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‘国光苹果红色芽变果实着色分子机理初步研究

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
1 引言第13-28页
   ·果树芽变的分子机理研究进展第13-16页
     ·反转录转座子的插入第14页
     ·DNA 甲基化状态的改变第14-15页
     ·基因结构的突变第15-16页
   ·花青苷的生物合成及其调控第16-25页
     ·植物花青苷的结构和种类第16-17页
     ·花青苷的性质及功能第17页
     ·花青苷的生物合成第17-19页
     ·光照对花青苷合成的影响第19-20页
     ·花青苷合成的调控第20-25页
       ·花青苷合成的酶及结构基因第20-24页
       ·调控花青苷合成的转录因子第24-25页
   ·本研究的目的意义第25-28页
2 材料与方法第28-37页
   ·实验材料第28-29页
     ·植物材料第28页
     ·菌株及载体第28页
     ·主要药品试剂、试剂盒及仪器设备第28-29页
     ·PCR 引物合成与测序第29页
   ·实验方法第29-37页
     ·植物基因组DNA 提取第29页
       ·CTAB 法提取植物基因组DNA第29页
       ·植物基因组质量检测第29页
     ·植物总RNA 提取第29-31页
       ·CTAB 法提取植物总RNA第30页
       ·RNA 含量和纯度检测第30-31页
     ·cDNA 第一链的合成第31页
     ·实时荧光定量PCR (RT-qPCR)第31-32页
     ·调节基因编码区及MdMYB1 基因组序列扩增第32页
     ·PCR 产物的回收第32-33页
     ·PCR 产物的克隆测序第33-34页
       ·重组载体的构建第33页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第33-34页
       ·重组载体转化感受态细胞第34页
       ·阳性克隆的筛选及测序第34页
     ·MdMYB1 基因组上、下游调控序列的扩增第34页
     ·基因组DNA 的亚硫酸氢盐测序分析第34-36页
       ·基因组DNA 的甲基化修饰第34-35页
       ·纯化亚硫酸盐修饰的DNA第35-36页
       ·甲基化PCR 扩增及序列测定第36页
     ·基因序列分析及数据统计方法第36-37页
3 结果与分析第37-49页
   ·DNA 和RNA 提取及质量检测第37页
   ·果实发育后期果皮类黄酮合成结构基因表达分析第37-40页
     ·花青苷合成结构基因表达分析第37-39页
     ·黄酮醇、单宁合成结构基因表达分析第39-40页
   ·花青苷合成相关调节基因cDNA 序列的扩增与表达分析第40-45页
     ·调节基因cDNA 序列的扩增及序列分析第40-43页
     ·调节基因表达分析第43-45页
   ·MdMYB1 基因组及上、下游调控序列扩增比对分析第45-47页
     ·MdMYB1 基因组序列的扩增及比对分析第45-46页
     ·MdMYB1 上、下游非编码序列的扩增及比对分析第46-47页
   ·MdMYB1 启动子区域甲基化状态检测第47-49页
4 讨论第49-52页
   ·‘国光’与其红色芽变花青苷合成结构基因表达第49-50页
   ·红色芽变结构基因表达协同上调的原因第50-51页
   ·红色芽变MdMYB1 表达上升的分子机理第51-52页
5 结论第52-53页
附录第53-57页
参考文献第57-71页
致谢第71-72页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第72-73页
硕士学位论文内容简介及自评第73页

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