| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 氨基酸及其缩写 | 第12-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-51页 |
| 第一章 抗菌肽研究进展 | 第13-33页 |
| 1 传统抗生素及其耐药性 | 第13-15页 |
| ·β-内酰胺类抗生素的耐药机制 | 第13-14页 |
| ·细菌耐药性的严峻形势 | 第14-15页 |
| 2 抗菌肽的特点 | 第15页 |
| 3 抗菌肽的分类 | 第15-20页 |
| ·根据来源分类 | 第15-17页 |
| ·根据结构分类 | 第17-19页 |
| ·根据生物活性分类 | 第19页 |
| ·根据所带电荷种类分类 | 第19-20页 |
| 4 抗菌肽的生物学活性及其与结构的关系 | 第20-22页 |
| ·抗菌肽的生物学活性 | 第21-22页 |
| ·抗菌肽结构与活性的关系 | 第22页 |
| 5 抗菌肽的作用机制 | 第22-24页 |
| ·a-螺旋抗菌肽的破膜机制 | 第22-23页 |
| ·具有β-折叠构型的抗菌肽的破膜机制 | 第23-24页 |
| ·对正常的真核细胞无作用的原因 | 第24页 |
| 6 抗菌肽的应用前景展望及存在的问题 | 第24-29页 |
| ·药用前景 | 第24-26页 |
| ·抗菌肽在转基因工程中的应用 | 第26-27页 |
| ·抗菌肽添加剂的研究应用 | 第27页 |
| ·抗菌肽开发应用中存在的问题 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-33页 |
| 第二章 猪小肠抗菌肽cecropin P1 | 第33-41页 |
| 1 哺乳动物抗菌肽的研究进展 | 第33-36页 |
| ·猪源抗菌肽 | 第33-34页 |
| ·牛、羊抗菌肽 | 第34-35页 |
| ·人抗菌肽 | 第35-36页 |
| 2 Cecropins类抗菌肽基因的分子生物学 | 第36-37页 |
| ·Cecropins类抗菌肽的基因结构 | 第36页 |
| ·抗菌肽前体及其加工过程 | 第36-37页 |
| 3 猪小肠cecropin P1研究进展 | 第37-38页 |
| ·cecropin P1的结构和理化性质 | 第37页 |
| ·cecropin P1的抗菌活性 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第三章 抗菌肽的基因工程表达策略 | 第41-51页 |
| 1 抗菌肽原核表达策略 | 第41-45页 |
| ·原核表达载体的类型 | 第42页 |
| ·外源基因在大肠杆菌中的表达 | 第42-44页 |
| ·抗菌肽基因在E. coli中的表达 | 第44-45页 |
| 2 抗菌肽的毕赤酵母表达策略 | 第45-49页 |
| ·酵母表达载体的特征 | 第45-46页 |
| ·巴斯德毕赤酵母高效表达外源基因的机制 | 第46-47页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达外源蛋白的优点 | 第47-48页 |
| ·抗菌肽基因在毕赤酵母中的分泌表达 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第二篇 实验部分 | 第51-78页 |
| 第四章 猪小肠抗菌肽Cecropin P1的密码子优化及其在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达 | 第51-61页 |
| 1 材料与方法 | 第51-55页 |
| ·质粒、受体菌和指示菌株 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·抗菌肽的基因设计与合成 | 第52页 |
| ·重组酵母表达载体的构建 | 第52页 |
| ·抗菌肽重组酵母菌整合 | 第52-54页 |
| ·酵母重组抗菌肽的诱导表达 | 第54-55页 |
| ·重组表达抗菌肽的Tricine-SDS-PAGE鉴定 | 第55页 |
| ·重组复合抗菌肽的含量测定 | 第55页 |
| ·重组抗菌肽抑菌活性的初步测定 | 第55页 |
| 2 结果 | 第55-57页 |
| ·抗菌肽基因设计与合成 | 第55页 |
| ·重组酵母表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·重组酵母转化子的PCR鉴定 | 第56页 |
| ·重组酵母的诱导表达及表达产物的检测 | 第56-57页 |
| ·重组抗菌肽抗菌活性的测定 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 第五章 重组抗菌肽的表达优化及表达产物的生物特性研究 | 第61-72页 |
| 1 材料与方法 | 第61-64页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·Cecropin P1重组酵母菌的优化表达 | 第62-63页 |
| ·重组抗菌肽表达产物的生物活性研究 | 第63-64页 |
| 2 结果 | 第64-68页 |
| ·cecropin P1表达优化结果 | 第64-65页 |
| ·重组抗菌肽表达产物的生物活性研究 | 第65-68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第六章 重组抗菌肽Cecropin P1对小鼠的保护试验 | 第72-78页 |
| 1 材料和方法 | 第72-73页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-73页 |
| 2 结果 | 第73-75页 |
| ·实验用菌最小致死量的测定结果 | 第73-74页 |
| ·重组抗菌肽体内保护的预实验结果 | 第74页 |
| ·重组抗菌肽对小鼠细菌感染的预防和治疗效果 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-78页 |
| 全文总结 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 附录 | 第82-88页 |
