| 目录 | 第1-7页 |
| CONTENTS | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 略语表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 游仆虫的特殊性 | 第14-17页 |
| ·游仆虫的核的二态性 | 第15-16页 |
| ·游仆虫密码子使用的特殊性 | 第16-17页 |
| ·游仆虫作为实验材料的优势 | 第17页 |
| 2 三核苷酸重复序列基因研究进展 | 第17-18页 |
| 3 本课题研究意义 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-24页 |
| 第二章 八肋游仆虫GARP基因的克隆与序列分析 | 第24-37页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·主要的酶及生化试剂 | 第24页 |
| ·寡聚核苷酸设计 | 第24-25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·主要实验仪器 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| ·八肋游仆虫大核DNA中GARP基因的扩增 | 第26-27页 |
| ·小核中GARP基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·转录活性检测 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-33页 |
| ·大核中GARP基因序列的克隆 | 第30-31页 |
| ·小核中GARP基因序列的克隆 | 第31-32页 |
| ·GARP基因的转录活性检测及分析 | 第32页 |
| ·GAFF基因的大、小核序列分析 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 第三章 八肋游仆虫GARP基因的突变、表达及鉴定 | 第37-54页 |
| 1 材料 | 第37-39页 |
| ·菌株和质粒 | 第37页 |
| ·主要的酶及生化试剂 | 第37-38页 |
| ·寡聚核苷酸设计 | 第38页 |
| ·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-45页 |
| ·GARP基因的突变 | 第39-42页 |
| ·His_6-GARP蛋白的表达 | 第42-45页 |
| ·Western blotting印迹 | 第45页 |
| ·(NH_4)_2SO_4盐析和等电点沉淀法 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-52页 |
| ·游仆虫GARP基因的突变 | 第45-46页 |
| ·游仆虫His_6-GARP蛋白的表达与对表达条件的优化 | 第46-50页 |
| ·融合蛋白His_6-GARP的Western Blotting分析 | 第50-51页 |
| ·(NH_4)_2SO_4盐析和等电点沉淀法结合沉淀目的蛋白His_6-GARP | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第四章 八肋游仆虫His_6-GARP蛋白的纯化及抗体的制备 | 第54-65页 |
| 1 材料 | 第54-56页 |
| ·实验动物及仪器 | 第54页 |
| ·主要生化试剂 | 第54页 |
| ·主要试剂的配制 | 第54-56页 |
| 2 方法 | 第56-60页 |
| ·His_6-GARP蛋白的纯化 | 第56-57页 |
| ·Western blotting印迹 | 第57-58页 |
| ·抗原的制备 | 第58页 |
| ·免疫小鼠 | 第58-59页 |
| ·ELISA检测抗体的效价 | 第59页 |
| ·八肋游仆虫总蛋白提取 | 第59页 |
| ·八肋游仆虫蛋白提取物的Wesren Blotting | 第59-60页 |
| 3 结果 | 第60-63页 |
| ·融合蛋白pRSETc-His_6-GARP的纯化 | 第60页 |
| ·Western印迹分析 | 第60-61页 |
| ·抗体制备及滴度测定 | 第61-62页 |
| ·抗体的特异性检测 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第五章 八肋游仆虫非融合蛋白GARP的表达纯化及光谱分析 | 第65-74页 |
| 1 材料 | 第65-66页 |
| ·菌株和质粒 | 第65页 |
| ·主要的酶、生化试剂及仪器 | 第65-66页 |
| ·寡聚核苷酸设计 | 第66页 |
| 2 方法 | 第66-67页 |
| ·非融合蛋白GARP的表达纯化和鉴定 | 第66-67页 |
| ·荧光光谱的测定 | 第67页 |
| ·紫外光谱的测定 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-71页 |
| ·重组质粒pRSETc-GARP的构建和鉴定 | 第67-68页 |
| ·重组质粒pRSETc-GARP在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达及纯化 | 第68-69页 |
| ·非融合蛋白GARP的Western Blotting鉴定 | 第69页 |
| ·GARP蛋白的荧光光谱分析 | 第69-70页 |
| ·Cu(Ⅱ)滴定融合蛋白His_6-GARP与非融合蛋白GARP的荧光光谱比较 | 第70-71页 |
| ·GARP蛋白的紫外光谱分析 | 第71页 |
| 4 讨论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 小结与展望 | 第74-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
