| 第一章 文献综述 | 第1-36页 |
| ·溶菌酶简介 | 第19-23页 |
| ·溶菌酶的结构及作用机理 | 第19-21页 |
| ·溶菌酶的应用 | 第21-22页 |
| ·在食品工业中的应用 | 第21页 |
| ·在医疗中的应用 | 第21页 |
| ·在生物工程中的应用 | 第21-22页 |
| ·现阶段溶菌酶的分离纯化方法 | 第22-23页 |
| ·直接结晶法 | 第22页 |
| ·亲和色谱法 | 第22-23页 |
| ·超滤与亲和色谱法结合 | 第23页 |
| ·对几种方法的简要总结 | 第23页 |
| ·人溶菌酶简介 | 第23-28页 |
| ·人溶菌酶的分子结构和空间构象 | 第23-24页 |
| ·人溶菌酶的理化性质和生物学作用 | 第24页 |
| ·重组人溶菌酶开发的重要意义 | 第24-27页 |
| ·人溶菌酶较其它溶菌酶的优点 | 第24-25页 |
| ·人溶菌酶的药理作用 | 第25页 |
| ·人溶菌酶在人体内的分布 | 第25-26页 |
| ·人溶菌酶应用发展前景 | 第26-27页 |
| ·重组人溶菌酶研究、生产的现状 | 第27-28页 |
| ·以大肠杆菌作宿主 | 第27-28页 |
| ·以巴斯德毕赤酵母作宿主 | 第28页 |
| ·以霉菌作宿主 | 第28页 |
| ·酵母表达系统 | 第28-35页 |
| ·异源蛋白在酵母菌中表达的一般步骤 | 第29页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展 | 第29-35页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统简介 | 第29-30页 |
| ·表达载体的发展 | 第30-32页 |
| ·受体菌的发展 | 第32页 |
| ·外源蛋白在巴斯德毕赤酵母中高效表达的策略 | 第32-34页 |
| ·总结和展望 | 第34-35页 |
| ·本实验采用的酵母表达系统 | 第35页 |
| ·论文的新颖性 | 第35-36页 |
| 第二章 重组人溶菌酶发酵条件的研究 | 第36-54页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·发酵条件的初步探索 | 第36-50页 |
| ·实验材料和仪器 | 第36-38页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·仪器设备 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·菌种活化 | 第39页 |
| ·种子液的培养 | 第39-40页 |
| ·BMGY/BMMY重悬培养 | 第40页 |
| ·工业培养基发酵培养 | 第40页 |
| ·分析方法 | 第40-46页 |
| ·甘油残量的测定 | 第40-41页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第41-42页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第42-44页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第44-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-50页 |
| ·毕赤酵母的生长 | 第46-47页 |
| ·不同诱导时间对蛋白得率的影响 | 第47页 |
| ·混合碳源对蛋白得率的影响 | 第47-49页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50页 |
| ·发酵条件的优化 | 第50-53页 |
| ·工业培养基碳源、氮源的优化 | 第50-51页 |
| ·碳源的优化 | 第51页 |
| ·氮源的优化 | 第51页 |
| ·诱导期间pH的优化 | 第51-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 第三章 重组人溶菌酶分离纯化的研究 | 第54-71页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·分离纯化初步探索 | 第54-64页 |
| ·中空纤维膜 | 第54-55页 |
| ·实验材料与仪器 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54页 |
| ·实验结果与讨论 | 第54-55页 |
| ·阴离子交换层析 | 第55-56页 |
| ·实验材料与仪器 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·实验结果与讨论 | 第56页 |
| ·阳离子交换层析 | 第56-58页 |
| ·实验材料与仪器 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57页 |
| ·实验结果与讨论 | 第57-58页 |
| ·金属螯合层析 | 第58-60页 |
| ·实验材料与仪器 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-59页 |
| ·实验结果与讨论 | 第59-60页 |
| ·三种层析方法的比较 | 第60页 |
| ·热沉淀及对目标蛋白的变性与复性 | 第60-64页 |
| ·热沉淀 | 第61-62页 |
| ·实验材料与仪器 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61页 |
| ·实验结果与讨论 | 第61-62页 |
| ·目标蛋白的变性与复性 | 第62-64页 |
| ·实验材料与仪器 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63页 |
| ·实验结果与讨论 | 第63-64页 |
| ·分离纯化方法的优化 | 第64-70页 |
| ·实验材料与仪器 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·仪器设备 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·溶液的配制 | 第65页 |
| ·离子交换层析柱的再生 | 第65页 |
| ·不同pH值对SPFF强阳离子层析柱纯化水平的影响 | 第65页 |
| ·不同NaCl盐浓度对SPFF强阳离子层析柱纯化水平的影响 | 第65-66页 |
| ·不同pH值对DEAE弱阴离子层析柱纯化水平的影响 | 第66页 |
| ·阴阳离子交换层析柱祸合操作 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-70页 |
| ·不同pH值对SPFF强阳离子层析柱纯化水平的影响 | 第67-68页 |
| ·不同NaCl盐浓度对SPFF强阳离子层析柱纯化水平的影响 | 第68-69页 |
| ·不同pH值对DEAE弱阴离子层析柱纯化水平的影响 | 第69页 |
| ·阴阳离子交换层析柱耦合电泳检测结果 | 第69-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 第四章 酶切与活性检测 | 第71-77页 |
| ·酶切 | 第71-72页 |
| ·实验材料和仪器 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71页 |
| ·溶液的配制 | 第71页 |
| ·酶切 | 第71页 |
| ·酶切结果 | 第71-72页 |
| ·活性检测 | 第72-76页 |
| ·实验材料与仪器 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·仪器设备 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-74页 |
| ·热激法 | 第73页 |
| ·比浊法 | 第73-74页 |
| ·实验结果 | 第74-76页 |
| ·热激法活性检测结果 | 第74-75页 |
| ·溶壁微球菌比浊法活性检测结果 | 第75-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 第五章 结论与建议 | 第77-79页 |
| ·结论 | 第77页 |
| ·建议 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 附录一 培养基 | 第82-84页 |
| 附录二 电泳液 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第87页 |
