| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-40页 |
| ·蓝藻基因工程 | 第12-27页 |
| ·蓝藻基因组概述 | 第13-15页 |
| ·蓝藻基因工程载体 | 第15-17页 |
| ·蓝藻外源基因的转化方法 | 第17-19页 |
| ·蓝藻表达外源基因的研究进展 | 第19-20页 |
| ·蓝藻中外源基因的表达调控与高效表达策略 | 第20-27页 |
| ·人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF） | 第27-35页 |
| ·hGM-CSF 的结构特点及生物学活性 | 第27-30页 |
| ·hGM-CSF 的临床应用 | 第30-31页 |
| ·hGM-CSF 的研究进展 | 第31-35页 |
| ·本实验的研究内容、目的与意义 | 第35-40页 |
| ·本研究的内容 | 第35-36页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第36-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-56页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·质粒、菌株和蓝藻株 | 第40-41页 |
| ·工具酶和试剂 | 第41-42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-56页 |
| ·培养基的配制 | 第42-44页 |
| ·蓝藻的培养、纯化、保种及扩大培养 | 第44-45页 |
| ·目的基因的克隆 | 第45-48页 |
| ·载体的构建 | 第48-50页 |
| ·蓝藻的转化与筛选 | 第50-51页 |
| ·转基因藻的DNA 检测 | 第51-52页 |
| ·转基因藻的Western Blot 分析 | 第52-54页 |
| ·转基因藻生理活性的检测 | 第54-55页 |
| ·转基因藻培养条件的优化 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-84页 |
| ·Pcpcβ启动hGM-CSF 基因在鱼腥藻7120 中的表达与检测 | 第56-70页 |
| ·穿梭表达载体pDC-C-GM 的构建 | 第56-60页 |
| ·cGM 藻株的获得 | 第60-62页 |
| ·cGM 藻株的检测 | 第62-63页 |
| ·cGM 藻株培养条件的优化 | 第63-68页 |
| ·cGM 藻株生理曲线的测定 | 第68-70页 |
| ·PgroESL 启动hGM-CSF 基因在鱼腥藻7120 中的表达与检测 | 第70-84页 |
| ·穿梭表达载体pDC-G-GM 的构建 | 第70-74页 |
| ·gGM 藻株的获得 | 第74-75页 |
| ·gGM 藻株的检测 | 第75-77页 |
| ·gGM 藻株培养条件的优化 | 第77-81页 |
| ·gGM 藻株生理曲线的测定 | 第81-84页 |
| 4 讨论 | 第84-90页 |
| ·在鱼腥藻7120 中表达hGM-CSF 基因的可行性 | 第84-86页 |
| ·利用基因工程手段制备 hGM-CSF 的必要性 | 第84-85页 |
| ·利用鱼腥藻7120作为宿主表达hGM-CSF有一定的优越性 | 第85页 |
| ·在鱼腥藻7120 中成功稳定地表达了hGM-CSF | 第85-86页 |
| ·转录水平上的调控对外源基因在蓝藻中表达的影响 | 第86-87页 |
| ·启动子对外源基因表达效率的影响 | 第86-87页 |
| ·PcpcB 及PgroESL 成功地提高了外源基因hGM-CSF 在7120 中的表达 | 第87页 |
| ·替换启动子的外源基因hGM-CSF 的转入对转基因藻生长的影响 | 第87页 |
| ·通过优化培养条件提高转基因藻的生长 | 第87-90页 |
| ·不同温度条件对转基因藻生长的影响 | 第87-88页 |
| ·不同pH 对转基因藻生长的影响 | 第88页 |
| ·不同光照强度对转基因藻生长的影响 | 第88-90页 |
| 5 总结 | 第90-92页 |
| ·克隆启动子PcpcB 及PgroESL 并构建穿梭表达载体pDC-C-GM 和pDC-G-GM | 第90页 |
| ·获得了两个转基因鱼腥藻 cGM 和 gGM 藻株并对其进行检测 | 第90-91页 |
| ·转基因藻株培养条件的优化 | 第91页 |
| ·展望 | 第91-92页 |
| 6 参考文献 | 第92-104页 |
| 附录 | 第104-106页 |
| 符号与缩写表 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
