第10-12页 |
·MUC1 分布 | 第12页 |
·MUC1 基因与MUC1 蛋白 | 第12-13页 |
·MUC1 同种型 | 第13-14页 |
2 MUC1 生物学功能 | 第14-18页 |
·MUC1 介导细胞间的相互作用 | 第14页 |
·MUC1 在信号传导中的作用 | 第14-16页 |
·MUC1 在肿瘤发生发展中的作用 | 第16-17页 |
·MUC1 通过各种途径参与肿瘤侵袭和转移 | 第17-18页 |
3 外周血MUC1 的检测 | 第18-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-35页 |
1 实验材料 | 第21-22页 |
·细胞、质粒与菌株 | 第21页 |
·酶、抗体及其它试剂 | 第21页 |
·培养基 | 第21页 |
·电泳试剂 | 第21-22页 |
·Western blot 相关试剂 | 第22页 |
·纯化蛋白试剂 | 第22页 |
·免疫活性测定的相关试剂 | 第22页 |
2 实验方法 | 第22-35页 |
·pGEX- MUC1 表达载体的构建 | 第22-23页 |
·重组质粒pGEX- MUC1转化大肠杆菌BL21 | 第23-24页 |
·重组克隆的筛选与鉴定 | 第24页 |
·重组 MUC1 融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达 | 第24-25页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第25-26页 |
·Western blot | 第26-27页 |
·重组人 MUC1 融合蛋白的纯化 | 第27-28页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化重组 MUC1 融合蛋白 | 第28-29页 |
·动物免疫 | 第29-30页 |
·ELISA 检测动物血清中抗MUC1 抗体效价 | 第30-31页 |
·免疫血清的分离及抗MUC1 多克隆抗体的纯化 | 第31-32页 |
·MUC1 蛋白双抗体夹心ELISA 检测方法的建立 | 第32-33页 |
·双抗体夹心法检测乳腺癌患者血清中MUC1 | 第33-35页 |
第三章 实验结果 | 第35-45页 |
1 pGEX- MUC1 表达载体的成功构建 | 第35-36页 |
2 重组MUC1-GST 融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达 | 第36-37页 |
3 重组人 MUC1 融合蛋白的鉴定 | 第37-38页 |
4 重组MUC1-GST 及MUC1-MBP 融合蛋白的纯化 | 第38-41页 |
5 重组人MUC1 融合蛋白免疫动物诱导产生抗MUC1 特异性多克隆抗体 | 第41-42页 |
6 成功建立MUC1 蛋白双抗体夹心ELISA 检测方法 | 第42-43页 |
7 双抗体夹心ELISA 方法检测乳腺癌患者血清中MUC1蛋白水平 | 第43-45页 |
第四章 讨论 | 第45-51页 |
1 重组人MUC1-GST 和MUC1-MBP 融合蛋白的制备 | 第45-46页 |
2 兔抗人MUC1 多克隆抗体及大鼠抗人MUC1多克隆抗体的制备 | 第46-48页 |
3 建立双抗体夹心ELISA 试剂盒最佳条件的选择 | 第48-50页 |
4 双抗体夹心ELISA 检测结果的综合分析 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
中文摘要 | 第60-62页 |
Abstract | 第62-65页 |
致谢 | 第65页 |